Antibiootikumiresistentsus on mikroobide resistentsus antimikroobsete ravimite suhtes. Baktereid tuleks pidada resistentseteks, kui neid ei neutraliseerita ravimi sellistes kontsentratsioonides, mis makroorganismis tegelikult tekivad. Resistentsus võib olla loomulik või omandatud.
Loomulik stabiilsus. Teatud tüüpi mikroobid on teatud tüüpi antibiootikumide suhtes looduslikult resistentsed kas sobiva sihtmärgi puudumise tõttu (näiteks mükoplasmadel ei ole rakuseina, mistõttu nad ei ole tundlikud kõikide sellel tasemel toimivate ravimite suhtes) või bakteriaalsest läbilaskvusest antud ravimi suhtes (näiteks gramnegatiivsed mikroobid, mis on suurte molekulaarsete ühendite suhtes vähem läbilaskvad kui grampositiivsed bakterid, kuna nende välismembraanil on "väikesed" poorid).
Omandatud vastupanu. Resistentsuse omandamine on bioloogiline muster, mis on seotud mikroorganismide kohanemisega keskkonnatingimustega. See on tõsi, kuigi erineval määral, kõigi bakterite ja kõigi antibiootikumide puhul. Mitte ainult bakterid, vaid ka teised mikroobid – alates eukarüootsetest vormidest (algloomad, seened) kuni viirusteni – kohanevad keemiaravi ravimitega. Mikroobide ravimiresistentsuse tekke ja leviku probleem on eriti oluline nn haiglatüvede põhjustatud nosokomiaalsete infektsioonide puhul, millel on reeglina mitmekordne antibiootikumiresistentsus (nn multiresistentsus).
Omandatud resistentsuse geneetiline alus. Antibiootikumiresistentsuse määravad ja säilitavad resistentsusgeenid (r-geenid) ja tingimused, mis soodustavad nende levikut mikroobipopulatsioonides. Omandatud ravimiresistentsus võib tekkida ja levida bakteripopulatsiooni kaudu järgmistel põhjustel:
- * mutatsioonid bakteriraku kromosoomis koos järgneva mutantide selektsiooniga (st. selektsiooniga). Selektsioon toimub eriti kergesti antibiootikumide juuresolekul, kuna sellistes tingimustes saavad mutandid eelise teiste ravimi suhtes tundlike populatsiooni rakkude ees. Mutatsioonid tekivad sõltumata antibiootikumi kasutamisest, st ravim ise ei mõjuta mutatsioonide esinemissagedust ega ole nende põhjus, vaid toimib valikufaktorina. Seejärel toodavad resistentsed rakud järglasi ja neid saab üle kanda järgmise peremehe (inimese või looma) kehasse, moodustades ja levitades resistentseid tüvesid. Mutatsioonid võivad olla: 1) ühekordsed (kui mutatsioon toimus ühes rakus, mille tulemusena sünteesitakse selles muutunud valgud) ja 2) mitmekordsed (mutatsioonide seeria, mille tulemusena mitte üks, vaid terve komplekt valkude muutused, näiteks penitsilliini siduvad valgud penitsilliiniresistentse pneumokoki korral);
- * ülekantavate resistentsusplasmiidide (R-plasmiidide) ülekanne. Resistentsus (transmissiivsed) plasmiidid kodeerivad tavaliselt ristresistentsust mitme antibiootikumide perekonna suhtes. Jaapani teadlased kirjeldasid esimest korda sellist mitmekordset resistentsust seoses soolebakteritega. Nüüdseks on näidatud, et seda esineb teistes bakterirühmades. Mõningaid plasmiide saab üle kanda eri liiki bakterite vahel, mistõttu võib sama resistentsusgeeni leida ka üksteisest taksonoomiliselt kaugel asuvates bakterites. Näiteks beetalaktamaas, mida kodeerib plasmiid TEM-1, on laialt levinud gramnegatiivsetes bakterites ning seda leidub Escherichia colis ja teistes soolebakterites, samuti penitsilliiniresistentsetes gonokokkides ja ampitsilliiniresistentsetes Haemophilus influenzae's;
- * r-geene (või migreeruvaid geneetilisi järjestusi) kandvate transposoonide ülekanne. Transposoonid võivad migreeruda kromosoomist plasmiidi ja tagasi, samuti plasmiidist teise plasmiidi. Sel viisil saab resistentsuse geene edasi anda tütarrakkudele või rekombinatsiooni teel teistele retsipientbakteritele.
Omandatud stabiilsuse rakendamine. Muutused bakterite genoomis toovad kaasa muutused bakteriraku mõningates omadustes, mille tulemusena muutub see resistentseks antibakteriaalsete ravimite suhtes. Tavaliselt saavutatakse ravimi antimikroobne toime sel viisil: aine peab seonduma bakteriga ja läbima selle membraani, seejärel toimetama toimekohta, misjärel ravim interakteerub rakusiseste sihtmärkidega. Omandatud ravimiresistentsuse rakendamine on võimalik igal järgmisel etapil:
- * sihtmärgi muutmine. Sihtensüümi saab muuta nii, et selle funktsioonid ei rikuta, kuid keemiaravi ravimiga seondumise võime (afiinsus) väheneb järsult või saab sisse lülitada ainevahetuse "möödaviigu", st aktiveeritakse mõni muu ensüüm. rakus, mida ravim ei mõjuta.
- * sihtmärgi “ligipääsmatus” rakuseina ja rakumembraanide läbilaskvuse vähenemise või “väljavoolumehhanismi” tõttu, kui rakk justkui “tõukab” antibiootikumi endast välja.
- * ravimi inaktiveerimine bakteriaalsete ensüümide poolt. Mõned bakterid on võimelised tootma spetsiaalseid ensüüme, mis muudavad ravimid inaktiivseks (nt beetalaktamaasid, aminoglükosiide modifitseerivad ensüümid, klooramfenikoolatsetüültransferaas). Beeta-laktamaasid on ensüümid, mis hävitavad beeta-laktaamtsükli, moodustades inaktiivseid ühendeid. Neid ensüüme kodeerivad geenid on bakterite seas laialt levinud ja neid võib leida kas kromosoomis või plasmiidis.
Beetalaktamaaside inaktiveeriva toime vastu võitlemiseks kasutatakse inhibeerivaid aineid (näiteks klavulaanhape, sulbaktaam, tasobaktaam). Need ained sisaldavad beetalaktaamtsüklit ja on võimelised seonduma beetalaktamaasidega, hoides ära nende hävitava toime beetalaktaamidele. Selliste inhibiitorite sisemine antibakteriaalne toime on aga madal. Klavulaanhape inhibeerib enamikku teadaolevaid beetalaktamaase. See on kombineeritud penitsilliinidega: amoksitsilliin, tikartsilliin, piperatsilliin.
Bakterite antibiootikumiresistentsuse teket on peaaegu võimatu ära hoida, kuid antimikroobseid ravimeid tuleb kasutada nii, et see ei aitaks kaasa resistentsuse tekkele ja levikule (eelkõige kasutada antibiootikume rangelt vastavalt näidustustele, vältida nende teket). kasutada profülaktilistel eesmärkidel, vahetada antibiootikumravi 10-15 päeva pärast ravimit, võimalusel kasutada kitsa toimespektriga ravimeid, piirata antibiootikumide kasutamist veterinaarmeditsiinis ja mitte kasutada kasvufaktorina). Nr 45 Bakterite antibiootikumide suhtes tundlikkuse määramise meetodid.
Bakterite tundlikkuse määramiseks antibiootikumide suhtes (antibiootikumogrammid) kasutatakse tavaliselt järgmist:
- *Agar difusiooni meetod. Uuritav mikroob inokuleeritakse agari toitekeskkonnale ja seejärel lisatakse antibiootikumid. Tavaliselt lisatakse ravimid kas agari spetsiaalsetesse süvenditesse või asetatakse inokulatsiooni pinnale antibiootikumidega kettad ("ketta meetod"). Tulemused registreeritakse igal teisel päeval, võttes aluseks mikroobide kasvu olemasolu või puudumise aukude (ketaste) ümber. Kettameetod on kvalitatiivne ja võimaldab hinnata, kas mikroob on ravimi suhtes tundlik või resistentne.
- * Minimaalse inhibeeriva ja bakteritsiidse kontsentratsiooni määramise meetodid ehk antibiootikumi minimaalne tase, mis võimaldab in vitro vältida mikroobide nähtavat kasvu toitainekeskkonnas või selle täielikult steriliseerida. Need on kvantitatiivsed meetodid, mis võimaldavad teil arvutada ravimi annust, kuna antibiootikumi kontsentratsioon veres peab olema oluliselt kõrgem kui nakkustekitaja minimaalne inhibeeriv kontsentratsioon. Efektiivseks raviks ja resistentsete mikroobide tekke ennetamiseks on vajalik ravimi piisavate annuste manustamine.
On olemas kiirendatud meetodid, mis kasutavad automaatseid analüsaatoreid.
Bakterite tundlikkuse määramine antibiootikumide suhtes ketta meetodil. Uuritav bakterikultuur inokuleeritakse Petri tassis toitaineagarile või AGV söötmele.
AGV sööde: kuiv toitainekalapuljong, agar-agar, dinaatriumfosfaat. Sööde valmistatakse kuivpulbrist vastavalt juhistele.
Inokuleeritud pinnale asetatakse pintsettidega üksteisest võrdsel kaugusel paberkettad, mis sisaldavad teatud annuseid erinevaid antibiootikume. Põllukultuure inkubeeritakse 37 °C juures järgmise päevani. Uuritud bakterikultuuri kasvu inhibeerimise tsoonide läbimõõtu kasutatakse selle tundlikkuse hindamiseks antibiootikumide suhtes.
Usaldusväärsete tulemuste saamiseks on vaja kasutada standardseid kettaid ja toitekeskkonda, mille tõrjeks kasutatakse vastavate mikroorganismide võrdlustüvesid. Kettameetod ei anna usaldusväärseid andmeid mikroorganismide tundlikkuse määramisel polüpeptiidantibiootikumide suhtes, mis difundeeruvad halvasti agarisse (näiteks polümüksiin, ristomütsiin). Kui neid antibiootikume kavatsetakse kasutada raviks, on soovitatav määrata mikroorganismide tundlikkus seerialahjenduse teel.
Bakterite tundlikkuse määramine antibiootikumide suhtes seerialahjendusmeetodil. See meetod määrab antibiootikumi minimaalse kontsentratsiooni, mis pärsib uuritava bakterikultuuri kasvu. Esmalt valmistage põhilahus, mis sisaldab teatud kontsentratsioonis antibiootikumi (µg/ml või RÜ/ml) spetsiaalses lahustis või puhverlahuses. Sellest valmistatakse kõik järgnevad lahjendused puljongis (mahus 1 ml), mille järel lisatakse igale lahjendusele 0,1 ml uuritavat bakterisuspensiooni, mis sisaldab 1 ml-s 106–107 bakterirakku. Viimasesse katseklaasi lisage 1 ml puljongit ja 0,1 ml bakterisuspensiooni (kultuuri kontroll). Põllukultuure inkubeeritakse 37 °C juures kuni järgmise päevani, misjärel märgitakse katse tulemusi toitekeskkonna hägusus, võrreldes kultuurikontrolliga. Viimane läbipaistva toitekeskkonnaga katseklaas näitab uuritava bakterikultuuri kasvu aeglustumist selles sisalduva antibiootikumi minimaalse inhibeeriva kontsentratsiooni (MIC) mõjul.
Mikroorganismide antibiootikumide suhtes tundlikkuse määramise tulemusi hinnatakse spetsiaalse valmis tabeli abil, mis sisaldab resistentsete, mõõdukalt resistentsete ja tundlike tüvede kasvu inhibeerimise tsoonide läbimõõtude piirväärtusi ning MIC väärtusi. antibiootikumid resistentsete ja tundlike tüvede jaoks.
Tundlikud tüved hõlmavad mikroorganismide tüvesid, mille kasv pärsib ravimi kontsentratsiooni, mis on leitud patsiendi vereseerumis, kui kasutatakse tavalisi antibiootikumide annuseid. Mõõdukalt resistentsed tüved on need, mille kasvu pärssimine nõuab ravimi maksimaalsete annuste manustamisel tekkivaid kontsentratsioone vereseerumis. Resistentsed on mikroorganismid, mille kasvu ravim ei pärsi kontsentratsioonides, mis tekivad kehas maksimaalsete lubatud annuste kasutamisel.
Antibiootikumide määramine veres, uriinis ja muudes inimkeha vedelikes. Kaks rida katseklaase asetatakse riiulile. Ühes neist valmistatakse standardse antibiootikumi lahjendused, teises valmistatakse uuritava vedeliku lahjendused. Seejärel lisatakse igasse katseklaasi Hissi söötmes koos glükoosiga valmistatud testbakterite suspensioon. Penitsilliini, tetratsükliinide ja erütromütsiini määramisel uuritavas vedelikus kasutatakse testitava bakterina S. aureus'e standardtüve ja streptomütsiini määramisel E. coli't. Pärast põllukultuuride inkubeerimist 18-20 tundi temperatuuril 37 °C märgitakse katse tulemusi söötme hägusus ja selle värvumine indikaatoriga, mis on tingitud glükoosi lagunemisest testbakterite poolt. Antibiootikumi kontsentratsioon määratakse, korrutades uuritava vedeliku kõrgeima lahjenduse, mis pärsib uuritavate bakterite kasvu, võrdlusantibiootikumi minimaalse kontsentratsiooniga, mis pärsib samade uuritavate bakterite kasvu.
Näiteks kui testvedeliku maksimaalne lahjendus, mis pärsib testitavate bakterite kasvu, on 1:1024 ja sama testitava bakteri kasvu pidurdava võrdlusantibiootikumi minimaalne kontsentratsioon on 0,313 μg/ml, siis toode 1024 - 0,313 = 320 μg/ml on antibiootikumi kontsentratsioon 1 ml-s.
S. aureuse beetalaktamaasi tootmise võime määramine. Lisage kolbi 0,5 ml penitsilliini suhtes tundliku stafülokoki standardtüve igapäevase puljongikultuuriga 20 ml sulatatud ja temperatuurini 45 °C jahutatud toitaineagarit, segage ja valage Petri tassi. Pärast agari tahkumist asetatakse söötme pinnale plaadi keskele penitsilliini sisaldav ketas. Uuritavad põllukultuurid külvatakse ketta raadiustes silmusena. Põllukultuure inkubeeritakse 37 °C juures kuni järgmise päevani, misjärel märgitakse üles katse tulemused. Uuritud bakterite võimet toota beetalaktamaasi hinnatakse standardse stafülokoki tüve kasvu olemasolu järgi ühe või teise katsekultuuri (ketta ümber) ümber. Nr 46 Ratsionaalse antibiootikumiravi põhimõtted.
Tüsistuste tekke vältimine seisneb eelkõige ratsionaalse antibiootikumiravi (antimikroobse keemiaravi) põhimõtete järgimises:
* Mikrobioloogiline põhimõte. Enne ravimi väljakirjutamist tuleb kindlaks teha infektsiooni põhjustaja ja määrata selle individuaalne tundlikkus antimikroobsete kemoterapeutikumide suhtes. Antibiogrammi tulemuste põhjal määratakse patsiendile kitsa toimespektriga ravim, millel on konkreetse patogeeni suhtes kõige tugevam toime, annuses, mis on 2-3 korda suurem kui minimaalne inhibeeriv kontsentratsioon. Kui haiguse põhjustaja on endiselt teadmata, määratakse tavaliselt laiema spektriga ravimid, mis on aktiivsed kõigi võimalike mikroobide vastu, mis seda patoloogiat kõige sagedamini põhjustavad.
Ravi korrigeerimine viiakse läbi, võttes arvesse bakterioloogilise uuringu tulemusi ja konkreetse patogeeni individuaalse tundlikkuse määramist (tavaliselt 2-3 päeva pärast). Nakkuse raviga tuleb alustada võimalikult varakult (esiteks on haiguse alguses organismis vähem mikroobe ja teiseks mõjuvad ravimid aktiivsemalt mikroobide kasvule ja paljunemisele).
- * Farmakoloogiline põhimõte. Arvesse võetakse ravimi omadusi – selle farmakokineetikat ja farmakodünaamikat, jaotumist organismis, manustamissagedust, ravimite kombineerimise võimalust jne.. Ravimite annused peavad olema piisavad, et tagada bioloogilistes vedelikes ja kudedes mikrobistaatiline või mikrobitsiidne kontsentratsioon. On vaja mõista ravi optimaalset kestust, kuna kliiniline paranemine ei ole põhjus ravimi kasutamise katkestamiseks, sest patogeenid võivad organismis püsida ja haigus võib korduda. Arvesse võetakse ka ravimite optimaalseid manustamisviise, kuna paljud antibiootikumid imenduvad seedetraktist halvasti või ei tungi läbi hematoentsefaalbarjääri.
- * Kliiniline põhimõte. Ravimi väljakirjutamisel võtavad nad arvesse, kui ohutu see konkreetsele patsiendile on, mis sõltub patsiendi seisundi individuaalsetest omadustest (infektsiooni raskusaste, immuunstaatus, sugu, rasedus, vanus, maksa- ja neerufunktsiooni seisund, kaasuvad haigused jne) Rasketel juhtudel Eluohtlike infektsioonide korral on õigeaegne antibiootikumravi eriti oluline. Sellistele patsientidele määratakse kahe või kolme ravimi kombinatsioonid, et tagada võimalikult lai toimespekter. Mitme ravimi kombinatsiooni määramisel peaksite teadma, kui tõhus on nende ravimite kombinatsioon patogeeni vastu ja kui ohutu see patsiendile on, st et ei tekiks ravimite antagonismi antibakteriaalse toime suhtes ja nende toksilisi mõjusid ei ole kokku võetud.
- * Epidemioloogiline põhimõte. Ravimi valikul, eriti statsionaarsele patsiendile, tuleks arvesse võtta antud osakonnas, haiglas ja isegi piirkonnas ringlevate mikroobitüvede resistentsuse staatust. Tuleb meeles pidada, et antibiootikumiresistentsust ei saa mitte ainult omandada, vaid ka kaotada, samal ajal taastub mikroorganismi loomulik tundlikkus ravimi suhtes. Ainult loomulik stabiilsus ei muutu.
- * Farmatseutiline põhimõte. Arvesse tuleb võtta aegumiskuupäeva ja järgida ravimi säilitamise reegleid, kuna nende reeglite rikkumisel ei pruugi antibiootikum mitte ainult kaotada oma aktiivsust, vaid muutuda lagunemise tõttu ka mürgiseks. Samuti on oluline ravimi maksumus.
Mikroorganismide ravimiresistentsus mikroorganismide võime säilitada elutähtsat aktiivsust, sealhulgas hoolimata kokkupuutest keemiaravi ravimitega. () mikroorganismid eristuvad taluvuse poolest, mille puhul mikroobirakud ei sure keemiaravi ravimite juuresolekul autolüütiliste ensüümide vähenemise tõttu, kuid ei paljune ka. L.u.m. - laialt levinud nähtus, mis segab nakkushaiguste ravi. Enim uuritud bakterid. Esineb ravimiresistentsust, mis on mikroorganismidele loomulikult omane ja mis tekib mutatsioonide või võõraste geenide omandamise tulemusena. Looduslik L.s.m. on põhjustatud keemiaravi ravimite sihtmärgi puudumisest mikroobirakus või mikroobse rakumembraani läbilaskvusest nende suhtes. See on reeglina iseloomulik kõigile antud bakteriliigi (mõnikord perekonna) esindajatele seoses konkreetse keemiaravi ravimite rühmaga. Näited hõlmavad mükoplasmade resistentsust penitsilliini suhtes, kuna neil puudub rakuseina ja selle sünteesi ensüümid - penitsilliini sihtmärgid, samuti Pseudomonas aeruginosa resistentsus erütromütsiini suhtes, kuna viimane ei suuda tungida läbi oma membraani. selle sihtmärgid, ribosoomid. Algselt spetsiifiliste keemiaravi ravimite suhtes tundlike liikide esindajate mutatsioonide või võõraste geenide omandamise tagajärjel tekkinud mikroorganismide ravimiresistentsus on muutunud laialt levinud selektiivse tausta tõttu, mida laialdaselt kasutatavad ravimid loovad spetsiifiliselt resistentsete bakterivormide ellujäämiseks. Seega ulatub penitsilliiniresistentsete stafülokokkide avastamise sagedus mõnes piirkonnas 80-90%, streptomütsiiniresistentsete - 60-70%, ampitsilliiniresistentsete shigella - 90%, tetratsükliini ja streptomütsiini suhtes resistentsete - üle 50% jne. Sõltuvalt resistentsust määravate geenide paiknemisest kromosoomis või plasmiidis on tavaks eristada kromosoomset ja plasmiidist päritolu L.m. Plasmiidgeene saab aga kaasata kromosoomi, kromosomaalseid geene võib leida replikonist. Selle põhjuseks on transposoonide olemasolu - geneetilised elemendid, mis on võimelised rakus ühelt replikonilt teisele üle minema. Geneetilise materjali vahetus bakterites konjugatsiooni ja transduktsiooni kaudu aitab kaasa resistentsusgeenide kiirele levikule sama liigi (harvemini perekonna) tüvede vahel. Selektiivne, mis on loodud mitmete pidevalt kasutatavate antibiootikumide poolt, võib kaasa tuua mitmete keemiaravi ravimite suhtes resistentsuse geenide kaasamise plasmiidi. Tänu sellele tekivad nn multiresistentsed bakteritüved. Plasmiidi replikon võib sisaldada samaaegselt mitut geeni, mis annavad resistentsuse ühe antimikroobse aine suhtes, kuid erinevate mehhanismide kaudu. Konkreetse antimikroobse aine suhtes resistentsusega seotud geenid võivad paikneda samas rakus nii kromosoomides kui ka plasmiidides, kodeerides erinevaid resistentsuse mehhanisme. Mikroorganismide ravimiresistentsus on sageli indutseeritav, s.t. resistentsuse geenide ekspressioon toimub alles pärast raku kokkupuudet antimikroobse ainega. Selle näiteks on inaktiveeriva ensüümi sagedane moodustumine pärast bakterikultuuri kokkupuudet beetalaktaamantibiootikumiga. Mikroorganismide ravimiresistentsus on tingitud järgmistest peamistest mehhanismidest: antimikroobse aine ensümaatiline inaktiveerimine, selle tungimise nõrgenemine patogeeni rakku, muutused antimikroobse aine rakusisese sihtmärgi konformatsioonis, mis takistab selle koostoimet sihtmärgiga, suurema arvu sihtmolekulide moodustumine, millele antimikroobne aine toimib. Hüdrolaaside esindajad on tuntud kui inaktiveerivad ensüümid - beetalaktamaasid, mis katalüüsivad beeta-laktaamtsüklit penitsilliinides, tsefalosporiinides ja teistes beetalaktaamides (monobaktaamid, karbapeneemid jne), samuti esteraase, mis toimivad mõnele teisele struktuurile. sellele. Teine inaktiveerivate ensüümide rühm on . Nende hulka kuuluvad klooramfenikool-(klooramfenikool-)-atsetüültransferaasid, aminoglükosiidatsetüül-, fosfo- või adenülüültransferaasid ja need, mis toimivad erütromütsiini. Beeta-laktamaase toodavad paljud grampositiivsed ja gramnegatiivsed bakterid. Kodeeritud nii kromosomaalsete kui ka plasmiidsete geenide poolt. Beeta-laktamaaside klassifitseerimise süsteeme on mitu, mis põhinevad nende substraadi spetsiifilisusel, tundlikkusel inhibiitorite suhtes, isoelektrilisel punktil ja muudel näitajatel. beetalaktamaasid penitsillinaasidele ja tsefalosporinaasidele on suures osas tingimuslikud. Gram-positiivsete bakterite beetalaktamaasid eralduvad reeglina väliskeskkonda, gramnegatiivsed bakterid aga tsütoplasmaatilises membraanis ja periplasmaatilises ruumis (välismembraani all). Ühes rakus võivad esineda nii kromosomaalset kui ka plasmiidset päritolu beetalaktamaasid. Transferaasid katalüüsivad reaktsiooni, mille käigus asendatakse antibiootikumi funktsionaalne rühm äädik-, fosfor- või adenüülhappe jäägiga. Aminoglükosiidantibiootikumide kasutamisel on kirjeldatud aminorühmade (N-atsetaalimine) ja hüdroksüülrühmade (O-fosforüülimine ja O-adenüülimine) asendamist. Üks mõjutab tavaliselt ühte funktsionaalset rühma. Kirjeldatud on ka klooramfenikooli ja erütromütsiini O-fosforüülimist. Antibiootikumid, mida on muudetud, kaotavad. Transferaasid võivad mängida kaitsvat rolli ainult (doonorfosfor- või adenüülhappejääk) või koensüüm A (doonoratsetüüljääk) juuresolekul, mistõttu nende kaitsev roll väliskeskkonda ülekandmisel kaob. Enamasti neid rakust ei vabastata. Bakterirakumembraani läbilaskvus keemiaravi ravimitele nõrgeneb poriinvalkude ja nende poolt tekkivate veekanalite arvu vähenemise tõttu välismembraanis, mille kaudu ravimid difundeeruvad. Sellist L.u.m mehhanismi saab realiseerida seoses beetalaktaamidega, aminoglükosiididega, fluorokinoloonidega jne. Tugeva hüdrofoobsusega antimikroobsed ained (mõned penitsilliinid, fluorokinoloonid jne) tungivad rakku läbi välismembraani lipiidide piirkondade. Muutused lipiidide struktuuris võivad mõjutada L.m-i, näiteks, mõned antibiootikumid tungivad läbi tsütoplasmaatilise membraani, kasutades energiast sõltuvaid spetsiifilisi transpordisüsteeme. Toimivate tsütokroomi elektronide transpordisüsteemide puudumisel aminoglükosiidide ülekanne rakku peatub. See seletab aminoglükosiidide aktiivsuse järsku langust anaeroobsetes tingimustes ja anaeroobide loomulikku vastupanuvõimet neile. Tetratsükliiniresistentsuse mehhanism on seotud rakumembraani muutustega. Kromosomaalsete või plasmiidsete geenide poolt kodeeritud membraani TET-valkude tõttu toimub sel juhul reeglina kiire rakku tunginud tetratsükliinide molekulide eliminatsioon, millel pole aega oma sihtmärgiga - ribosoomiga - reageerida. Resistentsus antibiootikumi vankomütsiini suhtes on seotud valkude ilmumisega tsütoplasma membraani, mis kaitsevad, s.o. Sellele ei pääse ligi peptidoglükaani peptiidahelad, millega ta reageerib selle polümeeri kokkupanemise ajal. Sihtmärgi konformatsiooni muutust täheldatakse sageli siis, kui mikroorganismid on resistentsed beetalaktaamide, fluorokinoloonide ja muude keemiaravi ravimite suhtes. bakteriraku seina peptidoglükaan - transpeptadaas ja D 1 D-karboksüpeptidaas (nn penitsilliini sidumine) biosüntees lõpetavad konformatsiooni muutumisel beeta-laktaamide sidumise ja DNA güraas (fluorokinoloonide sihtmärk) lõpetab nende keemiaravi ravimitega reageerimise. Resistentsus aminoglükosiidide suhtes võib olla tingitud nende seondumise vähenemisest ribosoomidega üksikute ribosoomivalkude konformatsiooni muutuste tulemusena. Resistentsus erütromütsiini suhtes selle sihtmärgi (ribosoomide) tasemel on tingitud spetsiifilisest ribosomaalsest metüülimisest ribosoomi suures subühikus. See hoiab ära erütromütsiini reaktsiooni ribosoomidega. Resistentsusega trimetoprimi suhtes täheldati rakus sihtmolekulide arvu suurenemist ja sellest tulenevalt resistentsust antimikroobse aine suhtes, mis on põhjustatud foolhappe reduktaasi suurenenud moodustumisest. Antibiootikumiresistentsete bakterite selektsiooni ja laialdast levikut soodustab antibiootikumide ebaratsionaalne ja põhjendamatu kasutamine. Mikroorganismide resistentsus võib olla seotud patogeenide kasvufaasiga põletikukohas, kui nende arv ulatub 10 8-ni. -
10 9 inimest ühes ml uuritava materjali homogeniseeritud proov. Selles faasis mikroobirakud lakkavad ja patogeen muutub paljude antimikroobsete ravimite inhibeeriva toime suhtes ükskõikseks või vähem tundlikuks. Teadaolevaid raskusi keemiaravis põhjustavad bakterite L-vormid, mis erinevad tundlikkuse poolest normaalse rakuseinaga algbakteritest. Patogeenid võivad olla antimikroobsete ravimite suhtes resistentsed, kui need on seotud neid ravimeid inaktiveerivate bakteritega. Antibiootikumide aktiivsust mõjutavad ka keskkonna pH väärtus, anaerobioosi aste, võõrainete olemasolu, mittespetsiifilise resistentsuse ja immuunsustegurite seisund ning ravimitevahelised koostoimed. Seente ja algloomade ravimiresistentsuse mehhanismidel on tunnused, mis on seotud nende rakkude struktuurse korralduse ja keemilise koostisega. On täheldatud, et seente resistentsus tsütoplasmaatilise membraani steroolidega reageerivate polüeenide (nüstatiin, amfoteritsiin B jt) suhtes suureneb veidi steroolide hulga vähenemisel membraanis või molekulaarsete muutuste tagajärjel. membraani organiseerimine, mis viib polüeeni kokkupuute vähenemiseni steroolidega. Viiruste ravimiresistentsust on vähe uuritud. On näidatud, et kui nukleosiide kasutatakse viirusevastaste ainetena, võib resistentsust seostada mutatsioonidega viiruse tümidiini kinaasi geenides või DNA polümeerides. .
Seega võib herpes simplex viiruste põhjustatud keratiidi korral tekkida resistentsus idoksuridiini suhtes. Herpes simplex viiruse mutantidel. resistentne vidarabiini suhtes, on DNA polümeraasi geen muutunud. Järeldus mikroorganismide tundlikkuse või resistentsuse kohta tehakse nende kasvu pärssimise tsooni suuruse määramise põhjal tihedal toitainekeskkonnal antimikroobsete ainetega immutatud ketaste ümber (ketta difusioonimeetod). Antimikroobseid ravimeid kasutatakse ka tahkes ja vedelas toitainekeskkonnas (vt Mikrobioloogiline diagnostika viirusevastaste ravimite määramisel kasutatakse rakukultuuris viiruste kasvatamise meetodeid). kanaembrüod või laboriloomad. L.u.m-i ületamine saavutatakse mitmel viisil: antimikroobsete ravimite nn küllastusdooside kasutuselevõtuga, mis suudavad pärssida suhteliselt resistentsete mikroorganismide kasvu, jätkates ravi piisavalt suurte ravimite annustega ja järgides soovitatud režiimi. Kliinikus kasutatavate antibiootikumide vahetamine ja kombineerimine on väga tõhus võitluses ravimresistentsete mikroorganismidega. Kuid näiteks bakteriostaatilise antibiootikumi kombineerimisel bakteritsiidse antibiootikumiga (klooramfenikool koos penitsilliiniga), on võimalik ravimitevaheline antagonism, mis viib antimikroobse toime nõrgenemiseni. Beeta-laktaamantibiootikumide kaitsmiseks bakteriaalsete beeta-laktamaaside eest kasutatakse nende ensüümide inhibiitoreid - klavulaanhapet, sulbaktaami (penitsillaanhappe sulfoon) jne. Klavulaanhappe avastamine, mis sisaldab beeta-laktaamtsüklit ja blokeerib mitmeid beeta- -laktamaasid, stimuleerisid erinevate ensüümi inhibiitorite (substraatide analoogide) otsimist, mis võimaldab oluliselt laiendada antibiootikumide kasutamist, mis on tundlikud neid inaktiveerivate ensüümide suhtes. Käimas on ka uute looduslike antibiootikumide otsimine ja juba tuntud antibiootikumide keemiline modifitseerimine, et saada juba kasutatud ravimite suhtes resistentsete bakterite vastu tõhusaid antimikroobseid aineid. Ravimiresistentsete mikroorganismide süstemaatiline tuvastamine ja õigeaegne teave neis piirkondades ringlevate ravimiresistentsuse fenotüüpide kohta võimaldab suunata arsti loomulikult toimespektri ja soodsaimate ravimite kombinatsioonide poolest sobivaima ravimi kasutamise poole. võttes arvesse nende võimalikku kokkusobimatust (vt Ravimite kokkusobimatus) .
Põllumajandussaaduste kasvustimulaatoritena. loomade, veterinaarmeditsiini ja taimekasvatuse puhul on soovitatav mitte kasutada kliinikus kasutatavaid antibiootikume, mis põhjustavad ristresistentsust meditsiiniliste antibiootikumide suhtes. Bibliograafia: Briand L.E. Bakterite resistentsus ja tundlikkus keemiaravi suhtes. inglise keelest, M., 1984; Lancini D. ja Parenti F., trans. inglise keelest, lk. 89. M., 1985; Navashin S.M. ja Fomina I.P. Ratsionaalne, lk. 25, M., 1982; Franklin T. ja Snow J. antimikroobne toime, inglise keelest tõlgitud, lk. 197, M., 1984.
1. Väike meditsiinientsüklopeedia. - M.: Meditsiiniline entsüklopeedia. 1991-96 2. Esmaabi. - M.: Suur vene entsüklopeedia. 1994 3. Meditsiiniterminite entsüklopeediline sõnastik. - M.: Nõukogude entsüklopeedia. - 1982-1984.
- - bakterite ekstrakromosomaalsed (kromosoomile lisaks) geneetilised struktuurid, mis on võimelised autonoomselt paljunema ja eksisteerivad bakteriraku tsütoplasmas. Mõned plasmiidid võivad teatud sagedusega sisse lülituda ... ... Meditsiiniline entsüklopeedia
Antimikroobsed ained, mis on oma keemilises struktuuris 5 nitrofuraani derivaadid. Meditsiinipraktikas kasutatavate N. hulka kuuluvad furatsilin, furagin, furadonin, furazolidoon ja furazolin. N. omavad laia spektrit antimikroobseid... ... Meditsiiniline entsüklopeedia
Vaata ka: Tuberkuloos Tuberkuloosi, eriti selle kopsuväliste vormide ravi on keeruline teema, mis nõuab palju aega ja integreeritud lähenemist. Sisu 1 Tuberkuloosi tekitaja ravimiresistentsuse tüübid ... Wikipedia
Selle artikli stiil on mitteentsüklopeediline või rikub vene keele norme. Artiklit tuleks parandada vastavalt Vikipeedia stiilireeglitele. Tuberkuloos ... Wikipedia
ravimiresistentsus- ravimiresistentsus (resistentsus) mikroorganismide resistentsus ravimi suhtes - [inglise-vene sõnastik vaktsinoloogia ja immuniseerimise põhiterminite kohta. Maailma Terviseorganisatsioon, 2009] Teemad... ... Tehniline tõlkija juhend
Mikroorganismide antibiootikumiresistentsus
In vivo (organismis) mikroobidele selektiivselt mõjutavate antibiootikumide avastamisega võib tunduda, et kätte on jõudnud inimese lõpliku võidu ajastu nakkushaiguste üle. Kuid peagi avastati patogeensete mikroobide üksikute tüvede resistentsuse (resistentsuse) nähtus antibiootikumide hävitava toime suhtes. Antibiootikumide praktilise kasutamise kestuse ja ulatuse kasvades suurenes ka resistentsete mikroorganismitüvede arv. Kui 40ndatel pidid arstid tegelema üksikute mikroobide resistentsete vormide põhjustatud infektsioonijuhtumitega, siis praegu ületab näiteks penitsilliini, streptomütsiini, klooramfenikooli (klooramfenikooli) suhtes resistentsete stafülokokkide arv 60–70%. Mis seletab antibiootikumiresistentsuse fenomeni?
Mikroorganismide resistentsust antibiootikumide toimele põhjustavad mitmed põhjused. Põhimõtteliselt taanduvad need järgmisele. Esiteks, igas substraadi teatud alal koos eksisteerivates mikroorganismide kogumis leidub looduslikult antibiootikumiresistentseid variante (umbes üks isend miljoni kohta). Kui populatsioon puutub kokku antibiootikumiga, sureb suurem osa rakkudest (kui antibiootikumil on bakteritsiidne toime) või lakkab areng (kui antibiootikumil on bakteriostaatiline toime). Samal ajal jätkavad antibiootikumi suhtes resistentsed üksikud rakud takistamatult paljunemist. Nende rakkude antibiootikumiresistentsus on päritav, mis põhjustab uue antibiootikumiresistentse populatsiooni. Sel juhul toimub resistentsete variantide valik (valik) antibiootikumi abil. Teiseks võivad antibiootikumitundlikud mikroorganismid läbida kohanemisprotsessi (kohandumine) antibiootikumi kahjulike mõjudega. Sellisel juhul võib ühelt poolt toimuda mõnede lülide asendamine mikroorganismi ainevahetuses, mille loomulikku kulgu antibiootikum rikub, teiste lülidega, mida ravim ei mõjuta. Sellisel juhul ei pärsi antibiootikum ka mikroorganismi. Teisest küljest võivad mikroorganismid hakata intensiivselt tootma aineid, mis hävitavad antibiootikumi molekuli, neutraliseerides seeläbi selle mõju. Näiteks toodavad mitmed stafülokokkide tüved ja eoseid kandvad bakterid ensüümi penitsillinaasi, mis hävitab penitsilliini, moodustades produkte, millel puudub antibiootiline toime. Seda nähtust nimetatakse antibiootikumide ensümaatiliseks inaktiveerimiseks.
Huvitav on märkida, et penitsillinaas on nüüdseks leidnud praktilist kasutust antidoodina – ravimina, mis eemaldab penitsilliini kahjulikud mõjud, kui see põhjustab tõsiseid allergilisi reaktsioone, mis ohustavad patsiendi elu.
Mikroorganismid, mis on resistentsed ühe antibiootikumi suhtes, on samaaegselt resistentsed ka teiste antibiootikumide suhtes, mis on oma toimemehhanismilt sarnased esimesega. Seda nähtust nimetatakse ristresistentsuseks. Näiteks mikroorganismid, mis muutuvad resistentseks tetratsükliini suhtes, muutuvad samaaegselt resistentseks kloortetratsükliini ja oksütetratsükliini suhtes.
Lõpuks on olemas mikroorganismide tüved, mis sisaldavad oma rakkudes nn R-faktoreid ehk resistentsusfaktoreid (resistentsus). R-faktorite levik patogeensete bakterite seas vähendab enim paljude antibiootikumidega ravi efektiivsust võrreldes teist tüüpi mikroobiresistentsusega, kuna põhjustab samaaegselt resistentsust mitme antibakteriaalse aine suhtes.
Kõik need faktid viitavad sellele, et edukaks antibiootikumraviks on vaja enne nende väljakirjutamist määrata patogeensete mikroobide antibiootikumiresistentsus ning püüda ületada ka mikroobide ravimiresistentsust.
Peamised viisid mikroobide resistentsuse ületamiseks antibiootikumide suhtes, mis vähendab ravi efektiivsust, on järgmised:
uute antibiootikumide uurimine ja juurutamine, samuti tuntud antibiootikumide derivaatide tootmine;
mitte ühe, vaid samaaegselt mitme erineva toimemehhanismiga antibiootikumi kasutamine; nendel juhtudel pärsitakse samaaegselt mikroobiraku erinevaid metaboolseid protsesse, mis põhjustab selle kiiret surma ja raskendab oluliselt mikroorganismide resistentsuse teket; antibiootikumide kombinatsiooni kasutamine teiste keemiaravi ravimitega. Näiteks streptomütsiini kombinatsioon para-aminosalitsüülhappe (PAS) ja ftivasiidiga suurendab järsult tuberkuloosiravi efektiivsust;
antibiootikume hävitavate ensüümide toime pärssimine (näiteks saab penitsillinaasi toimet pärssida kristallvioletiga);
resistentsete bakterite vabastamine mitme ravimiresistentsuse teguritest (R-faktorid), mille puhul saab kasutada teatud värvaineid.
On palju vastuolulisi teooriaid, mis püüavad selgitada ravimiresistentsuse päritolu. Need puudutavad peamiselt küsimusi mutatsioonide ja kohanemise rolli kohta resistentsuse omandamisel. Ilmselt mängivad ravimite, sealhulgas antibiootikumide suhtes resistentsuse kujunemise protsessis teatud rolli nii adaptiivsed kui ka mutatsioonilised muutused.
Tänapäeval, kui antibiootikume kasutatakse laialdaselt, on antibiootikumide suhtes resistentsete mikroorganismide vormid väga levinud.
Taimede eluiga: 6 köites. - M.: Valgustus. Toimetanud A. L. Takhtadzhyan, peatoimetaja, korrespondentliige. NSVL Teaduste Akadeemia, prof. A.A. Fedorov. 1974 .
Vaadake, mis on "Mikroorganismide resistentsus antibiootikumide suhtes" teistes sõnaraamatutes:
antibiootikumiresistentsus- Üks mikroorganismide ravimiresistentsuse vorme, mis on iseloomulik paljudele looduslikele tüvedele, näiteks gastroenteriidi korral, on 86% isoleeritud salmonella tüvedest resistentsed erinevate antibiootikumide suhtes. [Arefjev V.A., ... ... Tehniline tõlkija juhend
- ... Vikipeedia
Antibiootikumiresistentsus antibiootikumide suhtes. Üks mikroorganismide ravimiresistentsuse vorme on iseloomulik paljudele looduslikele tüvedele, näiteks gastroenteriidi korral esineb 86% isoleeritud salmonella tüvedest... ... Molekulaarbioloogia ja geneetika. Sõnastik.
Faagid, nagu mikroorganismid, on võimelised muutma kõiki oma omadusi: negatiivsete kolooniate kuju ja suurust, lüütilise toime spektrit, võimet adsorbeeruda mikroobirakul, vastupidavust välismõjudele, antigeenseid omadusi.... Bioloogiline entsüklopeedia
Antibiootikumiresistentsus on ülekantav (ülekantav)- mikroorganismide resistentsus antibiootikumide suhtes, mis on kodeeritud mikroobiraku kromosoomivälistel geenielementidel, rekombinantse DNA GMM levinuim selektiivne marker... Allikas: TOIDUKONTROLLI KORD JA KORRALDUS... ... Ametlik terminoloogia
Antibiootikumide kasutamine veterinaarmeditsiinis algas kohe pärast nende avastamist. Seda seletatakse mitmete eelistega, mis antibiootikumidel on võrreldes teiste kemoterapeutiliste ainetega: antimikroobne toime on väga... ... Bioloogiline entsüklopeedia
Mikroorganismide toodetud keemilised ained, mis võivad pärssida bakterite ja teiste mikroobide kasvu ja põhjustada nende surma. Antibiootikumide antimikroobne toime on selektiivne: nad mõjuvad mõnele organismile tugevamini kui... ... Collieri entsüklopeedia
Mikroorganismide võime säilitada elutähtsat aktiivsust, sealhulgas paljunemist, hoolimata kokkupuutest keemiaravi ravimitega. Mikroorganismide ravimiresistentsus (resistentsus) erineb nende taluvusest, milles mikroobirakud ei... ... Meditsiiniline entsüklopeedia
Tetratsükliinide keemiline põhistruktuur Tetratsükliinid (ing. tetratsükliinid) on polüketiidide klassi kuuluv rühm antibiootikume, mis on keemilise struktuuri ja bioloogiliste omaduste poolest sarnased ... Wikipedia
Ov; pl. (ühik antibiootikum, a; m.) [kreeka keelest. anti vastu ja bios elu]. Bioloogilise päritoluga ained, mis võivad pärssida patogeensete mikroorganismide aktiivsust. Võtke a. Tugev a. * * * antibiootikumid (anti... ja kreekakeelsetest sõnadest bíos ... ... entsüklopeediline sõnaraamat
Ravimiresistentsuse kujunemise mehhanismid.
~ antibiootikumi ensümaatiline inaktiveerimine
~ muutus antibiootikumi sihtmärgi struktuuris
~ sihtmärgi hüperproduktsioon (agensi ja sihtmärgi suhte muutus)
~ antibiootikumi aktiivne vabanemine mikroobirakust
~ rakuseina läbilaskvuse muutus
~ metaboolse šundi (metaboolse möödaviigu) võimaldamine
MBT ravimiresistentsuse variandid.
Monoresistentsus– resistentsus ühe tuberkuloosivastase ravimi (ATD) suhtes.
Mitme ravimiresistentsus- see on MBT resistentsus kahe või enama tuberkuloosivastase ravimi suhtes ilma samaaegse resistentsuseta isoniasiidi ja rifampitsiini suhtes.
Mitme ravimiresistentsus (MDR)- resistentsus isoniasiidi ja rifampitsiini samaaegse toime suhtes, koos või ilma resistentsuseta teiste tuberkuloosivastaste ravimite suhtes. Nendele Mycobacterium tuberculosis'e tüvedele pööratakse erilist tähelepanu, kuna selliste tüvede poolt põhjustatud patsientide ravi on väga keeruline. See on pikk, kallis ja nõuab varuravimite kasutamist, millest paljud on kallid ja võivad põhjustada tõsiseid kõrvaltoimeid. Lisaks põhjustavad multiresistentsed tüved haiguse raskeid progresseeruvaid vorme, mis sageli põhjustavad ebasoodsaid tagajärgi.
Väga ravimiresistentne (XDR, XDR, äärmine DR)- see on MBT samaaegne resistentsus isoniasiidi, rifampitsiini, süstitavate aminoglükosiidide ja fluorokinoloonide suhtes.
Täielik ravimiresistentsus– resistentsus kõikidele liiklusvastastele ravimitele.
Ristravimiresistentsus– see on olukord, kus resistentsus ühe põletikuvastase ravimi suhtes toob kaasa resistentsuse teiste põletikuvastaste ravimite suhtes. Rist-LN on eriti sageli täheldatud aminoglükosiidide rühmas.
MBT DR määramise meetodid.
Mükobakterite spektri ja resistentsuse määra määramine tuberkuloosivastaste ravimite suhtes on oluline patsientide keemiaravi taktika, ravi efektiivsuse jälgimise, haiguse prognoosi määramise ja mükobakterite ravimiresistentsuse epidemioloogilise seire läbiviimiseks konkreetsel territooriumil, riik ja maailma kogukond. Mükobakterite ravimiresistentsuse aste määratakse kindlaks kehtestatud kriteeriumide alusel, mis sõltuvad nii ravimi tuberkuloosivastasest toimest kui ka selle kontsentratsioonist kahjustuses, maksimaalsest terapeutilisest annusest, ravimi farmakokineetikast ja paljudest muudest teguritest.
Kultuurimeetod võimaldab määrata MBT tundlikkust ja resistentsust tuberkuloosivastaste antibiootikumide suhtes. Kõige tavalisem meetod mükobakterite ravimiresistentsuse määramiseks tuleb läbi viia tahkel Lowenstein-Jenseni toitekeskkonnas.
Kõik ravimiresistentsuse määramise meetodid on jagatud kahte rühma:Praegu kasutatakse rahvusvahelises praktikas järgmisi meetodeid mükobakterite ravimitundlikkuse määramiseks tuberkuloosivastaste ravimite suhtes:
- proportsioonide meetod Lowenstein-Jenseni söötmel või Middlebrook 7N10 söötmel
- absoluutsete kontsentratsioonide meetod Levenstein-Jenseni tihedas munasöötmes
- takistusteguri meetod
- radiomeetriline meetod Bactec 460/960, samuti muud automaatsed ja poolautomaatsed süsteemid
- molekulaargeneetilised meetodid mutatsioonide tuvastamiseks (TB biokiibid, GeneXpert)
Absoluutse kontsentratsiooni meetod enamikul juhtudel kasutatakse ravimiresistentsuse kaudseks määramiseks. Ravimiresistentsuse määramise tulemused kindlaksmääratud meetodil Lowenstein-Jenseni söötmel saadakse tavaliselt mitte varem kui 2–2,5 kuud pärast materjali inokuleerimist. Toitekeskkonna "Novaya" kasutamine võib neid aegu märkimisväärselt lühendada.
Absoluutse kontsentratsiooni meetodi puhul välimus rohkem kui 20 CFU mükobakterite esinemine toitainekeskkonnas, mis sisaldab ravimit kriitilises kontsentratsioonis, näitab, et sellel mükobakteritüvel on ravimiresistentsus.
Kultuur loetakse tundlikuks ravimi antud kontsentratsiooni suhtes, kui ravimit sisaldava söötmega katseklaasis kasvab vähem kui 20 väikest kolooniat, kusjuures kontrollkatsutis kasvab ohtralt.
Kultuur loetakse resistentseks antud katseklaasis sisalduva ravimi kontsentratsiooni suhtes, kui katseklaasis koos söötmega on kasvanud rohkem kui 20 kolooniat (“konfluentne kasv”) ja kontrollrühmas on kasv rikkalikult.
Proportsioonide meetod. Meetod põhineb mükobakterite arvu võrdlemisel isoleeritud kultuurist, mis kasvas ravimi puudumisel ja selle juuresolekul kriitilistel kontsentratsioonidel. Selleks lahjendatakse valmistatud mükobakterite suspensioon kontsentratsioonini 10 -4 ja 10 -6. Mõlemad suspensiooni lahjendused inokuleeritakse ilma ravimita toitesöötmele ja erinevate ravimitega söötmekomplektile. Kui ravimiga söötmel kasvavad kolooniad, mis moodustavad rohkem kui 1% ilma ravimita söötmel kasvatatud arvust, loetakse kultuur selle ravimi suhtes resistentseks. Kui selle ravimi suhtes resistentsete CFUde arv on alla 1%, loetakse kultuur tundlikuks.
Resistentsuse koefitsiendi meetod. See meetod põhineb konkreetse patsiendi teatud tüve jaoks määratud minimaalse inhibeeriva kontsentratsiooni (MIC) ja ravimi suhtes tundliku standardtüve MIC suhte määramisel. N 37 Rv testiti samas katses. Sel juhul tüvi N 37 Rv ei kasutata katse juhtimiseks, vaid võimalike variatsioonide määramiseks testi seadistamisel. Sellest vaatenurgast on see meetod kolmest ülalloetletud meetodist kõige täpsem, kuid suure hulga katseklaaside kasutamise vajaduse tõttu toitainekeskkonnaga on see ka kõige kallim. Viimane asjaolu piirab järsult selle kasutamist.
VASTES süsteem. Selle meetodi jaoks kasutatakse ravimite absoluutset kontsentratsiooni ettevalmistatud vedelas toitainekeskkonnas. Tulemused salvestatakse automaatselt.
Antibiootikumide pikk ajalugu ja laialdane kasutamine, rikkumised õigel kasutamisel, arvestamata tundlikkust, näidustusi, laialdane kasutamine rahvamajanduses - loomakasvatus, taimekasvatus, toiduainetööstus - on tekitanud uue kompleksse probleemi - ravimiresistentsuse. mikroorganismidest. Mikroorganismide resistentsus võib olla kas loomulik või kaasasündinud või omandatud.
Tõsi (loomulikult kaasasündinud esmane) resistentsust iseloomustab antibiootikumi toime puudumine sihtmikroorganismides või sihtmärgi kättesaamatus primaarse madala läbilaskvuse või ensümaatilise inaktiveerimise tõttu. Looduslik resistentsus on mikroorganismidele iseloomulik konstantne liik ja seda on lihtne ennustada. Näiteks on rakuseina puudumine mükoplasmas.
Omandatud vastupanu– üksikute bakteritüvede omadus jääda elujõuliseks nende antibiootikumide kontsentratsioonide juures, mis pärsivad põhiosa mikroobipopulatsioonist, mis on omandatud geenimutatsiooni, rekombinatsiooni vms tulemusena.
Resistentsuse teke on kõigil juhtudel geneetiliselt määratud - uue geneetilise teabe omandamine või oma geenide ekspressioonitaseme muutus.
Sekundaarse resistentsuse peamine mehhanism on resistentsusgeenide (r-geenide) omandamine, mida kannavad transposoonid ja plasmiidid.
Oluline on meeles pidada, et AB-d ei aita kaasa nende plasmiidide moodustumisele, vaid ainult aitavad kaasa evolutsioonile (selektsioonifaktor).
Teada on järgmised biokemikaalid Bakterite antibiootikumiresistentsuse mehhanismid:
1. Tegevuse eesmärgi muutmine (struktuuri muutus)
2. Antibiootikumide inaktiveerimine
3. Antibiootikumide aktiivne eemaldamine mikroobirakkudest
4. Mikroobiraku välisstruktuuride läbilaskvuse rikkumine
5. Metaboolse "šundi" moodustumine
Tegevuse eesmärgi muutmine (struktuuri muutmine).– b-laktaamantibiootikumide sihtmärgid on peptidoglükaani sünteesis osalevad ensüümid. Nende ensüümide struktuuri muutused vastavate geenide mutatsioonide tagajärjel tähendavad, et antibiootikumid ei tunne ära sihtensüüme ega mõjuta neid otseselt.
Antibiootikumide inaktiveerimine- ensümaatiline. b-laktamaase leidub valdavas enamuses kliiniliselt olulistes mikroorganismides. B-laktaamitsükli ühe sideme hüdrolüüsi tulemusena antibiootikum inaktiveeritakse. Peamine resistentsuse mehhanism aminoglükosiidide suhtes on nende ensümaatiline inaktiveerimine modifitseerimise teel. Mikroorganismide R-plasmiidid sisaldavad geene, mis võivad põhjustada näiteks antibiootikumi fosforüülimist, atsetüülimist, mille tulemusena muutub selle struktuur ja reeglina toimub inaktivatsioon. Modifitseeritud aminoglükosiidimolekulid kaotavad oma võime seostuda ribosoomidega ja pärssida valkude biosünteesi.
Kordame veel kord, et bakterite sekundaarne resistentsus penitsilliinide ja tsefalosporiinide suhtes on seotud plasmiidist sõltuva (palju harvem kromosomaalse) beetalaktamaaside tootmisega – ensüümidega, mis hävitavad beetalaktaamantibiootikumide aktiivset keskust. On teada rohkem kui 100 beetalaktamaasi, kuid mitte kõik neist ei ole seotud kliiniliselt olulise bakteriaalse resistentsusega.
On kaks beeta-laktamaasi tüüp - penitsillinaas Ja tsefalosporinaasid, mis on üsna meelevaldne, kuna mõlemad ründavad mõlemat antibiootikumide rühma, kuigi erineva efektiivsusega. Grampositiivsed bakterid (nt stafülokokk) tavaliselt toodavad rakuvälised beetalaktamaasid, mis hävitavad ravimid enne kokkupuudet bakteritega. Need kuuluvad kategooriasse indutseeritavad ensüümid, ja antibiootikumid ise toimivad sageli indutseerijana. Sellistel juhtudel ei suurenda annuse suurendamine antibakteriaalset toimet, kuna see põhjustab inaktiveeriva ensüümi ületootmist..
Gramnegatiivsetes bakterites beeta-laktamaasid on koondunud periplasmasse või seotud sisemembraaniga . Need on sageli konstitutiivsed, need. toodetakse konstantsel tasemel, mis antibiootikumi mõjul ei muutu. Seetõttu aitab annuse suurendamine mõnikord vastupanu üle saada. Meenutame näiteks gonorröa ravi: algul näitas gonokokk bensüülpenitsilliini suhtes hämmastavat tundlikkust, kuid viimase 30 aasta jooksul tuli selle annust pidevalt suurendada.
Kurikuulus näide resistentsuse kiirest arengust looduslike penitsilliinide suhtes on Staphylococcus aureus. Ilma tundlikkuse testimiseta soovitatakse tänapäeval kõiki värskelt isoleeritud Staphylococcus aureus'e tüvesid pidada penitsilliiniresistentseteks, mis tegelikult tunnistab selle tunnuse liigilist järjestust. Kuid teiste bakterite puhul, mida peeti hiljuti beetalaktaamide suhtes absoluutselt tundlikuks, on ilmnenud palju erandeid. Penitsilliiniresistentsed tüved esinevad kõigi grampositiivsete ja gramnegatiivsete bakterite hulgas, kuigi beetalaktamaasi resistentsuse katastroofiliselt kiire arengu näide on ainulaadne stafülokokkidele. See võib olla tingitud asjaolust, et paljudes bakterites tekkis resistentsus kromosomaalsel (“liikumatu”) alusel ja alles hiljem hakkasid domineerima liikuvate r-geenidega tüved. Lisaks erinevad beetalaktaamantibiootikumid oma afiinsuse poolest beetalaktamaaside suhtes. Mõned neist (penitsillinaasiresistentsed penitsilliinid, 3. põlvkonna tsefalosporiinid, imipeneem) hüdrolüüsivad vähesed beetalaktamaasid ja (neid nimetatakse beetalaktamaasresistentseteks), teised (näiteks ampitsilliin) on aga palju tundlikumad. On antibiootikume, mis on resistentsed gramnegatiivsete beetalaktamaaside suhtes, kuid mida hävitavad grampositiivsed bakterid (näiteks temotsilliin).
Beeta-laktamaaside aktiivsuse pärssimiseks Tehakse ettepanek lisada nende inhibiitorid ravimite koostisesse - klavulaanhape ja penitsillaanhappe sulfoonid (sulbaktaam, YTR-830 jne). Need kuuluvad beetalaktaamide perekonda, kuid neil on nõrk antibiootiline toime. Samal ajal reageerivad nad beetalaktaamtsükliga suurepäraselt beetalaktamaasidega ja takistavad neid kinni püüdes "päris" antibiootikumide hävimist. Ensüüm ja inhibiitor võivad astuda ajutisse suhetesse, moodustades hapra kompleksi, kuid sagedamini toimub ensüümi pöördumatu inaktiveerimine. Inhibeeritavate beetalaktamaaside valik on väga lai, sealhulgas levinumad grampositiivsed ja gramnegatiivsed beetalaktamaasid. Võib tunduda kummaline, et kui neil on võimalus saada stabiilseid monomolekulaarseid antibiootikume (vt ülal), valivad nad keerukate segude loomise. Kuid tõsiasi on see, et struktuurimuutused, mille kaudu beetalaktamaasi resistentsus saavutatakse, mõjutavad mõnikord negatiivselt ravimi antibakteriaalseid ja farmakoloogilisi omadusi (näiteks penitsillinaasi suhtes resistentsete penitsilliinide aktiivsus on 10-30 korda madalam kui looduslikul penitsilliinil). Kombinatsioon inhibiitoritega võimaldab teil seda vältida, kasutades "klassikaliste" beeta-laktaamide eeliseid.
Sageli on r-plasmiidide allikaks makroorganismi normaalne mikrofloora.
Antibiootikumide aktiivne eemaldamine rakust– mikroorganismidel on CPM-is transpordisüsteemid, mida kodeerivad erinevad geenid, mis teostavad antibakteriaalsete ravimite aktiivset selektiivset eemaldamist, antibiootikumidel ei ole aega sihtmärki jõuda.
Välisstruktuuride läbilaskvuse rikkumine– mutatsioonide tagajärjel on võimalik välismembraani kaudu transportivate struktuuride täielik või osaline kadu. Näiteks poriini valkude täielik või osaline kadu, mis transpordivad aineid läbi tsütoplasmaatilise membraani.
Metaboolse "šundi" moodustumine- võib olla tingitud uute geenide omandamisest, mille tulemusena bakterid moodustavad antibiootikumide suhtes mittetundlike sihtensüümide biosünteesiks metaboolseid radasid.