Sự kháng thuốc của vi sinh vật. Cơ chế kháng thuốc của mầm bệnh truyền nhiễm

Kháng kháng sinh là tình trạng kháng thuốc của vi khuẩn đối với thuốc kháng sinh. Vi khuẩn được coi là kháng thuốc nếu chúng không bị vô hiệu hóa bởi nồng độ thuốc thực sự được tạo ra trong cơ thể vĩ mô. Sự đề kháng có thể là tự nhiên hoặc có được.

Sự ổn định tự nhiên Một số loại vi khuẩn có khả năng kháng tự nhiên với một số họ kháng sinh nhất định, do thiếu mục tiêu thích hợp (ví dụ: mycoplasmas không có thành tế bào, do đó không nhạy cảm với tất cả các loại thuốc hoạt động ở cấp độ đó), hoặc là kết quả của tính không thấm của vi khuẩn đối với một loại thuốc nhất định (ví dụ, vi khuẩn gram âm ít thấm vào các hợp chất phân tử lớn hơn vi khuẩn gram dương, vì màng ngoài của chúng có các lỗ “nhỏ”).

Có được sự phản kháng. Sự đề kháng là một mô hình sinh học liên quan đến sự thích nghi của vi sinh vật với điều kiện môi trường. Điều này đúng, mặc dù ở những mức độ khác nhau, đối với mọi vi khuẩn và mọi loại kháng sinh. Không chỉ vi khuẩn, mà cả các vi khuẩn khác - từ dạng nhân chuẩn (động vật nguyên sinh, nấm) đến vi rút - đều thích nghi với thuốc hóa trị. Vấn đề hình thành và lây lan tình trạng kháng thuốc ở vi khuẩn đặc biệt quan trọng đối với các bệnh nhiễm trùng bệnh viện do cái gọi là “chủng bệnh viện” gây ra, theo quy luật, có nhiều loại kháng thuốc kháng sinh (gọi là đa kháng).

Cơ sở di truyền của tính kháng mắc phải. Tình trạng kháng kháng sinh được xác định và duy trì bởi các gen kháng thuốc (gen r) và các điều kiện thúc đẩy sự lây lan của chúng trong quần thể vi sinh vật. Tình trạng kháng thuốc mắc phải có thể phát sinh và lây lan trong quần thể vi khuẩn do:

  • * đột biến trong nhiễm sắc thể của tế bào vi khuẩn với sự chọn lọc tiếp theo (tức là chọn lọc) các đột biến. Sự lựa chọn xảy ra đặc biệt dễ dàng khi có sự hiện diện của kháng sinh, vì trong những điều kiện này, các đột biến có được lợi thế hơn các tế bào khác trong quần thể nhạy cảm với thuốc. Đột biến xảy ra bất kể việc sử dụng kháng sinh, tức là bản thân thuốc không ảnh hưởng đến tần suất đột biến và không phải là nguyên nhân của chúng mà đóng vai trò là yếu tố chọn lọc. Các tế bào kháng thuốc sau đó sinh ra con cái và có thể truyền sang cơ thể của vật chủ tiếp theo (con người hoặc động vật), hình thành và lây lan các chủng kháng thuốc. Đột biến có thể là: 1) đơn lẻ (nếu đột biến xảy ra trong một tế bào, do đó các protein bị thay đổi được tổng hợp trong đó) và 2) nhiều (một loạt đột biến, do đó không phải một mà là cả một tập hợp) về những thay đổi của protein, ví dụ, protein gắn với penicillin trong phế cầu khuẩn kháng penicillin);
  • * chuyển giao các plasmid kháng thuốc truyền được (R-plasmids). Các plasmid kháng thuốc (có thể lây truyền) thường mã hóa tính kháng chéo đối với một số họ kháng sinh. Lần đầu tiên, tình trạng đa kháng thuốc như vậy được các nhà nghiên cứu Nhật Bản mô tả liên quan đến vi khuẩn đường ruột. Hiện nay người ta đã chứng minh rằng nó xảy ra ở các nhóm vi khuẩn khác. Một số plasmid có thể được chuyển giữa các vi khuẩn thuộc các loài khác nhau, do đó, cùng một gen kháng thuốc có thể được tìm thấy ở các vi khuẩn có khoảng cách phân loại xa nhau. Ví dụ, beta-lactamase, được mã hóa bởi plasmid TEM-1, phổ biến ở vi khuẩn gram âm và được tìm thấy ở Escherichia coli và các vi khuẩn đường ruột khác, cũng như ở lậu cầu kháng penicillin và Haemophilusenzae kháng ampicillin;
  • * chuyển các transposon mang gen r (hoặc di chuyển các chuỗi di truyền). Transposon có thể di chuyển từ nhiễm sắc thể sang plasmid và ngược lại, cũng như từ plasmid này sang plasmid khác. Bằng cách này, gen kháng thuốc có thể được truyền sang tế bào con hoặc thông qua tái tổ hợp với vi khuẩn nhận khác.

Thực hiện sự ổn định có được. Những thay đổi trong bộ gen của vi khuẩn dẫn đến thay đổi một số đặc tính của tế bào vi khuẩn, do đó tế bào vi khuẩn trở nên kháng thuốc kháng khuẩn. Thông thường, tác dụng kháng khuẩn của thuốc đạt được theo cách này: tác nhân phải liên kết với vi khuẩn và đi qua màng của nó, sau đó nó phải được đưa đến vị trí tác dụng, sau đó thuốc tương tác với các mục tiêu nội bào. Việc thực hiện tình trạng kháng thuốc mắc phải có thể thực hiện được ở mỗi giai đoạn sau:

  • * sửa đổi mục tiêu. Enzim mục tiêu có thể được thay đổi sao cho chức năng của nó không bị suy giảm, nhưng khả năng liên kết với thuốc hóa trị liệu (ái lực) bị giảm mạnh hoặc có thể bật “bỏ qua” quá trình trao đổi chất, tức là một enzyme khác được kích hoạt trong tế bào không bị ảnh hưởng bởi thuốc.
  • * “Không thể tiếp cận” mục tiêu do tính thấm của thành tế bào và màng tế bào giảm hoặc “cơ chế thoát ra”, khi tế bào “đẩy” kháng sinh ra khỏi chính nó.
  • * Vô hiệu hóa thuốc bởi enzym của vi khuẩn. Một số vi khuẩn có khả năng sản xuất các enzyme đặc biệt làm mất hoạt tính của thuốc (ví dụ: beta-lactamase, enzyme biến đổi aminoglycoside, chloramphenicol acetyltransferase). Beta-lactamase là enzyme phá hủy vòng beta-lactam để tạo thành các hợp chất không hoạt động. Các gen mã hóa các enzyme này rất phổ biến ở vi khuẩn và có thể được tìm thấy trên nhiễm sắc thể hoặc trên plasmid.

Để chống lại tác dụng bất hoạt của beta-lactamase, các chất ức chế được sử dụng (ví dụ: axit clavulanic, sulbactam, tazobactam). Những chất này chứa vòng beta-lactam và có khả năng liên kết với beta-lactamase, ngăn chặn tác dụng phá hủy của chúng đối với beta-lactam. Tuy nhiên, hoạt tính kháng khuẩn nội tại của các chất ức chế này thấp. Axit clavulanic ức chế hầu hết các beta-lactamase được biết đến. Nó được kết hợp với penicillin: amoxicillin, ticarcillin, piperacillin.

Hầu như không thể ngăn chặn sự phát triển tình trạng kháng kháng sinh ở vi khuẩn mà cần sử dụng thuốc kháng sinh sao cho không góp phần vào sự phát triển và lây lan của tình trạng kháng thuốc (đặc biệt, sử dụng kháng sinh đúng chỉ định, tránh tình trạng kháng kháng sinh). sử dụng với mục đích dự phòng, thay đổi liệu pháp kháng sinh sau 10 - 15 ngày dùng thuốc, nếu có điều kiện nên sử dụng thuốc phổ hẹp, hạn chế sử dụng kháng sinh trong thú y và không sử dụng làm chất tăng trưởng). Số 45 Phương pháp xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh.

Để xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh (kháng sinh đồ), phương pháp sau thường được sử dụng:

  • *Phương pháp khuếch tán thạch. Vi khuẩn đang nghiên cứu được cấy vào môi trường dinh dưỡng agar, sau đó thêm kháng sinh vào. Thông thường, thuốc được thêm vào các giếng đặc biệt trong môi trường thạch hoặc các đĩa chứa kháng sinh được đặt trên bề mặt của vật liệu cấy (“phương pháp đĩa”). Kết quả được ghi lại mỗi ngày dựa trên sự hiện diện hay vắng mặt của sự phát triển của vi sinh vật xung quanh các lỗ (đĩa). Phương pháp đĩa mang tính chất định tính và cho phép bạn đánh giá xem vi khuẩn có nhạy cảm hay kháng thuốc hay không.
  • * Phương pháp xác định nồng độ ức chế và diệt khuẩn tối thiểu, tức là mức tối thiểu của một loại kháng sinh cho phép ngăn chặn sự phát triển có thể nhìn thấy của vi khuẩn trong môi trường dinh dưỡng hoặc khử trùng hoàn toàn môi trường dinh dưỡng trong ống nghiệm. Đây là những phương pháp định lượng cho phép bạn tính toán liều lượng của thuốc, vì nồng độ kháng sinh trong máu phải cao hơn đáng kể so với nồng độ ức chế tối thiểu đối với tác nhân lây nhiễm. Cần sử dụng đủ liều lượng thuốc để điều trị hiệu quả và ngăn ngừa sự hình thành các vi khuẩn kháng thuốc.

Có các phương pháp tăng tốc sử dụng máy phân tích tự động.

Xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh bằng phương pháp đĩa. Nuôi cấy vi khuẩn đang nghiên cứu được cấy vào môi trường thạch dinh dưỡng hoặc môi trường AGV trong đĩa Petri.

Môi trường AGV: nước luộc cá khô dinh dưỡng, agar-agar, disodium phosphate. Môi trường được chuẩn bị từ bột khô theo hướng dẫn.

Các đĩa giấy chứa liều lượng kháng sinh nhất định khác nhau được đặt trên bề mặt đã được cấy bằng nhíp ở khoảng cách bằng nhau. Cây trồng được ủ ở 37°C cho đến ngày hôm sau. Đường kính vùng ức chế tăng trưởng của nuôi cấy vi khuẩn được nghiên cứu được sử dụng để đánh giá độ nhạy cảm của nó với kháng sinh.

Để có được kết quả đáng tin cậy, cần sử dụng đĩa tiêu chuẩn và môi trường dinh dưỡng để kiểm soát các chủng vi sinh vật tiêu chuẩn có liên quan được sử dụng. Phương pháp đĩa không cung cấp dữ liệu đáng tin cậy khi xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật với kháng sinh polypeptide khuếch tán kém vào môi trường thạch (ví dụ: polymyxin, ristomycin). Nếu những kháng sinh này được sử dụng để điều trị thì nên xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật bằng cách pha loãng theo thứ tự.

Xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh bằng phương pháp pha loãng nối tiếp. Phương pháp này xác định nồng độ tối thiểu của kháng sinh có tác dụng ức chế sự phát triển của vi khuẩn thử nghiệm. Đầu tiên, chuẩn bị dung dịch gốc chứa nồng độ kháng sinh nhất định (µg/ml hoặc IU/ml) trong dung môi hoặc dung dịch đệm đặc biệt. Tất cả các dung dịch pha loãng tiếp theo trong nước dùng (trong thể tích 1 ml) đều được chuẩn bị từ nó, sau đó 0,1 ml huyền phù vi khuẩn thử nghiệm chứa 106-107 tế bào vi khuẩn trong 1 ml được thêm vào mỗi độ pha loãng. Thêm 1 ml nước canh và 0,1 ml huyền phù vi khuẩn (kiểm soát nuôi cấy) vào ống nghiệm cuối cùng. Cây trồng được ủ ở 37°C cho đến ngày hôm sau, sau đó kết quả thí nghiệm được ghi nhận bằng độ đục của môi trường dinh dưỡng, so sánh với đối chứng nuôi cấy. Ống nghiệm cuối cùng có môi trường dinh dưỡng trong suốt cho thấy sự chậm phát triển của vi khuẩn đang nghiên cứu dưới tác động của nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của kháng sinh có trong đó.

Kết quả xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật với kháng sinh được đánh giá bằng bảng làm sẵn đặc biệt, trong đó có các giá trị biên của đường kính vùng ức chế tăng trưởng đối với các chủng kháng thuốc, kháng vừa phải và nhạy cảm, cũng như các giá trị MIC ​kháng sinh đối với các chủng kháng thuốc và nhạy cảm.

Các chủng nhạy cảm bao gồm các chủng vi sinh vật bị ức chế phát triển ở nồng độ thuốc tìm thấy trong huyết thanh của bệnh nhân khi sử dụng kháng sinh ở liều thông thường. Các chủng kháng thuốc vừa phải là những chủng có sự ức chế tăng trưởng đòi hỏi nồng độ được tạo ra trong huyết thanh khi dùng liều tối đa của thuốc. Kháng thuốc là những vi sinh vật mà sự phát triển của chúng không bị thuốc ức chế ở nồng độ được tạo ra trong cơ thể khi sử dụng liều tối đa cho phép.

Xác định kháng sinh trong máu, nước tiểu và các chất dịch khác của cơ thể người. Hai hàng ống nghiệm được đặt trên giá. Một trong số đó chuẩn bị dung dịch pha loãng của kháng sinh tiêu chuẩn, mặt khác chuẩn bị dung dịch pha loãng của chất lỏng thử nghiệm. Sau đó, huyền phù vi khuẩn thử nghiệm được chuẩn bị trong môi trường Hiss có glucose được thêm vào mỗi ống nghiệm. Khi xác định penicillin, tetracycline và erythromycin trong chất lỏng thử nghiệm, chủng S. aureus tiêu chuẩn được sử dụng làm vi khuẩn thử nghiệm và khi xác định streptomycin, E. coli được sử dụng. Sau khi ủ cây trồng ở 37°C trong 18-20 giờ, kết quả thí nghiệm được ghi nhận bằng độ đục của môi trường và sự nhuộm màu của nó với chất chỉ thị do vi khuẩn thử nghiệm phân hủy glucose. Nồng độ của kháng sinh được xác định bằng cách nhân độ pha loãng cao nhất của chất lỏng thử nghiệm, có tác dụng ức chế sự phát triển của vi khuẩn thử nghiệm, với nồng độ tối thiểu của kháng sinh đối chiếu, có tác dụng ức chế sự phát triển của cùng một vi khuẩn thử nghiệm.

Ví dụ: nếu độ pha loãng tối đa của chất lỏng thử nghiệm ức chế sự phát triển của vi khuẩn thử nghiệm là 1:1024 và nồng độ tối thiểu của kháng sinh tham chiếu ức chế sự phát triển của cùng loại vi khuẩn thử nghiệm là 0,313 μg/ml thì sản phẩm 1024 - 0,313 = 320 µg/ml là nồng độ kháng sinh trong 1 ml.

Xác định khả năng sinh beta-lactamase của S.aureus. Trong bình chứa 0,5 ml môi trường nuôi cấy hàng ngày của chủng tụ cầu tiêu chuẩn nhạy cảm với penicillin, thêm 20 ml môi trường thạch dinh dưỡng đã tan chảy và làm nguội đến 45 ° C, trộn và đổ vào đĩa Petri. Sau khi thạch đông đặc, đặt một đĩa chứa penicillin vào giữa đĩa trên bề mặt môi trường. Các loại cây trồng đang nghiên cứu được gieo thành vòng dọc theo bán kính của đĩa. Cây trồng được ủ ở 37°C cho đến ngày hôm sau, sau đó ghi lại kết quả thí nghiệm. Khả năng sản xuất beta-lactamase của vi khuẩn được nghiên cứu được đánh giá bằng sự hiện diện của sự phát triển của chủng tụ cầu tiêu chuẩn xung quanh một hoặc một môi trường nuôi cấy thử nghiệm khác (xung quanh đĩa). Số 46 Nguyên tắc điều trị bằng kháng sinh hợp lý.

Phòng ngừa sự phát triển của các biến chứng chủ yếu bao gồm việc tuân thủ các nguyên tắc điều trị bằng kháng sinh hợp lý (hóa trị liệu kháng khuẩn):

* Nguyên lý vi sinh. Trước khi kê đơn thuốc, cần xác định tác nhân gây nhiễm trùng và xác định độ nhạy cảm của từng cá nhân với thuốc hóa trị liệu kháng khuẩn. Dựa trên kết quả kháng sinh đồ, bệnh nhân được kê đơn thuốc phổ hẹp có hoạt tính rõ rệt nhất chống lại mầm bệnh cụ thể, với liều cao gấp 2-3 lần nồng độ ức chế tối thiểu. Nếu vẫn chưa xác định được tác nhân gây bệnh thì các loại thuốc có phổ rộng hơn thường được kê đơn, có tác dụng chống lại tất cả các vi khuẩn có thể thường gây ra bệnh lý này.

Việc điều chỉnh điều trị được thực hiện có tính đến kết quả kiểm tra vi khuẩn và xác định độ nhạy cảm của từng mầm bệnh cụ thể (thường sau 2-3 ngày). Bạn cần bắt đầu điều trị nhiễm trùng càng sớm càng tốt (thứ nhất, khi bắt đầu bệnh, cơ thể có ít vi khuẩn hơn và thứ hai, thuốc có tác dụng tích cực hơn trong việc phát triển và nhân lên vi khuẩn).

  • * Nguyên tắc dược lý. Các đặc tính của thuốc được tính đến - dược động học và dược lực học, sự phân bố trong cơ thể, tần suất sử dụng, khả năng kết hợp thuốc, v.v. Liều lượng thuốc phải đủ để đảm bảo nồng độ vi khuẩn hoặc diệt khuẩn trong dịch sinh học và mô. Cần phải hiểu thời gian điều trị tối ưu, vì cải thiện lâm sàng không phải là lý do để ngừng thuốc, vì mầm bệnh có thể tồn tại trong cơ thể và bệnh có thể tái phát. Các đường dùng thuốc tối ưu cũng được tính đến, vì nhiều loại kháng sinh được hấp thu kém qua đường tiêu hóa hoặc không xuyên qua hàng rào máu não.
  • * Nguyên tắc lâm sàng. Khi kê đơn một loại thuốc, họ tính đến mức độ an toàn của thuốc đối với từng bệnh nhân, điều này phụ thuộc vào đặc điểm cá nhân của tình trạng bệnh nhân (mức độ nghiêm trọng của nhiễm trùng, tình trạng miễn dịch, giới tính, mang thai, tuổi tác, tình trạng chức năng gan và thận, bệnh đi kèm, v.v.) Trong những trường hợp nặng Trong các bệnh nhiễm trùng đe dọa tính mạng, việc điều trị bằng kháng sinh kịp thời có tầm quan trọng đặc biệt. Những bệnh nhân như vậy được kê đơn kết hợp hai hoặc ba loại thuốc để đảm bảo phổ tác dụng rộng nhất có thể. Khi kê đơn kết hợp nhiều loại thuốc, bạn nên biết mức độ hiệu quả của sự kết hợp này đối với mầm bệnh và mức độ an toàn cho bệnh nhân, tức là không có sự đối kháng của thuốc liên quan đến hoạt tính kháng khuẩn và không có tổng kết về tác dụng độc hại của chúng.
  • * Nguyên tắc dịch tễ học. Việc lựa chọn thuốc, đặc biệt cho bệnh nhân nội trú, cần tính đến tình trạng kháng thuốc của các chủng vi khuẩn lưu hành trong khoa, bệnh viện và thậm chí cả khu vực nhất định. Cần nhớ rằng tình trạng kháng kháng sinh không chỉ có thể mắc phải mà còn bị mất đi, đồng thời độ nhạy cảm tự nhiên của vi sinh vật với thuốc được phục hồi. Chỉ có sự ổn định tự nhiên là không thay đổi.
  • * Nguyên tắc dược phẩm. Cần phải tính đến ngày hết hạn và tuân thủ các quy tắc bảo quản thuốc, vì nếu vi phạm các quy tắc này, kháng sinh không những mất tác dụng mà còn trở nên độc hại do phân hủy. Giá thành của thuốc cũng rất quan trọng.

Sự kháng thuốc của vi sinh vật

khả năng của vi sinh vật duy trì hoạt động quan trọng, bao gồm cả việc tiếp xúc với thuốc hóa trị. () vi sinh vật được phân biệt bởi khả năng chịu đựng của chúng, trong đó tế bào vi sinh vật không chết khi có thuốc hóa trị do lượng enzyme tự phân giải giảm, nhưng cũng không nhân lên. L.u.m. - một hiện tượng phổ biến gây trở ngại cho việc điều trị các bệnh truyền nhiễm. Các vi khuẩn được nghiên cứu nhiều nhất.

Có những hiện tượng kháng thuốc vốn có một cách tự nhiên ở vi sinh vật và phát sinh do đột biến hoặc tiếp nhận các gen ngoại lai. L.s.m tự nhiên nguyên nhân là do tế bào vi sinh vật không có mục tiêu cho thuốc hóa trị hoặc tính không thấm của màng tế bào vi sinh vật đối với chúng. Theo quy luật, đây là đặc điểm của tất cả các đại diện của một loài vi khuẩn nhất định (đôi khi là chi) liên quan đến một nhóm thuốc hóa trị cụ thể. Các ví dụ bao gồm sự đề kháng của mycoplasma với penicillin do thiếu thành tế bào và các enzym tổng hợp nó - mục tiêu của penicillin, cũng như sự đề kháng của Pseudomonas aeruginosa đối với erythromycin do chất này không có khả năng xuyên qua màng của nó để mục tiêu của nó, các ribosome.

Tình trạng kháng thuốc của vi sinh vật do đột biến hoặc do đại diện của các loài ban đầu nhạy cảm với các loại thuốc hóa trị cụ thể thu được đã trở nên phổ biến do nền tảng chọn lọc được tạo ra bởi các loại thuốc được sử dụng rộng rãi để tồn tại các dạng vi khuẩn kháng thuốc đặc biệt. Như vậy, tần suất phát hiện tụ cầu kháng penicillin ở một số vùng đạt 80-90%, kháng streptomycin - 60-70%, shigella kháng ampicillin - 90%, kháng tetracycline và streptomycin - hơn 50%, v.v.

Tùy thuộc vào vị trí trong nhiễm sắc thể hoặc plasmid của các gen quyết định tính kháng, người ta thường phân biệt giữa L.m. có nguồn gốc nhiễm sắc thể và plasmid.

Tuy nhiên, các gen plasmid có thể được bao gồm trong nhiễm sắc thể, các gen nhiễm sắc thể có thể được tìm thấy trong một bản sao. Điều này là do sự hiện diện của transposon - yếu tố di truyền có khả năng chuyển đổi trong tế bào từ bản sao này sang bản sao khác.

Sự kháng thuốc của vi sinh vật thường được cảm ứng, tức là sự biểu hiện của gen kháng thuốc chỉ xảy ra sau khi tế bào tiếp xúc với chất chống vi trùng. Một ví dụ về điều này là sự xuất hiện thường xuyên của sự hình thành enzyme bất hoạt sau khi nuôi cấy vi khuẩn tiếp xúc với kháng sinh beta-lactam.

Sự kháng thuốc của vi sinh vật là do các cơ chế chính sau: bất hoạt enzyme của chất chống vi trùng, làm suy yếu sự xâm nhập của nó vào tế bào mầm bệnh, thay đổi cấu trúc của mục tiêu nội bào đối với chất chống vi trùng, ngăn cản sự tương tác của nó với mục tiêu, hình thành một số lượng lớn các phân tử mục tiêu mà tác nhân kháng khuẩn tác động lên đó.

Đại diện của hydrolase được gọi là enzyme bất hoạt - beta-lactamase, xúc tác vòng beta-lactam trong penicillin, cephalosporin và các beta-lactam khác (monobactams, carbapenems, v.v.), cũng như các este, hoạt động trên một số cấu trúc khác. tới nó. Một nhóm enzyme bất hoạt khác là . Chúng bao gồm chloramphenicol-(chloramphenicol-)-acetyltransferase, aminoglycoside acetyl, phospho- hoặc adenylyltransferase và những chất tác động lên erythromycin.

Beta-lactamase được sản xuất bởi nhiều vi khuẩn gram dương và gram âm. Được mã hóa bởi cả gen nhiễm sắc thể và gen plasmid. Có một số hệ thống phân loại beta-lactamase, dựa trên tính đặc hiệu cơ chất, độ nhạy với chất ức chế, điểm đẳng điện và các chỉ số khác. beta-lactamase đến penicillinase và cephalosporinase phần lớn là có điều kiện. Theo quy luật, beta-lactamase của vi khuẩn gram dương được giải phóng ra môi trường bên ngoài, trong khi vi khuẩn gram âm được chứa trong màng tế bào chất và không gian ngoại chất (dưới màng ngoài). Beta-lactamase có nguồn gốc từ cả nhiễm sắc thể và plasmid có thể hiện diện trong một tế bào.

Transferase xúc tác cho phản ứng thay thế nhóm chức năng của kháng sinh bằng dư lượng axit axetic, photphoric hoặc adenylic. Khi sử dụng kháng sinh aminoglycoside, sự thay thế các nhóm amino (N-acetalation) và nhóm hydroxyl (O-phosphoryl hóa và O-adenylation) đã được mô tả. Một thường ảnh hưởng đến một nhóm chức năng. Quá trình phosphoryl hóa O của chloramphenicol và erythromycin cũng đã được mô tả. Thuốc kháng sinh đã trải qua quá trình sửa đổi sẽ mất tác dụng. Transferase chỉ có thể đóng vai trò bảo vệ khi có mặt (dư lượng axit photphoric hoặc adenylic cho) hoặc coenzym A (dư lượng acetyl của nhà tài trợ), do đó vai trò bảo vệ của chúng bị mất khi chuyển ra môi trường bên ngoài. Trong hầu hết các trường hợp, chúng không được giải phóng khỏi tế bào.

Tính thấm của màng tế bào vi khuẩn đối với thuốc hóa trị suy yếu do giảm số lượng protein porin và các kênh nước mà chúng hình thành ở màng ngoài để thuốc khuếch tán. Cơ chế L.u.m như vậy có thể được thực hiện liên quan đến beta-lactam, amino-glycoside, fluoroquinolones, v.v. Các chất kháng khuẩn có tính kỵ nước rõ rệt (một số penicillin, fluoroquinolones, v.v.) xâm nhập vào tế bào qua các vùng lipid của màng ngoài. Những thay đổi trong cấu trúc lipid có thể ảnh hưởng đến L.m. Ví dụ, một số loại kháng sinh xâm nhập qua màng tế bào chất bằng hệ thống vận chuyển đặc hiệu phụ thuộc vào năng lượng. Trong trường hợp không có hệ thống vận chuyển điện tử cytochrome hoạt động, quá trình vận chuyển aminoglycoside vào tế bào sẽ dừng lại. Điều này giải thích sự giảm mạnh hoạt động của aminoglycoside trong điều kiện yếm khí và sức đề kháng tự nhiên của vi khuẩn kỵ khí đối với chúng. Cơ chế kháng tetracycline có liên quan đến những thay đổi ở màng tế bào. Do các protein TET màng được mã hóa bởi các gen nhiễm sắc thể hoặc plasmid, trong trường hợp này, theo quy luật, sẽ có sự loại bỏ nhanh chóng các phân tử tetracycline đã xâm nhập vào tế bào, không có thời gian phản ứng với mục tiêu của chúng - ribosome.

Sự đề kháng với kháng sinh vancomycin có liên quan đến sự xuất hiện của các protein trong màng tế bào chất che chắn, tức là. khiến nó không thể tiếp cận được là các chuỗi peptide của peptidoglycan, chuỗi này sẽ phản ứng với nó trong quá trình lắp ráp polyme này. Sự thay đổi về hình dạng mục tiêu thường được quan sát thấy khi vi sinh vật kháng lại beta-lactam, fluoroquinolones và các loại thuốc hóa trị khác. sinh tổng hợp peptidoglycan - transpeptadase của thành tế bào vi khuẩn và D 1 D-carboxypeptidase (còn gọi là liên kết với penicillin) sẽ ngừng liên kết với beta-lactam khi hình dạng thay đổi và DNA gyrase (mục tiêu của fluoroquinolones) ngừng phản ứng với các loại thuốc hóa trị này. Sự đề kháng với aminoglycoside có thể là do sự giảm liên kết của chúng với ribosome do sự thay đổi cấu trúc của từng protein ribosome. Sự đề kháng với erythromycin ở mức mục tiêu (ribosome) là do quá trình methyl hóa ribosome đặc hiệu ở tiểu đơn vị ribosome lớn. Điều này dẫn đến việc ngăn ngừa phản ứng của erythromycin với ribosome. Số lượng phân tử mục tiêu trong tế bào tăng lên và kết quả là khả năng kháng thuốc kháng khuẩn được quan sát thấy cùng với khả năng kháng trimethoprim, gây ra bởi sự hình thành tăng axit folic reductase. Việc lựa chọn và lây lan rộng rãi của vi khuẩn kháng kháng sinh được tạo điều kiện thuận lợi bởi việc sử dụng kháng sinh không hợp lý và không hợp lý.

Sức đề kháng của vi sinh vật có thể liên quan đến giai đoạn phát triển của mầm bệnh tại vị trí viêm, khi số lượng của chúng lên tới 10 8. - 10 9 cá nhân trong 1 ml mẫu đồng nhất của vật liệu thử. Trong giai đoạn này, các tế bào vi khuẩn ngừng hoạt động và mầm bệnh trở nên thờ ơ hoặc ít nhạy cảm hơn với tác dụng ức chế của nhiều loại thuốc chống vi trùng. Những khó khăn đã biết trong hóa trị là do vi khuẩn dạng L, có độ nhạy khác với vi khuẩn ban đầu có thành tế bào bình thường. Các mầm bệnh có thể kháng thuốc kháng sinh trong trường hợp chúng liên kết với vi khuẩn làm bất hoạt các loại thuốc này. Hoạt động của kháng sinh cũng bị ảnh hưởng bởi giá trị pH của môi trường, mức độ kỵ khí, sự hiện diện của các chất lạ, trạng thái kháng thuốc không đặc hiệu và các yếu tố miễn dịch cũng như tương tác giữa các thuốc.

Cơ chế kháng thuốc của nấm và động vật nguyên sinh có đặc điểm gắn liền với tổ chức cấu trúc và thành phần hóa học của tế bào chúng. Người ta đã lưu ý rằng khả năng kháng của nấm đối với polyene (nystatin, amphotericin B, v.v.) phản ứng với sterol của màng tế bào chất tăng nhẹ khi lượng sterol trong màng giảm hoặc do sự thay đổi trong cấu trúc phân tử. tổ chức màng, dẫn đến giảm sự tiếp xúc của polyene với sterol.

Khả năng kháng thuốc của virus chưa được nghiên cứu kỹ. Người ta đã chứng minh rằng khi sử dụng nucleoside làm tác nhân chống vi-rút, tình trạng kháng thuốc có thể liên quan đến đột biến gen thymidine kinase hoặc polyme DNA của vi-rút. . Vì vậy, tình trạng kháng idoxuridine có thể xảy ra ở bệnh viêm giác mạc do virus herpes simplex gây ra. Ở các đột biến của virus herpes simplex. kháng vidarabine, gen DNA polymerase bị thay đổi.

Kết luận về độ nhạy hoặc sức đề kháng của vi sinh vật được đưa ra dựa trên việc xác định kích thước vùng ức chế sự phát triển của chúng trên môi trường dinh dưỡng đậm đặc xung quanh các đĩa được tẩm chất kháng khuẩn (phương pháp khuếch tán đĩa). Thuốc kháng khuẩn cũng được sử dụng trong môi trường dinh dưỡng rắn và lỏng (xem Chẩn đoán vi sinh vật); Thuốc kháng vi-rút được xác định bằng phương pháp nuôi cấy vi-rút trong nuôi cấy tế bào. phôi gà hoặc động vật thí nghiệm.

Việc khắc phục L.u.m đạt được bằng nhiều cách khác nhau: bằng cách đưa vào cái gọi là liều nạp thuốc kháng sinh có thể ngăn chặn sự phát triển của các vi sinh vật kháng thuốc tương đối, tiếp tục điều trị bằng cách sử dụng đủ liều lượng thuốc và tuân theo phác đồ được khuyến nghị. Việc thay đổi các loại kháng sinh sử dụng trong phòng khám và kết hợp chúng rất hiệu quả trong cuộc chiến chống lại các vi sinh vật kháng thuốc. Tuy nhiên, ví dụ, khi một loại kháng sinh kìm khuẩn được kết hợp với một loại kháng sinh diệt khuẩn (chloramphenicol với penicillin), có thể xảy ra sự đối kháng giữa các loại thuốc, dẫn đến tác dụng kháng khuẩn bị suy yếu. Để bảo vệ kháng sinh beta-lactam khỏi beta-lactamase của vi khuẩn, người ta sử dụng các chất ức chế các enzyme này - axit clavulanic, sulbactam (axit penicillanic sulfone), v.v. Việc phát hiện ra axit clavulanic, có chứa vòng beta-lactam và ngăn chặn một số beta -lactamase, đã kích thích việc tìm kiếm các chất ức chế enzyme khác nhau ( chất tương tự của cơ chất), giúp mở rộng đáng kể việc sử dụng kháng sinh nhạy cảm với các enzyme làm bất hoạt chúng. Một cuộc tìm kiếm cũng đang được tiến hành đối với các loại kháng sinh tự nhiên mới và biến đổi hóa học của các loại kháng sinh đã được biết đến để thu được các chất chống vi trùng có hiệu quả chống lại vi khuẩn kháng thuốc đã được sử dụng.

Tất nhiên, việc xác định một cách có hệ thống các vi sinh vật kháng thuốc và thông tin kịp thời về các kiểu hình kháng thuốc lưu hành ở những khu vực này giúp hướng dẫn bác sĩ sử dụng loại thuốc phù hợp nhất về phổ tác dụng và sự kết hợp thuốc thuận lợi nhất. có tính đến khả năng không tương thích của chúng (xem phần Không tương thích của thuốc) .

Là chất kích thích tăng trưởng cho nông sản. động vật, thú y, trồng trọt không nên sử dụng kháng sinh sử dụng tại phòng khám gây kháng chéo với kháng sinh y tế.

Thư mục: Briand L.E. Sự đề kháng của vi khuẩn và độ nhạy cảm với hóa trị. từ tiếng Anh, M., 1984; Lancini D. và Parenti F., chuyển giới. từ tiếng Anh, tr. 89. M., 1985; Navashin S.M. và Fomina I.P. Hợp lý, tr. 25, M., 1982; Tác dụng kháng khuẩn của Franklin T. và Snow J., dịch từ tiếng Anh, tr. 197, M., 1984.


1. Bách khoa toàn thư y khoa nhỏ. - M.: Bách khoa toàn thư y học. 1991-96 2. Sơ cứu. - M.: Bách khoa toàn thư vĩ đại của Nga. 1994 3. Từ điển bách khoa thuật ngữ y khoa. - M.: Bách khoa toàn thư Liên Xô. - 1982-1984.

  • - cấu trúc di truyền ngoại bào (bổ sung cho nhiễm sắc thể) của vi khuẩn, có khả năng tự nhân lên và tồn tại trong tế bào chất của tế bào vi khuẩn. Một số plasmid có thể bật ở một tần số nhất định... ... Bách khoa toàn thư y tế

    • Các chất kháng khuẩn là dẫn xuất của 5 nitrofuran trong cấu trúc hóa học của chúng. N. được sử dụng trong thực hành y tế bao gồm furatsilin, furagin, furadonin, furazolidone và furazolin. N. có phổ kháng khuẩn rộng... ... Bách khoa toàn thư y tế

    Xem thêm: Bệnh lao Điều trị bệnh lao, đặc biệt là các dạng ngoài phổi, là một vấn đề phức tạp, đòi hỏi nhiều thời gian và phương pháp tiếp cận tổng hợp. Nội dung 1 Các dạng kháng thuốc của tác nhân gây bệnh lao ... Wikipedia

    Văn phong của bài viết này không mang tính bách khoa hoặc vi phạm các chuẩn mực của tiếng Nga. Bài viết phải được sửa theo quy tắc văn phong của Wikipedia. Bệnh lao ... Wikipedia

    kháng thuốc- kháng thuốc (kháng thuốc) khả năng kháng thuốc của vi sinh vật - [Thuật ngữ tiếng Anh-Nga về các thuật ngữ cơ bản trong vắc xin và tiêm chủng. Tổ chức Y tế Thế giới, 2009] Chủ đề... ... Hướng dẫn dịch thuật kỹ thuật

Tình trạng kháng kháng sinh của vi sinh vật

Với việc phát hiện ra các loại kháng sinh có tác dụng chọn lọc đối với vi khuẩn in vivo (trong cơ thể), có vẻ như kỷ nguyên chiến thắng cuối cùng của con người trước các bệnh truyền nhiễm đã đến. Nhưng ngay sau đó người ta đã phát hiện ra hiện tượng kháng thuốc (kháng thuốc) của từng chủng vi khuẩn gây bệnh trước tác dụng phá hủy của kháng sinh. Khi thời gian và quy mô sử dụng kháng sinh trong thực tế tăng lên thì số lượng chủng vi sinh vật kháng thuốc cũng tăng lên. Nếu ở những năm 40, các bác sĩ lâm sàng phải giải quyết các trường hợp nhiễm trùng riêng lẻ do các dạng vi khuẩn kháng thuốc gây ra thì hiện nay, số lượng tụ cầu khuẩn kháng penicillin, streptomycin, chloramphenicol (chloramphenicol) đã vượt quá 60-70%. Điều gì giải thích hiện tượng kháng kháng sinh?


Sự đề kháng của vi sinh vật đối với tác dụng của kháng sinh là do nhiều lý do. Về cơ bản họ đi xuống như sau. Thứ nhất, trong bất kỳ tập hợp vi sinh vật nào cùng tồn tại trên một khu vực cụ thể của chất nền, đều tìm thấy các biến thể kháng kháng sinh tự nhiên (khoảng một cá thể trên một triệu). Khi một quần thể tiếp xúc với kháng sinh, phần lớn tế bào sẽ chết (nếu kháng sinh có tác dụng diệt khuẩn) hoặc ngừng phát triển (nếu kháng sinh có tác dụng kìm khuẩn). Đồng thời, các tế bào đơn kháng kháng sinh tiếp tục nhân lên mà không bị cản trở. Tình trạng kháng kháng sinh của các tế bào này được di truyền, tạo ra một quần thể kháng kháng sinh mới. Trong trường hợp này, việc lựa chọn (chọn lọc) các biến thể kháng thuốc xảy ra bằng cách sử dụng kháng sinh.


Thứ hai, các vi sinh vật nhạy cảm với kháng sinh có thể trải qua quá trình thích nghi (thích nghi) với tác hại của chất kháng sinh. Trong trường hợp này, một mặt có thể có sự thay thế một số liên kết trong quá trình trao đổi chất của vi sinh vật, quá trình tự nhiên của quá trình này bị phá vỡ bởi kháng sinh, bằng các liên kết khác không bị ảnh hưởng bởi thuốc. Trong trường hợp này, vi sinh vật cũng sẽ không bị kháng sinh ức chế. Mặt khác, vi sinh vật có thể bắt đầu sản xuất mạnh mẽ các chất phá hủy phân tử kháng sinh, từ đó vô hiệu hóa tác dụng của nó. Ví dụ, một số chủng tụ cầu và vi khuẩn mang bào tử sinh ra enzym penicillinase có tác dụng phân hủy penicillin tạo thành sản phẩm không có hoạt tính kháng sinh. Hiện tượng này được gọi là sự bất hoạt enzyme của kháng sinh.


Điều thú vị cần lưu ý là hiện nay penicillinase đã được sử dụng thực tế như một loại thuốc giải độc - một loại thuốc giúp loại bỏ tác hại của penicillin khi nó gây ra các phản ứng dị ứng nghiêm trọng đe dọa tính mạng của bệnh nhân.


Cuối cùng, có những chủng vi sinh vật có chứa cái gọi là yếu tố R, hay yếu tố kháng thuốc (sức đề kháng) trong tế bào của chúng. Sự lây lan của yếu tố R giữa các vi khuẩn gây bệnh ở mức độ lớn nhất làm giảm hiệu quả điều trị bằng nhiều loại kháng sinh so với các loại vi khuẩn kháng thuốc khác, vì nó gây ra tình trạng kháng đồng thời một số chất kháng khuẩn.


Tất cả những thực tế này cho thấy rằng để điều trị thành công bằng kháng sinh, cần phải xác định khả năng kháng thuốc của vi khuẩn gây bệnh trước khi kê đơn, đồng thời cố gắng khắc phục tình trạng kháng thuốc của vi khuẩn.


Các cách chính để khắc phục tình trạng kháng kháng sinh của vi khuẩn làm giảm hiệu quả điều trị như sau:


nghiên cứu và triển khai các loại kháng sinh mới cũng như sản xuất các dẫn xuất của các loại kháng sinh đã biết;


việc sử dụng để điều trị không phải một, mà đồng thời nhiều loại kháng sinh với cơ chế tác dụng khác nhau; trong những trường hợp này, các quá trình trao đổi chất khác nhau của tế bào vi sinh vật bị ức chế đồng thời, dẫn đến cái chết nhanh chóng của nó và làm phức tạp đáng kể sự phát triển sức đề kháng của vi sinh vật; việc sử dụng kết hợp kháng sinh với các loại thuốc hóa trị khác. Ví dụ, sự kết hợp giữa streptomycin với axit para-aminosalicylic (PAS) và ftivazid làm tăng đáng kể hiệu quả điều trị bệnh lao;


ức chế hoạt động của các enzyme tiêu diệt kháng sinh (ví dụ, hoạt động của penicillinase có thể bị ức chế bằng tinh thể tím);


giải phóng vi khuẩn kháng thuốc khỏi các yếu tố kháng đa thuốc (yếu tố R), trong đó có thể sử dụng một số loại thuốc nhuộm nhất định.


Có nhiều lý thuyết trái ngược nhau cố gắng giải thích nguồn gốc của tình trạng kháng thuốc. Họ chủ yếu quan tâm đến các câu hỏi về vai trò của đột biến và sự thích nghi trong việc hình thành tính kháng thuốc. Rõ ràng, trong quá trình phát triển khả năng kháng thuốc, bao gồm cả kháng sinh, cả những thay đổi thích nghi và đột biến đều đóng một vai trò nhất định.


Ngày nay, khi kháng sinh được sử dụng rộng rãi thì các dạng vi sinh vật kháng kháng sinh rất phổ biến.

Đời sống thực vật: gồm 6 tập. - M.: Sự giác ngộ. Biên tập bởi A. L. Takhtadzhyan, tổng biên tập, thành viên tương ứng. Viện Hàn lâm Khoa học Liên Xô, GS. A.A. Fedorov. 1974 .


Xem thêm “Sức đề kháng của vi sinh vật với kháng sinh” trong các từ điển khác:

    kháng kháng sinh- Một trong những dạng kháng thuốc của vi sinh vật, đặc trưng của nhiều chủng tự nhiên, ví dụ với bệnh viêm dạ dày ruột, 86% chủng Salmonella phân lập cho thấy khả năng kháng các loại kháng sinh khác nhau. [Arefyev V.A.,... ... Hướng dẫn dịch thuật kỹ thuật

    - ... Wikipedia

    Kháng kháng sinh Kháng kháng sinh. Một trong những dạng kháng thuốc của vi sinh vật là đặc trưng của nhiều chủng tự nhiên, ví dụ như bệnh viêm dạ dày ruột, 86% chủng Salmonella phân lập biểu hiện... ... Sinh học phân tử và di truyền học. Từ điển giải thích.

    Các phage, giống như vi sinh vật, có thể thay đổi tất cả các đặc tính của chúng: hình dạng và kích thước của khuẩn lạc âm tính, phổ hoạt động ly giải, khả năng hấp phụ trên tế bào vi sinh vật, khả năng chống lại các tác động bên ngoài, đặc tính kháng nguyên... ... Bách khoa toàn thư sinh học

    Kháng kháng sinh có thể lây truyền (transferable)- tính kháng kháng sinh của vi sinh vật, được mã hóa trên yếu tố gen ngoại nhiễm sắc thể của tế bào vi sinh vật, dấu ấn chọn lọc phổ biến nhất của DNA tái tổ hợp GMM... Nguồn: TRÌNH TỰ VÀ TỔ CHỨC KIỂM SOÁT THỰC PHẨM... ... Thuật ngữ chính thức

    Việc sử dụng kháng sinh trong thú y bắt đầu ngay sau khi được phát hiện. Điều này được giải thích bởi một số ưu điểm của kháng sinh so với các chất hóa trị liệu khác: tác dụng kháng khuẩn rất... ... Bách khoa toàn thư sinh học

    Các chất hóa học do vi sinh vật tạo ra có thể ức chế sự phát triển và gây chết vi khuẩn và các vi khuẩn khác. Tác dụng kháng khuẩn của kháng sinh có tính chọn lọc: chúng tác động mạnh lên một số sinh vật hơn là trên... ... Bách khoa toàn thư của Collier

    Khả năng của vi sinh vật duy trì hoạt động quan trọng, bao gồm cả sinh sản, mặc dù tiếp xúc với thuốc hóa trị. Khả năng kháng thuốc (sức đề kháng) của vi sinh vật khác với khả năng chịu đựng của chúng, trong đó tế bào vi sinh vật không... ... Bách khoa toàn thư y tế

    Cấu trúc hóa học cơ bản của tetracyclines Tetracyclines (tiếng Anh là tetracyclines) là một nhóm kháng sinh thuộc nhóm polyketide, có cấu trúc hóa học và tính chất sinh học tương tự nhau ... Wikipedia

    ov; làm ơn. (đơn vị kháng sinh, a; m.) [từ tiếng Hy Lạp. chống chống và bios đời sống]. Các chất có nguồn gốc sinh học có khả năng ức chế hoạt động của vi sinh vật gây bệnh. Lấy một. Mạnh mẽ A. * * * kháng sinh (từ anti... và bíos của Hy Lạp ... ... Từ điển bách khoa

Cơ chế hình thành kháng thuốc.

~ vô hoạt enzym của kháng sinh

~ thay đổi cấu trúc mục tiêu của kháng sinh

~ tăng sản lượng mục tiêu (thay đổi tỷ lệ tác nhân-mục tiêu)

~ hoạt động giải phóng kháng sinh từ tế bào vi sinh vật

~ thay đổi tính thấm của thành tế bào

~ kích hoạt một “shunt trao đổi chất” (chuyển hóa vòng)

Các biến thể kháng thuốc của MBT.

Đơn kháng- đề kháng với một loại thuốc chống lao (ATD).

Kháng đa thuốc– đây là khả năng kháng thuốc của MBT đối với bất kỳ hai loại thuốc chống lao nào trở lên mà không kháng đồng thời với isoniazid và rifampicin.

Kháng đa thuốc (MDR) là đề kháng đồng thời với tác dụng của isoniazid và rifampicin, có hoặc không có đề kháng với các thuốc chống lao khác. Những chủng Mycobacteria bệnh lao này được đặc biệt chú ý vì việc điều trị cho những bệnh nhân mắc bệnh do những chủng như vậy gây ra là rất khó khăn. Quá trình này kéo dài, tốn kém và cần sử dụng các loại thuốc dự phòng, trong đó có nhiều loại đắt tiền và có thể gây ra các phản ứng phụ nghiêm trọng. Ngoài ra, các chủng đa kháng thuốc gây ra các dạng bệnh tiến triển nặng, thường dẫn đến các hậu quả bất lợi.

Kháng thuốc rộng rãi (XDR, XDR, DR cực độ)- đây là khả năng kháng đồng thời của MBT với isoniazid, rifampicin, aminoglycoside tiêm và fluoroquinolones.

Tổng kháng thuốc- đề kháng với tất cả các loại thuốc chống giao thông.

Kháng thuốc chéo– đây là tình trạng đề kháng với một loại thuốc chống viêm kéo theo tình trạng đề kháng với các thuốc chống viêm khác. Cross-LN đặc biệt thường được quan sát thấy trong nhóm aminoglycoside.

Các phương pháp xác định MBT DR.

Việc xác định phổ và mức độ kháng thuốc của vi khuẩn lao đối với thuốc chống lao rất quan trọng đối với chiến thuật hóa trị cho bệnh nhân, theo dõi hiệu quả điều trị, xác định tiên lượng bệnh và tiến hành theo dõi dịch tễ học về tình trạng kháng thuốc của vi khuẩn lao trong một lãnh thổ cụ thể, cộng đồng quốc gia và thế giới. Mức độ kháng thuốc của vi khuẩn mycobacteria được xác định theo các tiêu chí đã được thiết lập, phụ thuộc cả vào hoạt tính chống lao của thuốc và nồng độ của nó trong tổn thương, liều điều trị tối đa, dược động học của thuốc và nhiều yếu tố khác.

Phương pháp nuôi cấy giúp xác định độ nhạy cảm và khả năng kháng thuốc của MBT đối với kháng sinh chống lao. Phương pháp phổ biến nhất để xác định khả năng kháng thuốc của vi khuẩn mycobacteria phải được thực hiện trên môi trường dinh dưỡng Lowenstein-Jensen rắn.

Tất cả các phương pháp xác định tình trạng kháng thuốc được chia thành hai nhóm:

Hiện nay, các phương pháp sau đây được sử dụng trong thực tiễn quốc tế để xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn mycobacteria với thuốc chống lao:

- phương pháp định tỷ lệ trên môi trường Lowenstein-Jensen hoặc môi trường Middlebrook 7N10

- phương pháp nồng độ tuyệt đối trên môi trường trứng dày đặc của Levenstein-Jensen

- phương pháp hệ số điện trở

- phương pháp đo phóng xạ Bactec 460/960, cũng như các hệ thống tự động và bán tự động khác

- phương pháp di truyền phân tử để phát hiện đột biến (TB biochips, GeneXpert)

Phương pháp tập trung tuyệt đối trong hầu hết các trường hợp được sử dụng để xác định gián tiếp tình trạng kháng thuốc. Kết quả xác định tính kháng thuốc bằng phương pháp quy định trên môi trường Lowenstein-Jensen thường thu được không sớm hơn 2 - 2,5 tháng sau khi cấy vật liệu. Việc sử dụng môi trường dinh dưỡng “Novaya” có thể làm giảm đáng kể thời gian này.

Đối với phương pháp tập trung tuyệt đối, sự xuất hiện hơn 20 CFU vi khuẩn mycobacteria trên môi trường dinh dưỡng chứa thuốc ở nồng độ tới hạn, cho thấy chủng vi khuẩn mycobacteria này có kháng thuốc.

Nuôi cấy được coi là nhạy cảm với nồng độ thuốc nhất định nếu có ít hơn 20 khuẩn lạc nhỏ phát triển trong ống nghiệm với môi trường chứa thuốc, với sự phát triển dồi dào trong ống đối chứng.

Một chủng cấy được coi là kháng lại nồng độ của thuốc có trong một ống nghiệm nhất định nếu có hơn 20 khuẩn lạc phát triển trong ống nghiệm với môi trường (“tăng trưởng hợp lưu”) với sự phát triển dồi dào trong đối chứng.

Phương pháp tỷ lệ. Phương pháp này dựa trên việc so sánh số lượng vi khuẩn mycobacteria từ môi trường nuôi cấy phân lập phát triển khi không có thuốc và khi có mặt thuốc ở nồng độ tới hạn. Để làm điều này, hỗn dịch mycobacteria đã chuẩn bị được pha loãng ở nồng độ 10 -4 và 10 -6. Cả hai dung dịch pha loãng huyền phù đều được cấy vào môi trường dinh dưỡng không có thuốc và trên môi trường có các loại thuốc khác nhau. Nếu khuẩn lạc phát triển trên môi trường có thuốc lớn hơn 1% số lượng khuẩn lạc phát triển trên môi trường không có thuốc thì môi trường nuôi cấy được coi là kháng thuốc này. Nếu số lượng CFU kháng thuốc này dưới 1% thì nuôi cấy được coi là nhạy cảm.

Phương pháp hệ số kháng. Phương pháp này dựa trên việc xác định tỷ lệ nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) được xác định cho một chủng nhất định của một bệnh nhân cụ thể so với MIC của chủng tiêu chuẩn nhạy cảm với thuốc. N 37 Rvđược thử nghiệm trong cùng một thí nghiệm. Trong trường hợp này, chủng N 37 Rv không được sử dụng để kiểm soát thử nghiệm mà để xác định các biến thể có thể xảy ra khi thiết lập thử nghiệm. Theo quan điểm này, phương pháp này là chính xác nhất trong ba phương pháp nêu trên, tuy nhiên, do nhu cầu sử dụng số lượng lớn ống nghiệm chứa môi trường dinh dưỡng nên nó cũng đắt nhất. Hoàn cảnh sau hạn chế mạnh mẽ việc sử dụng nó.

Hệ thống VAST Đối với phương pháp này, nồng độ tuyệt đối của thuốc trong môi trường dinh dưỡng lỏng đã chuẩn bị sẵn được sử dụng. Kết quả được ghi lại tự động.

Lịch sử lâu dài và việc sử dụng kháng sinh tràn lan, vi phạm sử dụng đúng cách, không tính đến độ nhạy, chỉ định, sử dụng rộng rãi trong nền kinh tế quốc dân - chăn nuôi, trồng trọt, công nghiệp thực phẩm - đã làm nảy sinh một vấn đề phức tạp mới - kháng thuốc của vi sinh vật. Sự đề kháng của vi sinh vật có thể là tự nhiên, bẩm sinh hoặc mắc phải.

Đúng (sơ cấp bẩm sinh tự nhiên) Tính kháng thuốc được đặc trưng bởi sự vắng mặt của tác dụng kháng sinh ở vi sinh vật mục tiêu hoặc không thể tiếp cận được mục tiêu do tính thấm ban đầu thấp hoặc bất hoạt enzyme. Sức đề kháng tự nhiên là một đặc tính bất biến của loài vi sinh vật và có thể dễ dàng dự đoán được. Một ví dụ là sự vắng mặt của thành tế bào ở mycoplasmas.

Sức đề kháng có được- đặc tính của từng chủng vi khuẩn duy trì khả năng tồn tại ở nồng độ kháng sinh ức chế phần chính của quần thể vi sinh vật thu được do đột biến gen, tái tổ hợp, v.v.

Sự hình thành tính kháng thuốc trong mọi trường hợp được xác định về mặt di truyền - việc thu thập thông tin di truyền mới hoặc thay đổi mức độ biểu hiện của gen của chính mình.

Cơ chế chính của tính kháng thứ cấp là thu nhận các gen kháng (gen r) được mang bởi các transposon và plasmid.

Điều quan trọng cần nhớ là AB không góp phần hình thành các plasmid này mà chỉ giúp tiến hóa (yếu tố chọn lọc)

Các chất sinh hóa sau đây được biết đến Cơ chế đề kháng kháng sinh của vi khuẩn:

1. Sửa đổi mục tiêu hành động (thay đổi cấu trúc)

2. Bất hoạt kháng sinh

3. Chủ động loại bỏ kháng sinh khỏi tế bào vi sinh vật

4. Vi phạm tính thấm của cấu trúc bên ngoài của tế bào vi sinh vật

5. Hình thành “shunt” trao đổi chất

Sửa đổi (thay đổi cấu trúc) của mục tiêu hành động– Mục tiêu của kháng sinh b-lactam là các enzyme tham gia vào quá trình tổng hợp peptidoglycan. Sự thay đổi cấu trúc của các enzyme này do đột biến gen tương ứng có nghĩa là kháng sinh không nhận biết và không tác động trực tiếp lên enzyme mục tiêu.

Bất hoạt kháng sinh- enzym. b-lactamase được tìm thấy trong phần lớn các vi sinh vật có ý nghĩa lâm sàng. Do thủy phân một trong các liên kết của vòng b-lactam, kháng sinh bị bất hoạt. Cơ chế kháng thuốc chính của aminoglycoside là làm bất hoạt enzyme của chúng bằng cách biến đổi. R-plasmid của vi sinh vật chứa các gen có thể gây ra, ví dụ, quá trình phosphoryl hóa, acetyl hóa kháng sinh, do đó cấu trúc của nó thay đổi và theo quy luật, xảy ra hiện tượng bất hoạt. Các phân tử aminoglycoside biến đổi mất khả năng liên kết với ribosome và ức chế sinh tổng hợp protein.



Chúng ta hãy nhắc lại một lần nữa rằng sự đề kháng thứ cấp của vi khuẩn chống lại penicillin và cephalosporin có liên quan đến việc sản xuất beta-lactamase phụ thuộc vào plasmid (ít gặp hơn nhiều) - các enzyme phá hủy trung tâm hoạt động của kháng sinh beta-lactam. Hơn 100 loại beta-lactamase đã được biết đến, nhưng không phải tất cả chúng đều liên quan đến khả năng kháng vi khuẩn có ý nghĩa lâm sàng.

Có hai loại beta-lactamase - penicillinase Và cephalosporinase, điều này khá tùy tiện, vì cả hai đều tấn công cả hai nhóm kháng sinh, mặc dù có hiệu quả khác nhau. Vi khuẩn gram dương (ví dụ, tụ cầu) thường sản xuất beta-lactamase ngoại bào phá hủy thuốc trước khi tiếp xúc với vi khuẩn. Họ thuộc loại enzyme cảm ứng và bản thân kháng sinh thường đóng vai trò là chất cảm ứng. Trong những trường hợp như vậy, việc tăng liều lượng không làm tăng tác dụng kháng khuẩn vì nó dẫn đến sản xuất quá mức enzyme bất hoạt..

Ở vi khuẩn gram âm beta-lactamase tập trung ở ngoại chất hoặc liên kết với màng trong . Chúng thường mang tính cấu thành, những thứ kia. được sản xuất ở mức không đổi, không thay đổi dưới tác động của kháng sinh. Vì vậy, việc tăng liều đôi khi giúp khắc phục tình trạng kháng thuốc. Ví dụ, chúng ta có thể nhớ lại cách điều trị bệnh lậu: lúc đầu, lậu cầu tỏ ra nhạy cảm đáng kinh ngạc với benzylpenicillin, nhưng trong 30 năm qua, liều lượng của nó đã phải liên tục tăng lên.

Một ví dụ nổi tiếng về sự phát triển nhanh chóng của khả năng kháng penicillin tự nhiên là Staphylococcus Aureus. Nếu không kiểm tra độ nhạy, bất kỳ chủng Staphylococcus vàng mới phân lập nào ngày nay đều được khuyến cáo coi là kháng penicillin, điều này thực sự công nhận cấp loài của đặc điểm này. Nhưng đối với những vi khuẩn khác gần đây được coi là nhạy cảm tuyệt đối với beta-lactam, nhiều trường hợp ngoại lệ đã xuất hiện. Các chủng kháng penicillin xảy ra ở tất cả các vi khuẩn gram dương và gram âm, mặc dù ví dụ về sự phát triển nhanh chóng của kháng beta-lactamase là duy nhất đối với tụ cầu khuẩn. Điều này có thể là do thực tế là ở nhiều vi khuẩn, tính kháng xuất hiện trên cơ sở nhiễm sắc thể (“bất động”) và chỉ sau đó các chủng có gen r di động mới bắt đầu chiếm ưu thế. Ngoài ra, các kháng sinh beta-lactam khác nhau về ái lực với beta-lactamase. Một số trong số chúng (penicillin kháng penicillinase, cephalosporin thế hệ thứ 3, imipenem) bị thủy phân bởi một số beta-lactamase và (chúng được gọi là kháng beta-lactamase), trong khi những loại khác (ví dụ ampicillin) nhạy cảm hơn nhiều. Có những loại kháng sinh có khả năng kháng beta-lactamase gram âm nhưng bị vi khuẩn gram dương tiêu diệt (ví dụ temocillin).

Để ức chế hoạt động của beta-lactamase Người ta đề xuất đưa chất ức chế của chúng vào thành phần thuốc - axit clavulanic và các sulfones axit penicillanic (sulbactam, YTR-830, v.v.). Chúng thuộc họ beta-lactam nhưng có hoạt tính kháng sinh yếu. Đồng thời, có vòng beta-lactam, chúng phản ứng xuất sắc với beta-lactamase và bằng cách ngăn chặn chúng, ngăn chặn sự phá hủy của kháng sinh “thật”. Enzym và chất ức chế có thể tham gia vào mối quan hệ tạm thời để tạo thành một phức hợp dễ vỡ, nhưng thường xảy ra tình trạng bất hoạt enzyme không thể đảo ngược. Phạm vi beta-lactamase có thể bị ức chế rất rộng, bao gồm cả beta-lactamase gram dương và gram âm phổ biến nhất. Có vẻ lạ khi có cơ hội thu được kháng sinh đơn phân tử ổn định (xem ở trên), họ lại đi theo con đường tạo ra các hỗn hợp phức tạp. Nhưng thực tế là những thay đổi về cấu trúc để đạt được tình trạng kháng beta-lactamase đôi khi ảnh hưởng tiêu cực đến đặc tính kháng khuẩn và dược lý của thuốc (ví dụ, hoạt tính của penicillin kháng penicillinase thấp hơn 10-30 lần so với penicillin tự nhiên). Sự kết hợp với các chất ức chế cho phép bạn tránh được điều này bằng cách sử dụng các ưu điểm của beta-lactam “cổ điển”.

Thông thường nguồn r-plasmid là hệ vi sinh vật bình thường của sinh vật vĩ mô.

Chủ động loại bỏ kháng sinh ra khỏi tế bào– vi sinh vật có hệ thống vận chuyển trong CPM, được mã hóa bởi nhiều gen khác nhau, thực hiện hoạt động loại bỏ có chọn lọc các thuốc kháng sinh không có thời gian để đạt được mục tiêu;

Vi phạm tính thấm của cấu trúc bên ngoài– do đột biến, có thể mất hoàn toàn hoặc một phần các cấu trúc thực hiện quá trình vận chuyển qua màng ngoài. Ví dụ, mất hoàn toàn hoặc một phần protein porin, protein vận chuyển các chất qua màng tế bào chất.

Hình thành “shunt” trao đổi chất- có thể là kết quả của việc tiếp nhận các gen mới, do đó vi khuẩn hình thành các con đường trao đổi chất “bỏ qua” để sinh tổng hợp các enzyme mục tiêu không nhạy cảm với kháng sinh.