Vi khuẩn thuộc nhóm Escherichia coli (vi khuẩn coliform). Vi khuẩn Coliform được tìm thấy trong nước uống

Coliforms là ai và chúng sống ở đâu?

GOST cho vi khuẩn coliform

Một tiêu chuẩn liên bang đã được phát triển cho các phương pháp xác định và xác định số lượng vi khuẩn coliform. GOST này đảm bảo an toàn thực phẩm. Bất kỳ sản phẩm nào có trong danh sách GOST đều phải trải qua thử nghiệm trong phòng thí nghiệm. Sau khi các thử nghiệm trong phòng thí nghiệm chứng minh giá trị coliform chấp nhận được, sản phẩm sẽ được gửi đi bán. Sau đây là đối tượng nghiên cứu bắt buộc:

Nước.
Thực phẩm đóng hộp.
Sản phẩm thịt.
Thức ăn chăn nuôi.
Đồ dùng và thiết bị.

Điều quan trọng cần biết là GOST không áp dụng cho sữa và các sản phẩm từ sữa. Tất cả sữa và các sản phẩm từ sữa khác mua với số lượng lớn hoặc số lượng lớn đều phải được thanh trùng để tiêu diệt vi sinh vật coliform. Thanh trùng – đun nóng đến +80⁰С trong 30 phút.

GOST bắt buộc phải theo dõi tình trạng vệ sinh và vi khuẩn của nước. Nước được lấy để xác định sự hiện diện của coliform từ:

Hệ thống cấp nước thành phố.
Các hồ chứa nước lộ thiên (sông, biển, hồ chứa).
Nguồn nước uống (giếng, suối).
Bể bơi.
Nước thải (trước và sau xử lý).

Rửa tay!

Tất cả các loại vi khuẩn coliform đều bị tiêu diệt bằng cách đun sôi hoặc thanh trùng. Sẽ không còn độc tố Escherichia và Salmonella trong sữa, thịt và nước ở nhiệt độ trên + 60⁰C. Tay nắm cửa hoặc mặt bàn phải được lau bằng dung dịch khử trùng. Vi khuẩn Coliform bị tiêu diệt ngay lập tức bởi rượu hoặc chất kháng khuẩn khác. Nhưng cách đáng tin cậy nhất để ngăn ngừa các bệnh về đường ruột, theo GOST và kinh nghiệm sống, là rửa tay bằng xà phòng. Môi trường kiềm của xà phòng phá hủy các bức tường của vi khuẩn. Nếu không thể rửa tay, chẳng hạn như trên đường, hãy sử dụng khăn ướt khử trùng hoặc gel rửa tay.

Mục lục của đề tài “Nghiên cứu vệ sinh và vi sinh vật trong đất. Hệ vi sinh vật vùng nước.”:

Giữa nhóm vi sinh vật chỉ định vệ sinh không có ranh giới được xác định rõ ràng. Một số vi sinh vật là dấu hiệu của cả ô nhiễm qua đường phân và đường miệng. Một số là dấu hiệu của quá trình tự thanh lọc. Về vấn đề này, tất cả các địa điểm tự nhiên thiêng liêng đều được coi là dấu hiệu ô nhiễm sinh học.

Nhóm A vi sinh vật chỉ định vệ sinh. Bao gồm cư dân sống trong ruột người và động vật. Vi sinh vật được coi là chỉ số ô nhiễm phân. Nó bao gồm coliforms - Escherichia, Enterococcus, Proteus, Salmonella. Cũng bao gồm trong nhóm A là clostridia khử sulfite (Clostridium petfringens, v.v.), sinh vật ưa nhiệt, vi khuẩn, vi khuẩn, Pseudomonas aeruginosa, candida, Akinetobacter và aeromonas.

Nhóm B vi sinh vật chỉ định vệ sinh. Bao gồm cư dân của đường hô hấp trên và vòm họng. Vi sinh vật được coi là chỉ số ô nhiễm miệng. Nó bao gồm viridans, a- và (3-streptococci, staphylococci (đông máu huyết tương, lycytinase dương tính, tan máu và kháng kháng sinh; trong một số trường hợp, loại Staphylococcus vàng cũng được xác định).

Nhóm C vi sinh vật chỉ định vệ sinh. Bao gồm các vi sinh vật hoại sinh sống ở môi trường bên ngoài. Vi sinh vật được coi là chỉ số của quá trình tự làm sạch. Nó bao gồm vi khuẩn phân giải protein, vi khuẩn ammon hóa và vi khuẩn nitrat hóa, một số vi khuẩn hình thành bào tử, nấm, xạ khuẩn, vi khuẩn cellulo, bdellovibrios và tảo xanh lam.

Các nhóm vi sinh vật chỉ định vệ sinh chính

Để các vi sinh vật chỉ thị vệ sinh chính bao gồm vi khuẩn coliform, enterococci, Proteus, salmonella, Clostridium perfringens, vi khuẩn ưa nhiệt và vi khuẩn enterobacteria (coliphages).

vi khuẩn Coli

Escherichia coliđặt nền móng cho toàn bộ tập đoàn SPM. Coliforms bao gồm nhiều thành viên khác nhau của họ Enterobacteriaceae. Tùy thuộc vào mục đích và đối tượng của nghiên cứu, các yêu cầu khác nhau được áp dụng đối với coliform chỉ thị vệ sinh. Chúng thường được chia thành ba nhóm nhỏ và trong nhiều trường hợp khác nhau, sự hiện diện của chúng được sử dụng để xác định đặc tính vi khuẩn của vật thể hoặc chất nền.

Phân nhóm I Escherichia coli bao gồm các coliform được cố gắng xác định nhưng không nên xuất hiện khi kiểm tra các vật thể và chất nền “tinh khiết” về bản chất hoặc đã trở nên tinh khiết do quá trình xử lý của chúng (ví dụ: nhiệt). Nhóm đối tượng có các thuộc tính như vậy bao gồm những đối tượng sau. Nước uống (artesian, vòi clo, giếng) và nước cất (lấy từ máy chưng cất hoặc đường ống). Các sản phẩm thực phẩm chế biến nhiệt (cốt lết, xúc xích, cá, v.v.). Các mẫu lấy từ độ dày của sản phẩm được phân tích.

Sữa(lấy từ máy thanh trùng trước khi vào đường dẫn sữa), súp, nước sốt, nước trái cây, món chính (lấy từ nồi hơi). Rửa trong quá trình theo dõi hiệu quả của việc xử lý khử trùng trong khung thời gian quy định (không sớm hơn 45 phút và không muộn hơn 1 giờ sau khi xử lý).

Vi khuẩn thuộc phân nhóm Escherichia coli này lên men đường lactose và glucose hoặc chỉ glucose thành khí ở 37°C và không thể hiện hoạt tính oxydase. Phân nhóm này bao gồm Escherichia ha //, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter và các đại diện khác của họ Enterobacteriaceae. Sự hiện diện của chúng được phép có trong các đồ vật không được phân loại là “sạch”.

Phân nhóm II Escherichia coli bao gồm coliforms, cho thấy sự ô nhiễm phân không xác định. Vi sinh vật lên men đường lactose và glucose thành axit và khí ở nhiệt độ 43-44,5°C. Phân nhóm này bao gồm các vi khuẩn (E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, v.v.), chúng duy trì khả năng tạo thành khí ở nhiệt độ cao. Các yêu cầu tương tự cũng được áp dụng đối với coliform nếu không thể bảo vệ chất nền khỏi bị nhiễm bẩn. Trong trường hợp này, chúng ta nên hạn chế chỉ xác định các dấu hiệu của tình trạng khó khăn về dịch tễ học. Các đối tượng này bao gồm: nước từ các hồ chứa mở, nước thải, đất và tất cả các sản phẩm thực phẩm có nguy cơ ô nhiễm cao sau khi xử lý nhiệt. Trong những trường hợp như vậy, các sản phẩm thực phẩm rắn (lớp bề mặt), các sản phẩm thực phẩm lỏng, món thứ hai và thứ ba được phục vụ, cũng như chất rửa trôi khỏi thiết bị và dụng cụ đều được kiểm tra. Cây trồng được trồng ở nhiệt độ 43-44,5°C. E. coli khác biệt với các vi khuẩn khác ở khả năng lên men đường lactose và glucose hoặc chỉ glucose.

Phân nhóm III Escherichia coli bao gồm coliforms, cho thấy ô nhiễm phân tươi. Một đặc điểm khác biệt của vi khuẩn thuộc nhóm này là khả năng phân hủy đường lactose thành khí ở nhiệt độ 43-44,5 °C.

Một chủ đề dành riêng cho những người mà chúng tôi khử trùng nước (xem bài viết “Bệnh Legionnaires (bệnh Legionellosis)”). Nhưng còn có nhiều vi khuẩn sống trong nước hơn và bạn cần phải tự bảo vệ mình bằng cách sử dụng, chẳng hạn như siêu lọc. Vì vậy, chủ đề của chúng ta hôm nay là vi khuẩn trong nước của chúng ta. Nơi chúng tôi sẽ cho bạn biết một chút về những loại vi khuẩn không nên sống trong nước của chúng ta.

Vi khuẩn trong nước của chúng ta là một hiện tượng không mong muốn vì một số lý do mà chúng ta sẽ thảo luận dưới đây. Vi khuẩn nói chung được xác định bằng cách phân tích vi sinh vật trong nước và được biểu thị dưới dạng tổng số vi sinh vật bằng đơn vị đo " đơn vị hình thành thuộc địa", ko.e. (hoặc k.u.o trong tiếng Ukraina, các đơn vị hình thành thuộc địa - CFU trong tiếng Anh).

Tổng số lượng vi sinh vật phản ánh mức độ tổng thể của vi khuẩn trong nước chứ không chỉ những vi khuẩn hình thành các khuẩn lạc có thể nhìn thấy bằng mắt thường trên môi trường dinh dưỡng trong các điều kiện canh tác nhất định.

Toàn bộ vi khuẩn, được biểu thị bằng tổng số vi sinh vật, bao gồm một số nhóm và phân nhóm vi khuẩn. Cái này:

Vi khuẩn Coliform (bao gồm cả vi khuẩn chịu nhiệt).
Clostridia khử sulfite.

Một vài lời về clostridium. Clostridia là một loại tiêu chuẩn. Chúng rất ngoan cường, hoặc nếu nói một cách khoa học, có khả năng chống khử trùng, điều này khiến chúng trở thành một loại chỉ báo - không có clustridia và không có vi sinh vật nào khác, thậm chí còn nguy hiểm hơn.

Và cuối cùng, chúng ta hãy chú ý đến chỉ số phổ biến nhất - vi khuẩn coliform là một trong những trở ngại trong phân tích vi sinh của nước.

Nhân tiện, điều đáng ngại là người ta thường tin rằng đây là những vi khuẩn gây bệnh, và nếu bạn uống một ngụm nước như vậy, bệnh lỵ hoặc bệnh tả sẽ bắt đầu gần như ngay lập tức. Nhưng điều này không hoàn toàn đúng với vi khuẩn coliform. Theo định nghĩa từ điển,

Vi khuẩn Coliform là vi khuẩn thuộc nhóm Escherichia coli (coliforms, còn được gọi là vi khuẩn coliform và coliform) - một nhóm vi khuẩn thuộc họ enterobacteria, được phân biệt có điều kiện bởi các đặc điểm hình thái và văn hóa, được sử dụng bởi vi sinh vật vệ sinh làm dấu hiệu ô nhiễm phân

Trong ngôn ngữ thông thường, điều này có nghĩa là tất cả các vi khuẩn có phần giống với vi khuẩn “Escherichia coli” (Escherichia coli, được đặt theo tên của Theodor Escherich; viết tắt là E.coli) được kết hợp thành một nhóm gọi là “vi khuẩn coliform”, tức là vi khuẩn , tương tự như "E.coli". Ngoài ra, sinh vật coliform là vi sinh vật chỉ thị thuận tiện cho chất lượng nước uống và đã được sử dụng như vậy trong nhiều năm. Điều này trước hết là do chúng dễ phát hiện và định lượng.

Thuật ngữ "sinh vật Coliform" (hay "vi khuẩn coliform") dùng để chỉ một nhóm vi khuẩn gram âm, hình que, chủ yếu sống và sinh sản ở đường tiêu hóa dưới của con người và hầu hết các động vật máu nóng (như gia súc và chim nước). ). Do đó, chúng thường xuống nước cùng với chất thải từ phân và có thể tồn tại trong đó trong vài tuần, mặc dù chúng (đại đa số) bị mất khả năng sinh sản.

Theo đó, nếu những vi khuẩn này được tìm thấy trong nước uống, điều này có nghĩa là có khả năng nước bị ô nhiễm bởi nước thải.
Và thứ hai, nếu trong số vi khuẩn coliform có những chủng vi khuẩn có độc lực (giống gây bệnh) thì bệnh cũng có thể xảy ra.

Ngoài ra, trong số các vi khuẩn coliform, một nhóm khác thường được xác định - vi khuẩn coliform chịu nhiệt. Đây là những vi khuẩn tương tự như “Escherichia coli”, có khả năng tiêu hóa thức ăn ở nhiệt độ cao hơn (44 - 45 o C) và bao gồm cả chi Escherichia (hay còn gọi là E. Coli) và một số loại khác.

Vi khuẩn coliform chịu nhiệt được phân loại thành một nhóm nhỏ riêng biệt trong phân tích vi sinh vì chúng cho thấy sự ô nhiễm phân gần đây. Ngoài ra, chúng tương đối dễ xác định—vậy tại sao không đưa chúng vào phân tích của bạn?

Tuy nhiên, bất kỳ mức độ vi khuẩn nào trong nước tăng lên đều là một dấu hiệu đáng báo động và khi nó xuất hiện, bạn cần phải làm gì đó với nước (ví dụ: bắt đầu sử dụng).

Vì vậy, chúng ta đã có cái nhìn tổng quan về mặt lý thuyết chung về vi khuẩn trong nước và chúng ta có thể chuyển sang thực hành.

Đôi khi xảy ra tình huống sau: ai đó muốn tiến hành phân tích vi sinh trong nước. Anh ta lấy mẫu nước, mang đến trạm vệ sinh dịch tễ, và ở đó... Hàng nghìn hàng nghìn vi khuẩn. Vấn đề là điều này không có nghĩa là những vi khuẩn này có trong nguồn nước. Trên thực tế, có ba lựa chọn về sự xuất hiện của chúng trong mẫu nước:

vi khuẩn thực sự có mặt trong nước;
được đưa vào trong quá trình lắp đặt thiết bị và đường ống;
có việc lấy mẫu vi sinh không đúng cách.

Để loại trừ nguyên nhân thứ ba dẫn đến lượng vi khuẩn dư thừa trong nước, bạn cần lấy mẫu nước một cách chính xác. Theo đó, chúng tôi mang đến cho bạn sự chú ý quan trọng Quy tắc lấy mẫu thích hợp nước để phân tích vi sinh. Có, bạn cần:

Chỉ sử dụng các chai đã được khử trùng trước đó trong nồi hấp.
Rửa tay bằng xà phòng trước khi lấy mẫu.
Vòi của vòi lấy mẫu phải được lau bằng cồn hoặc đốt bằng ngọn lửa từ bật lửa hoặc diêm.
Mang chai chứa đầy nước đến phòng thí nghiệm càng nhanh càng tốt (ví dụ: trong vòng hai giờ).

Do đó, chúng ta có thể kết luận: vi khuẩn không nên có trong nước, không chỉ vì chúng có thể dẫn đến bệnh tật mà còn vì chúng là dấu hiệu cho thấy nước bị ô nhiễm bởi các sản phẩm phụ (ví dụ, quá nhiều chất hữu cơ, nước phân, v.v. .). Nói cách khác, những dữ liệu này ít có giá trị trong việc phát hiện ô nhiễm phân và không được coi là một chỉ số quan trọng trong việc đánh giá sự an toàn của nguồn cung cấp nước uống, mặc dù số lượng khuẩn lạc tăng đột ngột trong phân tích nước từ nước ngầm. nguồn có thể là dấu hiệu sớm của sự ô nhiễm tầng nước ngầm.

Theo đó, vi khuẩn trong nước của chúng ta không phải là thứ lẽ ra phải có :)

1. Rà soát nguồn tài liệu

.1 Phân loại Escherichia coli

Phân loại khoa học

Lĩnh vực: Vi khuẩn

Kiểu: Vi khuẩn Proteobacter

Lớp: Gammaproteobacteria

Bộ: Enterobacteria

Họ: Enterobacteriaceae

Chi: Escherichia

Loài: Coli (Escherichia coli)

Tên khoa học quốc tế

Escherichia coli (Migula 1895)

1.2 Cấu trúc và thành phần hóa học của tế bào vi khuẩn

Tổ chức bên trong của tế bào vi khuẩn rất phức tạp. Mỗi nhóm vi sinh vật có hệ thống đều có những đặc điểm cấu trúc riêng.

Tế bào vi khuẩn được bao phủ bởi một lớp màng dày đặc. Lớp bề mặt này, nằm bên ngoài màng tế bào chất, được gọi là thành tế bào. Tường thực hiện các chức năng bảo vệ và hỗ trợ, đồng thời mang lại cho tế bào một hình dạng đặc trưng, cố định (ví dụ: hình que hoặc cầu) và đại diện cho bộ xương bên ngoài của tế bào. Lớp vỏ dày đặc này làm cho vi khuẩn tương tự như tế bào thực vật, giúp phân biệt chúng với tế bào động vật có vỏ mềm. Bên trong tế bào vi khuẩn, áp suất thẩm thấu cao gấp mấy lần, có khi gấp hàng chục lần so với môi trường bên ngoài. Do đó, tế bào sẽ nhanh chóng bị vỡ nếu không được bảo vệ bởi cấu trúc dày đặc, cứng nhắc như thành tế bào.

Độ dày của thành tế bào là 0,01-0,04 micron. Nó chiếm từ 10 đến 50% khối lượng vi khuẩn khô. Lượng vật chất tạo nên thành tế bào thay đổi trong quá trình phát triển của vi khuẩn và thường tăng theo độ tuổi.

Thành phần cấu trúc chính của vách tế bào, nền tảng của cấu trúc cứng nhắc của chúng ở hầu hết các vi khuẩn được nghiên cứu cho đến nay, là murein (glycopeptide, mucopeptide). Đây là một hợp chất hữu cơ có cấu trúc phức tạp, bao gồm các loại đường mang nitơ - đường amin và 4-5 axit amin. Hơn nữa, các axit amin của thành tế bào có hình dạng khác thường (đồng phân lập thể D), hiếm khi được tìm thấy trong tự nhiên.

Sử dụng phương pháp nhuộm màu được đề xuất lần đầu tiên vào năm 1884 bởi Christian Gram, vi khuẩn có thể được chia thành hai nhóm: gram dương và gram âm. .

Các sinh vật gram dương có thể liên kết một số thuốc nhuộm anilin, chẳng hạn như tím pha lê, và sau khi xử lý bằng iốt và sau đó bằng rượu (hoặc axeton) sẽ giữ lại phức hợp thuốc nhuộm iốt. Vi khuẩn tương tự mà phức hợp này bị phá hủy dưới ảnh hưởng của rượu etylic (các tế bào bị đổi màu) được phân loại là vi khuẩn gram âm.

Thành phần hóa học của thành tế bào của vi khuẩn gram dương và gram âm là khác nhau. Ở vi khuẩn gram dương, thành phần của thành tế bào bao gồm, ngoài mucopeptide, polysacarit (đường phức tạp, phân tử cao), axit teichoic (các hợp chất phức tạp về thành phần và cấu trúc, bao gồm đường, rượu, axit amin và axit photphoric). ). Polysaccharides và axit teichoic được liên kết với khung vách - murein. Chúng ta vẫn chưa biết cấu trúc của các thành phần thành tế bào của vi khuẩn gram dương này hình thành như thế nào. Sử dụng ảnh điện tử chụp các phần mỏng (phân lớp), không phát hiện thấy vi khuẩn gram dương trên tường. Có lẽ tất cả các chất này được kết nối với nhau rất chặt chẽ.

Thành tế bào gram âm chứa một lượng đáng kể lipid (chất béo) liên kết với protein và đường trong các phức hợp phức tạp - lipoprotein và lipopolysacarit. Nói chung có ít murein trong thành tế bào của vi khuẩn gram âm hơn ở vi khuẩn gram dương. Cấu trúc thành của vi khuẩn gram âm cũng phức tạp hơn. Sử dụng kính hiển vi điện tử, người ta thấy rằng thành của những vi khuẩn này có nhiều lớp.

Lớp bên trong bao gồm murein. Bên trên nó là một lớp rộng hơn gồm các phân tử protein được đóng gói lỏng lẻo. Lớp này lần lượt được phủ một lớp lipopolysacarit. Lớp trên cùng bao gồm các lipoprotein.

Thành tế bào có tính thấm: thông qua nó, các chất dinh dưỡng tự do đi vào tế bào và các sản phẩm trao đổi chất thoát ra ngoài môi trường. Các phân tử lớn có trọng lượng phân tử cao không đi qua vỏ.

Thành tế bào của nhiều vi khuẩn được bao quanh bởi một lớp chất nhầy - một viên nang. Độ dày của viên nang có thể lớn hơn nhiều lần so với đường kính của chính tế bào và đôi khi nó mỏng đến mức chỉ có thể nhìn thấy qua kính hiển vi điện tử - microcapsule.

Vỏ không phải là một phần thiết yếu của tế bào; nó được hình thành tùy thuộc vào điều kiện mà vi khuẩn tìm thấy. Nó đóng vai trò như lớp vỏ bảo vệ tế bào và tham gia vào quá trình chuyển hóa nước, bảo vệ tế bào khỏi bị khô.

Thành phần hóa học của viên nang thường là polysaccharides. Đôi khi chúng bao gồm glycoprotein (phức hợp đường và protein) và polypeptide (chi Bacillus), trong một số trường hợp hiếm hoi - chất xơ (chi Acetobacter).

Ví dụ, các chất nhầy được tiết vào chất nền bởi một số vi khuẩn gây ra tình trạng đặc sệt như chất nhầy của sữa và bia hư hỏng.

Toàn bộ nội dung của tế bào, ngoại trừ nhân và thành tế bào, được gọi là tế bào chất. Pha lỏng, không có cấu trúc của tế bào chất (ma trận) chứa ribosome, hệ thống màng, ty thể, lạp thể và các cấu trúc khác, cũng như các chất dinh dưỡng dự trữ. Tế bào chất có cấu trúc cực kỳ phức tạp, mịn (lớp, dạng hạt). Sử dụng kính hiển vi điện tử, nhiều chi tiết thú vị về cấu trúc tế bào đã được tiết lộ.

Lớp lipoprotein bên ngoài của nguyên sinh chất vi khuẩn, có đặc tính vật lý và hóa học đặc biệt, được gọi là màng tế bào chất.

Bên trong tế bào chất là tất cả các cấu trúc và bào quan quan trọng.

Màng tế bào chất đóng một vai trò rất quan trọng - nó điều chỉnh sự xâm nhập của các chất vào tế bào và giải phóng các sản phẩm trao đổi chất ra bên ngoài.

Thông qua màng, các chất dinh dưỡng có thể đi vào tế bào nhờ một quá trình sinh hóa tích cực có sự tham gia của các enzyme. Ngoài ra, sự tổng hợp của một số thành phần tế bào diễn ra ở màng, chủ yếu là thành phần của thành tế bào và vỏ. Cuối cùng, màng tế bào chất chứa các enzym quan trọng nhất (chất xúc tác sinh học). Sự sắp xếp có trật tự của các enzyme trên màng giúp điều chỉnh hoạt động của chúng và ngăn chặn sự phá hủy một số enzyme của những enzyme khác. Liên kết với màng là ribosome - hạt cấu trúc trên đó protein được tổng hợp. Màng bao gồm các lipoprotein. Nó đủ mạnh và có thể đảm bảo sự tồn tại tạm thời của một tế bào không có vỏ. Màng tế bào chất chiếm tới 20% khối lượng khô của tế bào.

Trong các bức ảnh điện tử chụp các phần mỏng của vi khuẩn, màng tế bào chất xuất hiện dưới dạng một sợi liên tục dày khoảng 75A, bao gồm một lớp nhẹ (lipid) kẹp giữa hai lớp tối hơn (protein). Mỗi lớp có chiều rộng 20-30A. Một màng như vậy được gọi là cơ bản.

Giữa màng sinh chất và thành tế bào có sự kết nối dưới dạng desmoses - cầu nối. Màng tế bào chất thường gây ra hiện tượng xâm lấn - xâm lấn vào trong tế bào. Những sự xâm lấn này tạo thành các cấu trúc màng đặc biệt trong tế bào chất gọi là mesosome. Một số loại mesosome là các cơ thể được tách ra khỏi tế bào chất bằng màng riêng của chúng. Vô số túi và ống được đóng gói bên trong các túi màng này. Những cấu trúc này thực hiện nhiều chức năng khác nhau ở vi khuẩn. Một số cấu trúc này tương tự như ty thể. Những người khác thực hiện các chức năng của mạng lưới nội chất hoặc bộ máy Golgi. Bằng cách xâm lấn màng tế bào chất, bộ máy quang hợp của vi khuẩn cũng được hình thành. Sau khi tế bào chất xâm lấn, màng tiếp tục phát triển và hình thành các ngăn xếp, tương tự như các hạt lục lạp thực vật, được gọi là ngăn xếp thylakoid. Trong các màng này, thường lấp đầy hầu hết tế bào chất của tế bào vi khuẩn, các sắc tố (bacteriochlorophyll, carotenoids) và enzyme (cytochromes) thực hiện quá trình quang hợp được định vị.

Tế bào chất của vi khuẩn chứa ribosome - hạt tổng hợp protein có đường kính 200A. Có hơn một ngàn con trong một cái lồng. Ribosome bao gồm RNA và protein. Ở vi khuẩn, nhiều ribosome nằm tự do trong tế bào chất, một số có thể liên kết với màng.

Tế bào chất của tế bào vi khuẩn thường chứa các hạt có hình dạng và kích cỡ khác nhau. Tuy nhiên, sự hiện diện của chúng không thể được coi là một loại dấu hiệu thường trực nào đó của vi sinh vật; nó thường liên quan phần lớn đến các điều kiện vật lý và hóa học của môi trường. Nhiều thể vùi tế bào chất bao gồm các hợp chất đóng vai trò là nguồn năng lượng và carbon. Những chất dự trữ này được hình thành khi cơ thể được cung cấp đủ chất dinh dưỡng và ngược lại, được sử dụng khi cơ thể gặp điều kiện kém thuận lợi về mặt dinh dưỡng.

Ở nhiều vi khuẩn, hạt bao gồm tinh bột hoặc các polysaccharide khác - glycogen và hạt. Một số vi khuẩn khi phát triển trong môi trường giàu đường sẽ có những giọt chất béo bên trong tế bào. Một loại thể vùi dạng hạt phổ biến khác là volutin (hạt metachromatin). Những hạt này bao gồm polymetaphosphate (một chất dự trữ có chứa dư lượng axit photphoric). Polymetaphosphate đóng vai trò là nguồn cung cấp nhóm photphat và năng lượng cho cơ thể. Vi khuẩn có nhiều khả năng tích tụ volutin trong điều kiện dinh dưỡng bất thường, chẳng hạn như môi trường không có lưu huỳnh. Trong tế bào chất của một số vi khuẩn lưu huỳnh có những giọt lưu huỳnh.

Ngoài các thành phần cấu trúc khác nhau, tế bào chất còn bao gồm một phần chất lỏng - phần hòa tan. Nó chứa protein, các enzyme khác nhau, t-RNA, một số sắc tố và các hợp chất trọng lượng phân tử thấp - đường, axit amin.

Do sự hiện diện của các hợp chất trọng lượng phân tử thấp trong tế bào chất, nên có sự khác biệt về áp suất thẩm thấu của nội dung tế bào và môi trường bên ngoài, và áp suất này có thể khác nhau đối với các vi sinh vật khác nhau. Áp suất thẩm thấu cao nhất được quan sát thấy ở vi khuẩn gram dương - 30 atm; ở vi khuẩn gram âm thấp hơn nhiều so với 4-8 atm.

Chất hạt nhân, axit deoxyribonucleic (DNA), được định vị ở phần trung tâm của tế bào.

Vi khuẩn không có nhân như các sinh vật bậc cao (sinh vật nhân chuẩn), nhưng có chất tương tự - "hạt nhân tương đương" - nucleoid , đó là một hình thức tổ chức nguyên thủy hơn về mặt tiến hóa của vật chất hạt nhân. Các vi sinh vật không có nhân thực sự nhưng có nhân tương tự, được phân loại là sinh vật nhân sơ. Tất cả vi khuẩn đều là sinh vật nhân sơ. Trong tế bào của hầu hết vi khuẩn, phần lớn DNA tập trung ở một hoặc một vài nơi. Ở vi khuẩn, DNA được sắp xếp ít chặt chẽ hơn, không giống như nhân thật; Một nucleoid không có màng, nucleolus hoặc bộ nhiễm sắc thể. DNA của vi khuẩn không liên kết với các protein chính - histones - và nằm trong nucleoid dưới dạng một bó sợi nhỏ.

Một số vi khuẩn có cấu trúc phụ trên bề mặt; Phổ biến nhất trong số đó là vi khuẩn Flagella - cơ quan di chuyển của vi khuẩn.

Flagellum được neo dưới màng tế bào chất bằng hai cặp đĩa. Vi khuẩn có thể có một, hai hoặc nhiều roi. Vị trí của chúng khác nhau: ở một đầu của tế bào, ở hai đầu, trên toàn bộ bề mặt. Flagella vi khuẩn có đường kính 0,01-0,03 micron, chiều dài của chúng có thể lớn hơn nhiều lần so với chiều dài của tế bào. Tiên mao vi khuẩn bao gồm một loại protein - Flagellin - và là những sợi xoắn ốc xoắn.

1.3 Hình thái của Escherichia coli và các đại diện của nó

vi khuẩn coli

Escherichia coli là một trực khuẩn gram âm kỵ khí tùy ý đa hình ngắn (dài 1-3 µm, rộng 0,5-0,8 µm) có đầu tròn. Các chủng trong vết bẩn được sắp xếp ngẫu nhiên, không hình thành bào tử và phúc mạc. Một số chủng có vi nang và lông mao, được tìm thấy rộng rãi ở ruột dưới của các sinh vật máu nóng. Hầu hết các chủng E. coli đều vô hại, nhưng loại huyết thanh O157:H7 có thể gây ngộ độc thực phẩm nghiêm trọng ở người.

Vi khuẩn nhóm E. coli phát triển tốt trên môi trường dinh dưỡng đơn giản: nước luộc thịt-peptone (MPB), thạch thịt-peptone (MPA). Trên môi trường Endo chúng hình thành các khuẩn lạc phẳng màu đỏ có kích thước trung bình. Các khuẩn lạc màu đỏ có thể có ánh kim loại sẫm màu (E. coli) hoặc không có ánh kim (E. aerogenes).

Chúng có hoạt tính enzyme cao đối với đường lactose, glucose và các loại đường khác cũng như rượu. Chúng không có hoạt tính oxydase. Dựa trên khả năng phân hủy đường sữa ở nhiệt độ 37°C, vi khuẩn được chia thành Escherichia coli (LKP) âm tính và dương tính với đường sữa, hoặc coliform, được hình thành theo tiêu chuẩn quốc tế. Thuộc nhóm LCP là các coliform phân (FEC), có khả năng lên men lactose ở nhiệt độ 44,5°C. coli không phải lúc nào cũng chỉ sống trong đường tiêu hóa; khả năng tồn tại một thời gian trong môi trường khiến chúng trở nên quan trọng. chỉ thị để kiểm tra mẫu về sự hiện diện của ô nhiễm phân.

Vi khuẩn coliform thông thường (TCB) là trực khuẩn gram âm, không sinh bào tử, có khả năng phát triển trên môi trường vi phân lactose, lên men lactose thành axit, aldehyd và khí ở nhiệt độ 37 +/- 1°C trong 24 - 48 giờ.

Vi khuẩn Coliform (coliforms) là một nhóm vi khuẩn gram âm chủ yếu sống và sinh sản ở đường tiêu hóa dưới của con người và hầu hết các động vật máu nóng (như gia súc và chim nước). Vvoda thường được tìm thấy trong phân và có thể tồn tại trong đó vài tuần, mặc dù (đại đa số) chúng không sinh sản.

Vi khuẩn coliform chịu nhiệt đóng vai trò quan trọng trong việc đánh giá hiệu quả xử lý nước để loại bỏ vi khuẩn trong phân. Một chỉ số chính xác hơn là E. coli (Escherichia coli), vì nguồn gốc của một số coliform chịu nhiệt khác có thể không chỉ là nước từ phân. Đồng thời, tổng nồng độ coliform chịu nhiệt trong hầu hết các trường hợp tỷ lệ thuận với nồng độ của E. coli và sự phát triển thứ cấp của chúng trong mạng lưới phân phối là khó xảy ra (trừ khi có đủ chất dinh dưỡng trong nước, ở nhiệt độ trên 13 ° C.

Vi khuẩn coliform chịu nhiệt (TCB) - nằm trong số các vi khuẩn coliform phổ biến, có đầy đủ các đặc điểm và ngoài ra còn có khả năng lên men đường lactose thành axit, aldehyd và khí ở nhiệt độ 44 +/- 0,5°C trong 24 giờ.

Bao gồm chi Escherichia và ở mức độ thấp hơn là các chủng Citrobacter, Enterobacter và Klebsiella riêng lẻ. Trong số các sinh vật này, chỉ có E. coli đặc biệt có nguồn gốc từ phân và nó luôn hiện diện với số lượng lớn trong phân người và động vật và hiếm khi được tìm thấy trong nước và đất chưa bị ô nhiễm phân. Người ta tin rằng việc phát hiện và xác định vi khuẩn E. coli cung cấp đủ thông tin để xác định bản chất phân của ô nhiễm.

Coliforms được tìm thấy với số lượng lớn trong nước thải sinh hoạt cũng như trong nước thải từ các trang trại chăn nuôi. Trong các nguồn nước dùng để cấp nước uống và sinh hoạt tập trung, số lượng coliform thông thường được phép không quá 1000 đơn vị (CFU/100 ml, CFU - đơn vị hình thành khuẩn lạc) và coliform chịu nhiệt - không quá 100 đơn vị. Trong nước uống, không nên phát hiện coliform trong mẫu 100 ml. Việc đưa sinh vật coliform vào hệ thống phân phối không thường xuyên được chấp nhận ở không quá 5% số mẫu được thu thập trong bất kỳ khoảng thời gian 12 tháng nào, với điều kiện là không có vi khuẩn E. coli.

Sự hiện diện của sinh vật coliform trong nước cho thấy việc xử lý không đầy đủ, ô nhiễm thứ cấp hoặc sự hiện diện của chất dinh dưỡng dư thừa trong nước.

2. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu

Khi kiểm tra nước tương đối sạch về mặt vi sinh để tìm sự hiện diện của vi sinh vật gây bệnh, cần tập trung hệ vi sinh vật mong muốn, được chứa với số lượng nhỏ không đáng kể trong nước. Việc phát hiện mầm bệnh gây nhiễm trùng đường ruột trong nước mở và nước thải dựa trên khối lượng vi sinh vật hoại sinh chiếm ưu thế sẽ hiệu quả nhất khi vi khuẩn mong muốn tập trung trong môi trường tích tụ ức chế sự phát triển của hệ vi sinh vật đi kèm. Do đó, khi phân tích nước có mức độ ô nhiễm vi khuẩn nói chung khác nhau, một số phương pháp nhất định để phân lập hệ vi sinh vật gây bệnh sẽ được sử dụng.

Vùng nước mở thường được đặc trưng bởi hàm lượng đáng kể chất rắn lơ lửng, tức là độ đục, thường có màu sắc, hàm lượng muối thấp, độ cứng tương đối thấp, sự hiện diện của một lượng lớn chất hữu cơ, khả năng oxy hóa tương đối cao và hàm lượng vi khuẩn đáng kể . Sự biến động theo mùa của chất lượng nước sông thường khá rõ nét. Trong thời gian lũ lụt, độ đục và ô nhiễm vi khuẩn của nước tăng lên rất nhiều, nhưng độ cứng (độ kiềm và độ mặn) thường giảm. Sự thay đổi chất lượng nước theo mùa ảnh hưởng đáng kể đến tính chất hoạt động của các cơ sở xử lý nước trong những khoảng thời gian nhất định trong năm.

Số lượng vi khuẩn trong 1 ml nước phụ thuộc vào sự hiện diện của chất dinh dưỡng trong đó. Nước càng bị ô nhiễm cặn hữu cơ thì càng chứa nhiều vi khuẩn. Số lượng vi khuẩn lớn nhất trong chúng nằm ở các lớp bề mặt (trong lớp cách mặt nước 10 cm) của các vùng ven biển. Với khoảng cách từ bờ và độ sâu ngày càng tăng, số lượng vi khuẩn giảm dần.

Bùn sông giàu vi khuẩn hơn nước sông. Có rất nhiều vi khuẩn trong lớp bùn bề mặt đến nỗi chúng hình thành một lớp màng. Lớp màng này chứa nhiều vi khuẩn lưu huỳnh dạng sợi và vi khuẩn sắt, chúng oxy hóa hydro sunfua thành axit sunfuric và do đó ngăn chặn tác dụng ức chế của hydro sunfua (ngăn ngừa cá chết).

Các con sông ở khu vực thành thị thường là nơi tiếp nhận nước thải tự nhiên từ rác thải sinh hoạt và phân nên số lượng vi khuẩn tăng mạnh trong khu vực đông dân cư. Nhưng khi dòng sông di chuyển ra khỏi thành phố, số lượng vi khuẩn giảm dần và sau 3-4 chục km nó lại trở về giá trị ban đầu. Quá trình tự làm sạch nước này phụ thuộc vào một số yếu tố: sự lắng đọng cơ học của cơ thể vi sinh vật; giảm chất dinh dưỡng trong nước mà vi khuẩn tiêu hóa được; tiếp xúc trực tiếp với tia nắng mặt trời; tiêu diệt vi khuẩn bằng động vật nguyên sinh, v.v.

Các mầm bệnh có thể xâm nhập vào sông và hồ chứa theo nước thải. Trực khuẩn Brucellosis, trực khuẩn tularemia, virus bại liệt, virus lở mồm long móng, cũng như các mầm bệnh gây nhiễm trùng đường ruột - trực khuẩn thương hàn, trực khuẩn phó thương hàn, trực khuẩn lỵ, Vibrio cholerae - có thể tồn tại lâu trong nước và nước có thể trở thành là nguồn lây bệnh truyền nhiễm. Điều đặc biệt nguy hiểm là các vi khuẩn gây bệnh xâm nhập vào mạng lưới cấp nước, điều này xảy ra khi nó gặp trục trặc. Do đó, biện pháp kiểm soát sinh học vệ sinh đã được thiết lập đối với tình trạng của các hồ chứa và nước máy được cung cấp từ chúng.

2.1 Phương pháp phao tỷ trọng đo và xác định tốc độ dòng nước

Để đo và xác định tốc độ dòng nước, có phương pháp phao dựa trên việc theo dõi chuyển động của một vật được hạ xuống dòng nước (phao) bằng dụng cụ hoặc bằng mắt thường. Phao được ném xuống nước trên những con sông nhỏ từ bờ hoặc từ thuyền. Sử dụng đồng hồ bấm giờ, thời gian và khoảng cách di chuyển của phao giữa hai mục tiêu liền kề, khoảng cách giữa hai mục tiêu đã biết, được xác định. Tốc độ bề mặt của dòng điện bằng tốc độ của phao. Bằng cách chia quãng đường phao di chuyển cho thời gian quan sát, sẽ thu được vận tốc dòng chảy.

2.2 Thu thập, bảo quản và vận chuyển mẫu nước

Các mẫu nước để phân tích vi khuẩn được lấy tuân thủ các quy tắc vô trùng: trong chai vô trùng hoặc bằng thiết bị vô trùng - bình định mức với lượng 1 lít.

Cái gọi là máy đo độ sâu chai thuận tiện cho việc thu thập nước từ các hồ chứa mở, nước thải, nước từ bể bơi và giếng.

Hướng dẫn phát hiện mầm bệnh nhiễm khuẩn đường ruột trong nước.

Khi lấy mẫu nước từ các hồ hở cần chú ý các điểm sau: tại điểm ứ đọng và nơi có dòng chảy nhanh nhất (từ bề mặt và ở độ sâu 50 - 100 cm).

Máy đo chai chai. Máy đo độ sâu là thiết bị có thiết kế khác nhau để lấy mẫu nước từ các độ sâu khác nhau. Ở dạng cổ điển, đây là những hình trụ có thể được hạ xuống một độ sâu nhất định, đóng lại ở đó và tháo ra. Tự làm một chiếc bồn tắm cổ điển không phải là điều dễ dàng. Nhưng thay vào đó, bạn có thể sử dụng một chai thủy tinh hoặc nhựa đơn giản có cổ hẹp, có trọng lượng nặng và được cắm bằng nút chai, lý tưởng nhất là nút chai. Dây thừng được buộc vào cổ chai và nút chai. Sau khi hạ chai xuống độ sâu mong muốn (cái chính là nó chìm xuống, đó là tải trọng dùng để làm gì), bạn cần phải rút nắp ra - vì vậy không nên cắm chặt. Sau khi cho chai thời gian lấp đầy ở độ sâu mong muốn (1-2 phút), nó sẽ được kéo lên bề mặt. Việc này phải được thực hiện một cách mạnh mẽ nhất có thể - với tốc độ dâng cao và cổ hẹp, nước từ các lớp bên trên thực tế sẽ không lọt vào bên trong.
Các mẫu được đưa lên bề mặt bằng máy đo độ sâu cũng phải được "làm đặc" bằng lưới sinh vật phù du, sau đó tính toán thể tích nước đã lọc. Vì thể tích này phải càng lớn càng tốt nên bình định mức phải được làm càng lớn càng tốt, chẳng hạn như sử dụng chai thủy tinh hoặc nhựa 2 lít hoặc một số bình lớn khác có cổ hẹp. Cũng phải đánh dấu từng mét trên dây mà chai được buộc vào để xác định độ sâu lấy mẫu.

Điểm kiểm soát đầu tiên tại đập (điểm đầu bãi biển) là điểm hàng rào (TZ1).

Điểm kiểm soát thứ hai tại bến thuyền (cuối bãi) là điểm đón khách (TZ2).

T31-Điểm kiểm soát thứ nhất tại đập (đầu bãi) T32-giây kiểm soát tại bến thuyền (cuối bãi)

2.3 Bảo quản và vận chuyển mẫu

Việc kiểm tra mẫu trong phòng thí nghiệm phải bắt đầu càng sớm càng tốt kể từ thời điểm lấy mẫu.

Việc phân tích phải được thực hiện trong vòng 2 giờ sau khi thu thập.

Nếu không đáp ứng được thời gian giao mẫu và nhiệt độ bảo quản thì không nên phân tích mẫu.

2.4 Chuẩn bị dụng cụ thủy tinh để phân tích

Dụng cụ thủy tinh trong phòng thí nghiệm phải được rửa kỹ, tráng bằng nước cất cho đến khi loại bỏ hoàn toàn chất tẩy rửa và các tạp chất lạ khác rồi sấy khô.

Các ống, bình, chai và lọ thử nghiệm phải được đậy kín bằng nút silicon hoặc gạc bông và được đóng gói sao cho tránh bị nhiễm bẩn sau khi khử trùng trong quá trình vận hành và bảo quản. Mũ có thể là kim loại, silicone, giấy bạc hoặc giấy dày.

Nút cao su mới được đun sôi trong dung dịch natri bicarbonate 2% trong 30 phút và rửa 5 lần bằng nước máy (đun sôi và rửa lặp lại hai lần). Sau đó, nút chai được đun sôi trong nước cất trong 30 phút, sấy khô, bọc trong giấy hoặc giấy bạc và khử trùng trong máy tiệt trùng bằng hơi nước. Nút cao su đã sử dụng trước đây được khử trùng, đun sôi trong 30 phút trong nước máy với chất tẩy rửa trung tính, rửa sạch bằng nước máy, sấy khô, gắn và khử trùng.

Pipet có nhét tăm bông vào phải được đặt trong hộp kim loại hoặc bọc trong giấy.

Khi đóng nắp, đĩa Petri phải được đặt trong hộp kim loại hoặc bọc trong giấy.

Các đĩa đã chuẩn bị sẽ được khử trùng trong lò sấy khô ở nhiệt độ 160-170°C trong 1 giờ, kể từ thời điểm đạt đến nhiệt độ quy định. Đĩa tiệt trùng chỉ có thể được lấy ra khỏi tủ sấy sau khi nó đã nguội dưới 60°C.

Sau khi phân tích, tất cả các đĩa và ống đã sử dụng đều được khử trùng trong nồi hấp ở (126±2)°C trong 60 phút. Pipet được khử trùng bằng cách đun sôi trong dung dịch NaHC03 2%.

Sau khi làm nguội, loại bỏ môi trường còn lại, sau đó ngâm cốc và ống nghiệm, đun sôi trong nước máy và rửa sạch, sau đó tráng lại bằng nước cất.

Thạch dinh dưỡng đã chuẩn bị trước ENDO được đổ vào đĩa Petri và để cứng lại.

2.5 Phương pháp lọc màng

Phương pháp xác định số lượng tế bào E. coli trên một đơn vị thể tích chất lỏng (chỉ số coli); Bản chất của phương pháp là lọc chất lỏng được phân tích qua các bộ lọc màng giữ lại vi khuẩn, sau đó các bộ lọc này được đặt trên môi trường dinh dưỡng rắn và đếm các khuẩn lạc vi khuẩn phát triển trên đó.

Chuẩn bị màng lọc

Bộ lọc màng phải được chuẩn bị để phân tích theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

Chuẩn bị thiết bị lọc

Thiết bị lọc được lau bằng tăm bông nhúng cồn và đánh lửa. Sau khi làm mát, bộ lọc màng vô trùng được đặt ở phần dưới của thiết bị lọc (bàn) bằng nhíp có hình ngọn lửa, được ép bằng phần trên của thiết bị (thủy tinh, phễu) và được cố định bằng thiết bị được cung cấp trong thiết kế của thiết bị. .

Với phương pháp lọc màng, một lượng nước nhất định được đưa qua màng đặc biệt có kích thước lỗ lọc khoảng 0,45 micron.

Kết quả là toàn bộ vi khuẩn trong nước vẫn còn trên bề mặt màng. Sau đó màng chứa vi khuẩn được đặt trên môi trường dinh dưỡng đặc biệt (ENDO). Sau đó, các đĩa Petri được lật lại và đặt vào bộ điều nhiệt trong thời gian và nhiệt độ nhất định. Tổng vi khuẩn coliform (TCB) - được ủ ở nhiệt độ 37 +/- 1°C trong 24-48 giờ. Để xác định vi khuẩn chịu nhiệt, việc cấy được thực hiện trong môi trường được làm nóng trước ở nhiệt độ 44°C và được ủ ở cùng nhiệt độ. nhiệt độ trong 24 giờ.

Môi trường là cảm quang. Vì vậy, tất cả các cốc gieo hạt đều được bảo vệ khỏi ánh sáng.

Trong giai đoạn này, được gọi là ủ bệnh, vi khuẩn có thể nhân lên và hình thành các khuẩn lạc có thể nhìn thấy rõ ràng và có thể dễ dàng đếm được.

Vào cuối thời kỳ ủ bệnh, cây trồng được kiểm tra:

a) việc không có sự phát triển của vi sinh vật trên các bộ lọc hoặc việc phát hiện các khuẩn lạc trên chúng không phải là đặc điểm của vi khuẩn đường ruột (xốp, dạng màng với bề mặt và cạnh không đều), cho phép nghiên cứu được hoàn thành ở giai đoạn phân tích này (18- 24 giờ) với kết quả âm tính về sự hiện diện của vi khuẩn đường ruột trong thể tích nước được phân tích;

b) nếu phát hiện các khuẩn lạc đặc trưng của E. coli trên bộ lọc (màu đỏ sẫm có hoặc không có ánh kim loại, màu hồng và trong suốt), thì nghiên cứu được tiếp tục và kiểm tra bằng kính hiển vi.

Nếu khuẩn lạc tròn phát triển có màu đỏ thẫm ánh kim loại với đường kính 2,0-3,0 mm - Escherichia coli 3912/41 (055:K59);

Nếu phát triển khuẩn lạc tròn màu đỏ thẫm, đường kính 1,5-2,5 mm, có ánh kim loại mờ - Escherichia coli 168/59 (O111:K58)

2.6 Tính toán kết quả

Sau thời gian ủ 48 giờ đối với vi khuẩn coliform thông thường và 24 giờ đối với vi khuẩn chịu nhiệt, các khuẩn lạc mọc trên đĩa sẽ được đếm.

Các khuẩn lạc phát triển trên bề mặt cũng như ở độ sâu của môi trường thạch được đếm bằng kính lúp có độ phóng đại gấp 5 lần hoặc một thiết bị đặc biệt có kính lúp. Để làm điều này, chiếc cốc được đặt lộn ngược trên nền đen và mỗi khuẩn lạc được đánh dấu từ dưới lên bằng mực hoặc mực thủy tinh.

Để xác nhận sự hiện diện của OKB, hãy kiểm tra những điều sau:

tất cả các khuẩn lạc, nếu có ít hơn 5 khuẩn lạc mọc trên giấy lọc;

ít nhất 3 - 4 khuẩn lạc mỗi loại.

Để xác nhận sự hiện diện của TSD, kiểm tra tất cả các khuẩn lạc điển hình nhưng không quá 10.

Đếm số lượng khuẩn lạc của mỗi loại.

Tính toán và trình bày kết quả.

Kết quả phân tích được biểu thị bằng số lượng đơn vị hình thành khuẩn lạc (CFU) của tổng số vi khuẩn coliform trong 100 ml nước. Để tính kết quả, tổng số khuẩn lạc được xác nhận là tổng số vi khuẩn coliform phát triển trên tất cả các bộ lọc được cộng lại và chia cho 3.

Vì phương pháp phân tích nước này chỉ liên quan đến việc xác định tổng số khuẩn lạc hình thành các loại vi khuẩn khác nhau nên kết quả của nó không thể đánh giá rõ ràng sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh trong nước. Tuy nhiên, số lượng vi sinh vật cao cho thấy nước bị ô nhiễm vi khuẩn nói chung và có khả năng cao là có sự hiện diện của các sinh vật gây bệnh.

Mỗi khuẩn lạc phân lập được chọn sẽ được kiểm tra nguồn gốc Gram.

nhuộm gram

Nhuộm gram có tầm quan trọng lớn trong phân loại vi khuẩn, cũng như chẩn đoán vi sinh các bệnh truyền nhiễm. Một đặc điểm của vết Gram là thái độ không đồng đều của các vi sinh vật khác nhau đối với thuốc nhuộm thuộc nhóm triphenylmethane: gentian, methyl hoặc tím pha lê. Các vi sinh vật thuộc nhóm gram dương Gram (+), ví dụ như tụ cầu, liên cầu, có mối liên hệ chặt chẽ với thuốc nhuộm và iốt được chỉ định. Các vi sinh vật được nhuộm không bị đổi màu khi tiếp xúc với rượu, do đó, khi nhuộm thêm bằng Gram fuchsin (+), các vi sinh vật không thay đổi màu tím ban đầu. Các vi sinh vật gram âm Gram (-) (bacteroides, fusobacteria, v.v.) hình thành với tinh thể gentian hoặc tím methylene và iốt, một hợp chất dễ bị phá hủy bởi rượu, do đó chúng bị đổi màu và sau đó nhuộm màu với fuchsin, thu được một màu đỏ.

Thuốc thử: dung dịch carbolic của tím gentian hoặc tím pha lê, dung dịch nước Lugol, cồn ethyl 96%, dung dịch nước-cồn của fuchsin.

Kỹ thuật tô màu. Đặt một mảnh giấy lọc lên vết bôi cố định và đổ dung dịch carbolic của tím gentian lên đó trong 1/2 đến 1 phút. Xả thuốc nhuộm và không cần rửa lại, đổ dung dịch Lugol trong 1 phút. Xả dung dịch Lugol và rửa chế phẩm trong cồn 96% trong 1/2 đến 1 phút cho đến khi thuốc nhuộm ngừng bong ra. Rửa bằng nước. Ngoài ra, nhuộm bằng fuchsin pha loãng trong 1/2 đến 1 phút. Xả hết thuốc nhuộm, rửa và sấy khô chế phẩm.

3. Kết quả nghiên cứu

.1 Phân tích vi sinh của nước hồ Pechersk (sử dụng ví dụE. coli) trong giai đoạn mùa xuân (tháng 5) của nghiên cứu 2009-2013.

Qua kết quả lấy mẫu nước 3 lần tại 2 điểm lấy mẫu (TZ1 - đầu bãi, gần đập, TZ2 - cuối bãi, bến thuyền), chúng tôi tính được các chỉ tiêu trung bình OKB và TKB, kết quả được trình bày ở Bảng 3.1.

Bảng 3.1. Chỉ số trung bình của OKB và TKB trong nước hồ Pechersk vào tháng 5 năm 2013.

Chỉ tiêu hàm lượng vi khuẩn E. coli theo OKB đầu và cuối tháng 5 ở TZ1 (gần đập) không khác biệt, lên tới 195 CFU/cm3, kém 3,3 lần so với trong nước mẫu lấy ở TZ2 (tại bến thuyền) vào đầu tháng 5 và gấp 4,3 lần vào cuối tháng 5.

Một nghiên cứu về diễn biến hàm lượng E. coli trong nước hồ Pechersk vào tháng 5 năm 2013 theo SES đã xác nhận tính đúng đắn của nghiên cứu của chúng tôi và cho thấy chỉ số TBC ở TZ2 cao hơn 3,4 lần so với TZ1 (theo kết quả của chúng tôi, cao hơn 3,3 lần).

Nghiên cứu sự thay đổi chỉ số OKB và TKB trong tháng 5 từ năm 2009 đến năm 2013. cho thấy sự biến động lớn về các chỉ số, được thể hiện rõ trên Hình 3.1 - 3.2

Phân tích dữ liệu từ tổ chức chăm sóc sức khỏe “Trung tâm Vệ sinh và Dịch tễ học khu vực Mogilev” vào đầu tháng 5 năm 2008-2013.

Khi kết thúc quá trình phân tích dữ liệu vào đầu tháng 5 năm 2008-2013, chúng tôi nhận thấy rằng trong năm 2008 và 2012, có nhiều OKB ở TZ1 hơn ở TZ2.

Phân tích dữ liệu từ tổ chức chăm sóc sức khỏe “Trung tâm Vệ sinh và Dịch tễ học khu vực Mogilev” vào cuối tháng 5 năm 2008-2013.

Theo SanPiN, vi khuẩn coliform thông thường không nên có trong 100 ml nước uống

Theo SanPiN, 100 ml nước uống được thử nghiệm sẽ không có vi khuẩn phân coliform chịu nhiệt.

Đối với các hồ chứa mở, theo OKB, không quá 500 CFU trên 100 ml nước, theo TKB, không quá 100 CFU trên 100 ml nước.

Sự hiện diện của vi khuẩn E. coli trong nước khẳng định tính chất phân của ô nhiễm.

Theo kết quả đo, trong thời kỳ nước thấp vào mùa hè, vi khuẩn coliform hiện diện với số lượng nhỏ, thường từ một trăm đến vài trăm đơn vị và chỉ trong thời gian lũ lụt, chúng mới tăng lên 1000 đơn vị trở lên trong thời gian ngắn.

Giá trị thấp trong mùa hè có thể do một số yếu tố:

) bức xạ mặt trời cường độ cao, có hại cho vi khuẩn;

) giá trị pH tăng cao vào mùa hè (thường pH > 8 vào mùa hè, mùa đông< 8) за счет развития фитопланктона;

) giải phóng các chất chuyển hóa thực vật phù du vào nước, ức chế hệ vi khuẩn.

Khi bắt đầu mùa thu đông, những yếu tố này suy yếu đáng kể và số lượng vi khuẩn tăng lên mức vài nghìn đơn vị. Cực đoan nhất xảy ra trong thời kỳ tuyết tan, đặc biệt là trong lũ lụt, khi nước tan chảy cuốn trôi vi khuẩn khỏi bề mặt khu vực lưu vực.

Tổng số vi khuẩn hình thành khuẩn lạc vào giữa hè thấp hơn so với thời kỳ xuân thu, thời điểm này có cường độ bức xạ mặt trời gay gắt, gây bất lợi cho vi khuẩn.

Số lượng vi khuẩn lớn nhất trong các vùng nước mở được tìm thấy ở các lớp bề mặt (trong lớp cách mặt nước 10 cm) của các vùng ven biển. Với khoảng cách từ bờ và độ sâu ngày càng tăng, số lượng vi khuẩn giảm dần.

Phần kết luận

vi khuẩn gây bệnh coli

Để tìm và xác định E. coli, phân tích vi sinh của các mẫu đã được thực hiện vào đầu tháng 5 năm 2013. Một phân tích thống kê dữ liệu từ tổ chức chăm sóc sức khỏe “Trung tâm Vệ sinh và Dịch tễ học Khu vực Mogilev” vào đầu tháng 5 năm 2008-2012 cũng đã được thực hiện.

Kết thúc quá trình phân tích, chúng tôi nhận thấy số lượng vi khuẩn coliform chúng tôi tính toán không vượt quá giới hạn cho phép.

Khi kết thúc phân tích thống kê dữ liệu từ tổ chức chăm sóc sức khỏe “Trung tâm vệ sinh và dịch tễ học khu vực Mogilev” trong năm 2008-2012, người ta phát hiện ra rằng trong mùa hè, vi khuẩn coliform nước thấp hiện diện với số lượng nhỏ. Tổng số vi khuẩn hình thành vào giữa hè thấp hơn so với thời kỳ xuân thu, do bức xạ mặt trời cường độ mạnh gây bất lợi cho vi khuẩn và khi bắt đầu vụ thu đông, số lượng vi khuẩn tăng lên. mức độ vài nghìn đơn vị. Cực đoan nhất xảy ra trong thời kỳ tuyết tan, đặc biệt là trong lũ lụt, khi nước tan chảy cuốn trôi vi khuẩn khỏi bề mặt khu vực lưu vực.

Tài liệu tham khảo

1. Fomin G.S. Nước. Kiểm soát an toàn hóa chất, vi khuẩn và phóng xạ theo tiêu chuẩn quốc tế. Sách tham khảo bách khoa. M.: Nhà xuất bản "Người bảo vệ", 1995.

Dolgonosov B.M., Dyatlov D.V., Suraeva N.O., Bogdanovich O.V., Gromov D.V., Korchagin K.A. Hệ thống thông tin và mô hình hóa Aqua CAD - công cụ quản lý chế độ công nghệ tại trạm cấp nước // Công nghệ cấp nước và vệ sinh. 2003. Số 6. trang 26-31.

Dolgonosov B.M., Khramenkov S.V., Vlasov D.Yu., Dyatlov D.V., Suraeva N.O., Grigorieva S.V., Korchagin K.A. Dự báo các chỉ tiêu chất lượng nước tại đầu vào trạm cấp nước // Thiết bị cấp nước và vệ sinh 2004. Số 11. trang 15-20.

Kochemasova Z.N., Efremova S.A., Rybakova A.M. Vi sinh vệ sinh và virus học. M.: Y học, 1987.

SanPiN 2.1.5.980-00. Thoát nước khu dân cư, bảo vệ vệ sinh nguồn nước. Yêu cầu vệ sinh để bảo vệ nước mặt.

SanPiN 2.1.4.1074-01. Nước uống. Yêu cầu vệ sinh về chất lượng nước trong hệ thống cấp nước uống tập trung. Kiểm soát chất lượng.

MUK 4.2.1018-01. Các phương pháp kiểm soát. Các yếu tố sinh học và vi sinh vật. Phân tích vệ sinh và vi sinh của nước uống.

Vi sinh vệ sinh

Người đánh giá: Cái đầu Khoa Dịch tễ học PGMA,

Môn vi sinh vệ sinh p3
Nguyên tắc và phương pháp tiến hành nghiên cứu vi sinh vệ sinh c3
Các nhóm vi sinh vật chỉ định vệ sinh chính (SIM) c5
Vi sinh vệ sinh nước p11
Vi sinh vệ sinh đất p14
Vi sinh vệ sinh không khí p15
Nghiên cứu vệ sinh và vi sinh trong cơ sở y tế p16
Nhiệm vụ kiểm tra p19

Vi sinh vệ sinh– một ngành khoa học nghiên cứu hệ vi sinh vật của môi trường và tác động của nó đến sức khỏe con người cũng như tình hình sinh thái ở các sinh cảnh khác nhau. Nhiệm vụ chính của vi sinh vệ sinh thực tế là phát hiện sớm hệ vi sinh vật gây bệnh ở môi trường bên ngoài. Cần nhớ rằng con người và động vật máu nóng là nguồn chứa mầm bệnh chính của hầu hết các bệnh truyền nhiễm và phần lớn mầm bệnh được truyền qua cơ chế khí dung và phân-miệng.

Sự khởi đầu của sự phát triển của vi sinh vật vệ sinh có thể được xem xét vào năm 1888, khi bác sĩ người Pháp E. Mace đề xuất coi E. coli là một chỉ số về ô nhiễm phân của nước.

Nguyên tắc tiến hành nghiên cứu vi sinh vệ sinh

Lấy mẫu thích hợp. Nó được thực hiện tuân thủ tất cả các điều kiện cần thiết quy định cho từng đối tượng được nghiên cứu. Vô trùng được duy trì. Nếu không thể phân tích ngay, vật liệu được bảo quản trong tủ lạnh không quá 6-8 giờ.
Tính tuần tự của các phân tích được thực hiện. Hầu hết các đối tượng được nghiên cứu đều chứa nhiều loại vi sinh vật, phân bố vô cùng không đồng đều. Một loạt mẫu được lấy từ các khu vực khác nhau của đối tượng. Trong phòng thí nghiệm, các mẫu được trộn và sau đó lượng vật liệu cần thiết được đo chính xác (thường là giá trị trung bình của toàn bộ vật liệu được thử nghiệm).
Lấy mẫu lặp đi lặp lại. Theo quy luật, ở các đối tượng nghiên cứu, thành phần của hệ vi sinh vật thay đổi khá nhanh, ngoài ra, các vi sinh vật gây bệnh phân bố không đều trong đó. Theo đó, việc lấy mẫu lặp lại cho phép thu được thông tin đầy đủ hơn.
Việc chỉ sử dụng các phương pháp nghiên cứu tiêu chuẩn giúp có thể thu được kết quả tương đương ở các phòng thí nghiệm khác nhau.
Sử dụng bộ xét nghiệm: trực tiếp (phát hiện mầm bệnh) và gián tiếp.
Đánh giá các đối tượng dựa trên tổng thể các kết quả thu được - có tính đến các chỉ số vệ sinh khác (cảm quan, hóa học, vật lý, v.v.)

Phương pháp tiến hành nghiên cứu vi sinh vệ sinh

Vi sinh vệ sinh thực tế sử dụng hai phương pháp chính để đánh giá tình trạng vệ sinh và dịch tễ học của môi trường.

TÔI. Phương pháp phát hiện mầm bệnh trực tiếp. Chúng là tiêu chí chính xác, đáng tin cậy nhất để đánh giá mức độ nguy hiểm dịch bệnh của môi trường bên ngoài. Nhược điểm chính là độ nhạy thấp.

Khó cách ly gây bệnh vi sinh vật trên môi trường dinh dưỡng được xác định bởi các yếu tố sau:

Hàm lượng vi sinh vật gây bệnh ở môi trường bên ngoài tương đối thấp, chiếm 1/30.000 tổng thành phần loài của hệ vi sinh vật ở môi trường bên ngoài. Ngoài ra, nó được phân bố không đồng đều.
Việc phân lập một mầm bệnh không phải lúc nào cũng chỉ ra sự hiện diện của các loại mầm bệnh khác. Nghĩa là cần phải tiến hành nghiên cứu trên hầu hết mọi mầm bệnh, điều này là không khả thi.
Sự biến đổi của mầm bệnh. Loại thứ hai, khi bước vào môi trường bên ngoài, sẽ có được những đặc tính mới khiến chúng khó nhận biết.
Mối quan hệ cạnh tranh giữa mầm bệnh và thực vật hoại sinh khi cùng phát triển trên môi trường dinh dưỡng.
Môi trường nuôi cấy không đủ chọn lọc và nhu cầu sử dụng động vật thí nghiệm và nuôi cấy mô.

II. Các phương pháp chỉ báo gián tiếp về sự hiện diện có thể có của mầm bệnh ở môi trường bên ngoài.

Hai tiêu chí được sử dụng để có thể gián tiếp đánh giá sự hiện diện của mầm bệnh ở môi trường bên ngoài:

Tổng số vi sinh vật (TMC)
Hàm lượng vi sinh vật chỉ định vệ sinh (SIM)

- Tổng số vi sinh vật (TMC)được xác định bằng cách đếm tất cả vi sinh vật trong 1 gam hoặc 1 ml cơ chất.

Trong trường hợp này, họ tiến hành từ giả định rằng một vật thể càng bị ô nhiễm chất hữu cơ thì TMC càng cao và càng có nhiều khả năng có sự hiện diện của mầm bệnh. Tuy nhiên, điều này không phải lúc nào cũng đúng, vì TMC có thể lớn do hoại sinh, trong khi mầm bệnh có thể không có. Vì vậy, việc đánh giá TMC như một chỉ số đánh giá mức độ ô nhiễm chất hữu cơ của môi trường bên ngoài sẽ phù hợp hơn.

OMC xác định bằng hai phương pháp:

Đếm trực tiếp. Chúng được thực hiện dưới kính hiển vi bằng cách sử dụng các máy ảnh đặc biệt, ví dụ như Petrov hoặc Goryaev, hoặc các máy đếm điện tử đặc biệt. Mẫu thử nghiệm trước được đồng nhất hóa và thuốc nhuộm (thường là erythrosine) được thêm vào. Việc đếm trực tiếp cũng có thể được thực hiện trên màng lọc mà qua đó chất lỏng thử nghiệm hoặc huyền phù đi qua. Phương pháp này được sử dụng trong trường hợp khẩn cấp. Nếu cần câu trả lời khẩn cấp về hàm lượng định lượng của vi khuẩn (ví dụ trong trường hợp xảy ra sự cố trong hệ thống cấp nước, khi đánh giá hiệu quả của các cơ sở xử lý, v.v.). Nhược điểm chính là không có khả năng đếm vi khuẩn khi chúng hình thành cụm hoặc khi chúng “dính” vào các hạt của chất nền đang nghiên cứu. Không thể đếm được những vi sinh vật nhỏ chứ đừng nói đến virus. Và cuối cùng, không thể phân biệt được vi sinh vật sống với vi sinh vật đã chết.
Cấy định lượng trên môi trường dinh dưỡng. Từ các dung dịch pha loãng 10 lần nối tiếp của chất lỏng thử nghiệm hoặc huyền phù đã chuẩn bị, 1 ml được chuyển vào các đĩa Petri vô trùng và đổ vào MPA, đun chảy và làm nguội đến 45-50 0 C. Các chất lỏng được trộn đều và sau khi thạch đông lại, các đĩa được đặt vào bộ điều nhiệt. Sau khi ủ, số lượng khuẩn lạc đã phát triển được đếm và tính toán số lượng vi khuẩn sống sót trên một đơn vị thể tích của đối tượng đang nghiên cứu, có tính đến độ pha loãng. Trong trường hợp này, chỉ xác định được vi khuẩn hiếu khí và kỵ khí tùy ý có khả năng nhân lên trên MPA. Do đó, số liệu thu được thấp hơn đáng kể so với số lượng vi sinh vật thực tế có trong đối tượng nghiên cứu.

-Vi sinh vật được gọi là chỉ tiêu vệ sinh, nhờ đó bạn có thể gián tiếpđánh giá sự hiện diện có thể có của mầm bệnh ở môi trường bên ngoài. Người ta cho rằng đồ vật càng bị nhiễm chất chiết xuất từ người và động vật thì càng có nhiều vi sinh vật đảm bảo vệ sinh và càng có nhiều khả năng xuất hiện mầm bệnh.

Các đặc điểm chính của SPM:

Vi sinh vật phải liên tục sống trong các khoang tự nhiên của con người và động vật và liên tục được thải ra môi trường bên ngoài.
Vi khuẩn không được sinh sôi ở môi trường bên ngoài (trừ thực phẩm) hoặc chỉ nhân lên một chút.
Thời gian tồn tại của vi khuẩn ở môi trường bên ngoài không được ít hơn mà thậm chí còn dài hơn thời gian tồn tại của vi sinh vật gây bệnh.
Độ ổn định của SPM trong môi trường bên ngoài phải tương đương hoặc vượt quá độ ổn định của vi sinh vật gây bệnh.
Vi khuẩn không được có “nhân đôi” hoặc chất tương tự ở môi trường bên ngoài mà chúng có thể bị nhầm lẫn.
Vi khuẩn không được thay đổi ở môi trường bên ngoài, ít nhất là trong thời kỳ tồn tại của vi sinh vật gây bệnh.
Các phương pháp xác định và phân biệt vi sinh vật phải đơn giản.

SPM thường được chia thành 3 nhóm.

Không có ranh giới được xác định rõ ràng giữa chúng; Một số vi sinh vật vừa là chỉ số của ô nhiễm phân và không khí. Tất cả các địa điểm tự nhiên thiêng liêng đều được coi là dấu hiệu ô nhiễm sinh học.

Nhóm A bao gồm cư dân sống trong ruột người và động vật; vi sinh vật được coi là như là dấu hiệu của ô nhiễm phân. Nó bao gồm cái gọi là vi khuẩn coliform - coliforms. (đối với nước uống theo văn bản quy định mới - Phân tích vi sinh vệ sinh trong nước uống. Hướng dẫn MUK 4.2.1018-01 - nhóm này được gọi là vi khuẩn coliform thông thường OKB); Vi khuẩn Coliform - OCB, Escherichia, Enterococcus, Proteus, Salmonella; cũng như clostridia khử sulfite (bao gồm cả Cl.perfringens), ưa nhiệt, thực khuẩn, Pseudomonas aeruginosa, Candida, Acinetobacter và Aeromonas.

Nhóm B bao gồm cư dân của đường hô hấp trên và vòm họng; vi sinh vật được coi là chỉ số ô nhiễm không khí. Nó bao gồm liên cầu tan máu alpha và beta, tụ cầu khuẩn (đông máu, lecithinase dương tính, tan máu và kháng kháng sinh; trong một số trường hợp, loại tụ cầu được xác định - vàng).

Nhóm C bao gồm các vi sinh vật hoại sinh sống ở môi trường bên ngoài; vi sinh vật được coi là chỉ số của quá trình tự làm sạch. Nó bao gồm vi khuẩn ammon hóa, vi khuẩn nitrat hóa, một số vi khuẩn hình thành bào tử, nấm, xạ khuẩn, v.v..

Hiệu giá SPM- thể tích nhỏ nhất của vật liệu đang nghiên cứu (tính bằng ml) hoặc khối lượng trọng lượng (tính bằng g) trong đó tìm thấy ít nhất một mẫu SPM.

Chỉ số SPM– số lượng cá thể SPM được tìm thấy trong một thể tích (số lượng) nhất định của đối tượng đang nghiên cứu. Đối với nước, sữa và các sản phẩm dạng lỏng khác – 1 lít; đối với đất, thực phẩm - trong 1 g Chỉ số là nghịch đảo của hiệu giá, do đó việc tính lại hiệu giá thành chỉ số và ngược lại có thể được thực hiện theo công thức: T = 1000/I; I=1000/T – đối với chất lỏng. Theo đó, đối với đất và thực phẩm T = 1/I, I = 1/T.

Là một chỉ báo bổ sung, chỉ số số có xác suất cao nhất (MPI) hiện cũng được sử dụng, chỉ số này có giới hạn tin cậy trong đó số lượng vi khuẩn mong muốn thực sự có thể dao động với xác suất 95%. Để xác định NHF, các nghiên cứu được thực hiện 3, 5 và 10 lần. Chỉ số này được xác định bằng cách sử dụng các bảng Hoskens-Mouret đặc biệt.

Các nhóm DMA chính

vi khuẩn Coli

Dưới tên gọi chung “vi khuẩn coliform” – coliforms – vi khuẩn thuộc họ Enterobacteriaceae sinh con Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella. Theo văn bản quy định mới ban hành sau năm 2001, nhóm này được gọi là vi khuẩn coliform thông thường - TCB. Đặc điểm của các nhóm này là giống nhau, vi khuẩn coliform bao gồm các trực khuẩn gram âm, không tạo bào tử, lên men đường lactose và glucose thành axit và sinh khí ở nhiệt độ 37 0 C trong 24 giờ và không có hoạt tính oxidase. Việc sử dụng hai tên cho cùng một nhóm vi khuẩn có liên quan đến việc sử dụng các văn bản quy định của các năm ban hành khác nhau. Ví dụ, trong Lệnh hiện hành số 720 ngày 31 tháng 7 năm 1978 “Về cải thiện chăm sóc y tế cho bệnh nhân mắc các bệnh phẫu thuật có mủ và tăng cường các biện pháp chống nhiễm trùng bệnh viện”, nhóm này được gọi là coliform và trong kết quả nghiên cứu được thực hiện theo Lệnh này sẽ được ghi chú – phát hiện thấy vi khuẩn coliform (không phát hiện được). Và khi kiểm tra nước uống theo hướng dẫn từ năm 2001 sẽ ghi nhận - OKB đã phát hiện (không phát hiện).

Escherichia coli

Vi sinh vật là tổ tiên của tất cả các SPM. Đây là đại diện chính của nhóm OCB; tùy theo mục đích và đối tượng nghiên cứu, nhóm này bao gồm một phân nhóm TCB - vi khuẩn coliform chịu nhiệt.

Vi khuẩn coliform thường gặp - TCB – gram-, oxidase-, không tạo bào tử, có khả năng sinh trưởng trên môi trường vi phân lactose, lên men lactose đến KG ở nhiệt độ t 0 37 0 C trong 24 giờ.

Vi khuẩn coliform chịu nhiệt - TCB –đều thuộc nhóm OKB, có tất cả các đặc điểm của chúng, ngoài ra chúng còn có khả năng lên men lactose thành KG ở nhiệt độ t 0 44 0 C trong 24 giờ.

Là một thử nghiệm bổ sung, việc xác định quá trình lên men glucose ở các nhiệt độ canh tác khác nhau được sử dụng, vì người ta biết rằng OCB phân lập từ nước clo (vòi nước, bể bơi, v.v.) không có khả năng gây ra quá trình lên men glucose với sự hình thành khí ở nhiệt độ nhiệt độ 44 0 C.

Nhược điểm đáng kể E.coli như SPM là:

1. Sự phong phú của các chất tương tự ở môi trường bên ngoài;

2. Không đủ khả năng chống lại các ảnh hưởng bất lợi của môi trường, chẳng hạn như các loại hóa chất và thay đổi độ pH. Đồng thời, một số vi sinh vật gây bệnh, đặc biệt là enterovirus, có khả năng kháng cự cao hơn;

3. Tính biến thiên cao, do đó các vấn đề về sinh thái và chẩn đoán của nó không được giải quyết hoàn toàn;

4. Thời gian tồn tại tương đối ngắn trong thực phẩm, trong khi một số vi sinh vật gây bệnh (ví dụ: S. sonnei, S. schottmuelleri, enterovirus) tồn tại trong thời gian dài;

5. E. coli sinh sôi trong nước có hàm lượng chất hữu cơ tối thiểu 280 µg/l;

6. E. coli là chỉ số mờ. Ví dụ, các đợt bùng phát bệnh salmonellosis có nguồn gốc từ nước được biết đến với hàm lượng mầm bệnh lên tới 17 vi khuẩn trên 1 lít, trong khi hàm lượng E.coli không vượt quá 4 vi khuẩn trên 1 lít, tức là vẫn gần như bình thường.

Giống vi khuẩn cầu khuẩn

SPM được đề xuất bởi Houston (1910). Chi này gồm 16 loài, bệnh gây bệnh chủ yếu ở người là do E. faecalis, E. faecium, E. durans. Những vi khuẩn này đáp ứng một số yêu cầu đối với SPM.

1. Enterococci là cư dân thường trú trong ruột người, mặc dù thực tế là chúng có số lượng nhỏ hơn E. coli.

2. Vi khuẩn thực tế không thể sinh sản ở môi trường bên ngoài (nhiệt độ phải là 20 0 C và hàm lượng chất hữu cơ phải là 375 µg/l).

3. Enterococci không thể hiện sự biến đổi rõ rệt ở môi trường bên ngoài, điều này tạo điều kiện thuận lợi cho việc nhận biết chúng.

4. Enterococci không có chất tương tự ở môi trường bên ngoài.

5. Enterococci chết ở môi trường bên ngoài sớm hơn nhiều so với E. coli do đó chúng luôn chỉ ra sự ô nhiễm phân tươi.

6. Ưu điểm quan trọng nhất của enterococci là khả năng chống lại các tác động bất lợi từ bên ngoài. Enterococci được phân biệt bằng xét nghiệm kháng Sherman.

a) Enterococci có khả năng chịu nhiệt lên tới 65 C trong 30 phút, điều này khiến chúng trở thành một chỉ số về chất lượng xử lý nhiệt hoặc thanh trùng.

b) Enterococci có khả năng kháng NaCl nồng độ cao (6,5-17%) - SPM trong nghiên cứu nước biển.

c) Enterococci có khả năng chống biến động pH (3-12), cho phép chúng được sử dụng làm chất chỉ thị ô nhiễm phân trong các sản phẩm có tính axit và kiềm (nước thải). Trong điều kiện như vậy E.coli nhanh chóng mất đi đặc tính của nó và trở nên khó nhận biết.

Số lượng và tỷ lệ enterococci và E. coli được sử dụng để đánh giá mức độ nghiêm trọng và thời gian nhiễm phân.

Giống vi khuẩn Proteus

Chúng là nhóm địa điểm tự nhiên linh thiêng thứ ba (quan trọng nhất). Chúng được đề xuất là SPM vào năm 1911. Chi này bao gồm 4 loài; có tầm quan trọng lớn nhất P. Vulgaris, P.mirabilis.Đồng thời P. thô tục thường được coi là dấu hiệu cho thấy vật thể bị nhiễm bẩn bởi các chất hữu cơ (vì nó thường được tìm thấy trong các chất cặn thối rữa) và P.mirabilis – như một dấu hiệu cho thấy ô nhiễm phân (thường được tìm thấy trong phân). P.rettgeri thường được phát hiện trong phân trong quá trình nhiễm trùng đường ruột - do đó việc phát hiện nó cho thấy có vấn đề dịch tễ học. Đại diện của chi Proteus tạo ra sự phát triển “leo thang” đặc trưng trên môi trường của Endo và Lewin, thường bao phủ toàn bộ tấm. Bạn có thể phân lập Proteus bằng phương pháp Shukevich - bằng cách cấy MPA mới cắt vào phần ngưng tụ (ở đáy ống nghiệm) - nếu có Proteus trong mẫu, nó sẽ bao phủ toàn bộ bề mặt thạch.

Sự hiện diện của protea trong nước, thực phẩm và nước rửa luôn cho thấy vật thể bị nhiễm bẩn với chất nền đang phân hủy và điều kiện vệ sinh cực kỳ kém. Các sản phẩm thực phẩm bị nhiễm Proteus thường bị loại bỏ; Nước có chứa Proteus không nên uống. Việc xác định Proteas được khuyến khích khi nghiên cứu nước từ các hồ chứa mở và bùn dược liệu. Và khi kiểm tra các sản phẩm thực phẩm, việc phát hiện Proteus được GOST cung cấp.

Clostridium perfringens

SPM được đề xuất như thế nào vào năm 1895, gần như đồng thời với E.coli. Wilson và Blair (1924-1925) đã đề xuất một môi trường sắt-sulfite, cho phép phân biệt clostridia có nguồn gốc từ phân với clostridia sống ở môi trường bên ngoài. Clostridia trong đường ruột khử sulfite và gây đen môi trường, trong khi clostridia sống tự do không có sulfite reductase và không làm thay đổi màu của môi trường. Một số vi sinh vật khác cũng có thể gây đen môi trường, do đó, để ngăn chặn sự phát triển của hệ vi sinh vật đi kèm, nên trồng cây ở nhiệt độ 43-44,5 0 C hoặc ủ mẫu ở 80 0 C trong 15-20 phút. Cái đó., Clostridium perfringens dễ dàng để làm nổi bật và phân biệt. Tuy nhiên, Clostridium perfringens Vì SPM có một số nhược điểm nhất định.

Trực khuẩn không phải lúc nào cũng có trong ruột người.
Clostridium perfringens tồn tại lâu ở môi trường bên ngoài do hình thành bào tử. Do đó, việc phát hiện vi sinh vật này cho thấy ô nhiễm phân đã từng xảy ra. Đây là dấu hiệu cho thấy có thể có sự hiện diện của enterovirus.
Clostridium perfringens có thể sinh sản ở môi trường bên ngoài (ở một số loại đất). Để bào tử nảy mầm, cần phải có “sốc nhiệt độ”, tức là làm nóng ở 70 0 C trong 15-30 phút.

Hiện nay, người ta đề xuất đánh giá tuổi nhiễm phân của một vật thể bằng cách so sánh số lượng bào tử và dạng sinh dưỡng. Clostridium perfringens. Với mục đích này, số lượng clostridia trong các mẫu được làm nóng và không được làm nóng được xác định.

A) Trong các mẫu được làm nóng, chỉ số sẽ chỉ được biểu thị bằng dạng bào tử, cho thấy sự ô nhiễm lâu dài (trong phân tươi, 80-100% là tế bào sinh dưỡng).

B) Trong các mẫu không được xử lý nhiệt, phát hiện được dạng sinh dưỡng và bào tử.

Việc ghi lại số lượng clostridia được cung cấp trong nghiên cứu đất, bùn trị liệu và nước mở.

Clostridium perfringens không nên tìm thấy trong 100 ml nước ở các nhà máy chế biến thực phẩm. Loại vi khuẩn này cũng được xác định trong một số sản phẩm thực phẩm nhưng có thể là tác nhân gây ngộ độc thực phẩm. Mức độ quan trọng Clostridium perfringens trong các món ăn làm sẵn là 10 tế bào trong 1 ml hoặc 1 g sản phẩm. Thực phẩm đóng hộp làm sẵn không nên chứa Clostridium perfringens.

Dựa trên tỷ lệ giữa lượng E. coli, enterococci và clostridia, tuổi nhiễm phân được đánh giá.

Giống vi khuẩn vi khuẩn Salmonella

Chúng là mầm bệnh phổ biến nhất của nhiễm trùng đường hô hấp cấp tính và do đó có thể là dấu hiệu cho thấy sự hiện diện của các tác nhân lây nhiễm khác có cơ chế bệnh sinh và dịch tễ học tương tự.

Trong những thập kỷ gần đây, vi khuẩn Salmonella đã trở nên phổ biến ở môi trường bên ngoài. Số lượng vật mang vi khuẩn tăng lên (lên tới 9,2%), giải phóng hàng triệu tỷ tế bào ra môi trường bên ngoài qua mỗi gram phân ở động vật càng rõ rệt hơn. Trong nước thải từ các nhà máy chế biến thịt, vi khuẩn salmonella được tìm thấy trong 80-100% mẫu, trong nước thải đã qua xử lý - trong 33-95% mẫu; vi khuẩn cũng được tìm thấy trong nước thải clo.

Đặc điểm của Salmonella dưới dạng SPM

Những vi sinh vật này xâm nhập vào môi trường bên ngoài chỉ bằng phân người và động vật. Việc phát hiện chúng luôn chỉ ra sự ô nhiễm phân.
Salmonella không phát triển trong đất; trong nước chúng chỉ sinh sản ở nhiệt độ cao và hàm lượng chất hữu cơ cao.
Khi xác định Salmonella, cần xác định không chỉ tỷ lệ phần trăm phát hiện dương tính mà còn cả NFP. Chỉ NHF mới có thể dự đoán sự gia tăng của bệnh nhiễm khuẩn salmonella và các bệnh cấp tính khác có nguyên nhân tương tự.

Virus vi khuẩn

Người ta đề xuất sử dụng thể thực khuẩn của vi khuẩn đường ruột (Escherichia, Shigella, Salmonella) làm SPM. Các phage đường ruột liên tục được tìm thấy ở những nơi có vi khuẩn mà chúng thích nghi. Tuy nhiên, chúng có một số nhược điểm khi dùng làm chỉ số cho thấy sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh. Ví dụ, thể thực khuẩn tồn tại ở môi trường bên ngoài lâu hơn (8-9 tháng) so với vi khuẩn tương ứng (4-5 tháng). Nhưng với tư cách là dấu hiệu của ô nhiễm phân, thể thực khuẩn có giá trị đáng kể.

1. Thể thực khuẩn được phân lập từ nước thải với tần suất tương đương với nhiều loại virus gây bệnh (bại liệt, Coxsackie, viêm gan A).

2. Sự tương đồng với các virus gây bệnh đường ruột bổ sung cho khả năng kháng thuốc khử trùng.

3. Phương pháp phát hiện thể thực khuẩn khá đơn giản. Việc cấy ghép được thực hiện trong môi trường nuôi cấy vi khuẩn chỉ thị. Sau khi ủ, các quá trình cấy truyền được thực hiện trên môi trường thạch đậm đặc, các CFU trong thí nghiệm và đối chứng được so sánh và rút ra kết luận.

Giống vi khuẩn tụ cầu khuẩn

Staphylococci là đại diện của hệ vi sinh vật bình thường. Nơi định vị chính của chúng là màng nhầy của đường hô hấp trên của con người và một số động vật máu nóng, cũng như da. Staphylococci cũng có mặt trong ruột của người khỏe mạnh. Staphylococci xâm nhập vào môi trường khi nói chuyện, ho, hắt hơi và cả qua da. Tình trạng ô nhiễm nước ở các hồ chứa, bể bơi xảy ra khi người dân tắm, trong khi ở bể bơi số lượng tụ cầu khuẩn có thể lên tới hàng chục nghìn trong 1 lít nước. Sự lây lan của tụ cầu khuẩn trong môi trường có liên quan chặt chẽ đến vấn đề nhiễm trùng bệnh viện có tính chất tụ cầu, có liên quan đến việc truyền tụ cầu khuẩn gây bệnh ở người, đặc biệt là ở nhân viên y tế. Tất cả điều này cho phép chúng ta phân loại tụ cầu khuẩn là vi khuẩn chỉ thị ô nhiễm không khí.

Staphylococci thuộc họ Họ Micrococcaceae gia đình Staphylococcus. Xem S. vàngđề cập đến mầm bệnh.

Là vi sinh vật chỉ thị vệ sinh, tụ cầu có một số đặc điểm:

Chúng rất khiêm tốn đối với môi trường dinh dưỡng; các phương pháp phát hiện chúng trong môi trường đơn giản hơn, ví dụ như đối với streptococci.
Staphylococci có sức đề kháng đáng kể với các yếu tố vật lý và hóa học khác nhau. Dựa trên khả năng kháng thuốc khử trùng của tụ cầu (đặc biệt là các chế phẩm clo), người ta đề xuất sử dụng chúng làm SPM để xử lý ô nhiễm nước ở các khu vực giải trí của các vùng nước (bao gồm cả nước biển) và bể bơi.
Chúng là một chỉ số khách quan về ô nhiễm không khí trong nhà, vì có mối tương quan giữa điều kiện vệ sinh và vệ sinh của cơ sở, số người trong đó, số lượng người mang vi khuẩn tụ cầu gây bệnh và hàm lượng tụ cầu khuẩn trong không khí.

Giống vi khuẩn liên cầu khuẩn

Streptococci, giống như staphylococci, là cư dân của đường hô hấp trên của con người và nhiều động vật. Chúng hiện diện liên tục và với số lượng lớn trong khoang miệng và vòm họng của bệnh nhân bị nhiễm liên cầu khuẩn mãn tính ở đường hô hấp trên, cũng như những người khỏe mạnh, và do đó có thể xâm nhập vào không khí trong nhà với khí dung vi khuẩn khi nói chuyện và ho.

Khó khăn chính trong việc sử dụng streptococci làm vi sinh vật chỉ thị vệ sinh là streptococci đại diện cho một nhóm lớn bao gồm một số lượng lớn các loài: từ hoại sinh đến streptococci gây bệnh gây ra các bệnh như sốt đỏ tươi, hồng cầu, nhiễm trùng huyết và nhiều quá trình viêm mủ.

Streptococci thuộc họ Streptococcaceae, gia đình Streptococcus. Xem S.pyogenes có tầm quan trọng lớn nhất trong bệnh lý con người .

Trong môi trường, liên cầu khuẩn được thể hiện chủ yếu là liên cầu khuẩn tan huyết α (chúng không tiêu diệt hoàn toàn hồng cầu, tạo thành các vùng màu xanh lục xung quanh khuẩn lạc). Điều này là do gần 100% người khỏe mạnh đều có liên cầu khuẩn tan máu α trên bề mặt amidan, trong khi liên cầu khuẩn tan máu β (gây ly giải hồng cầu và hình thành vùng tan máu) chỉ được tìm thấy ở 25-75 người. % Người ta thường chấp nhận rằng nên xem xét các vi khuẩn không khí vệ sinh chỉ định bao gồm liên cầu khuẩn tan huyết α và β.

Đặc điểm của streptococci như SPM:

Streptococci không ổn định lắm trong môi trường, chúng chỉ có thể tồn tại vài ngày trong bụi phòng, trên khăn trải giường, đồ dùng gia đình của người bệnh. Tuy nhiên, thời gian bảo tồn khả năng tồn tại của chúng gần bằng tuổi thọ của một số vi khuẩn gây bệnh xâm nhập vào môi trường qua các giọt nhỏ trong không khí (ví dụ như tác nhân gây bệnh bạch hầu, v.v.)
Một chỉ số về tình trạng ô nhiễm không khí trong nhà gần đây là liên cầu khuẩn tan huyết α là loại ít kháng thuốc nhất. Streptococci không được tìm thấy trong không khí của những nơi không có con người sinh sống.
Các phương pháp chỉ định và xác định streptococci phức tạp hơn và tốn nhiều công sức hơn so với phương pháp staphylococci.

chất ưa nhiệt

Một vị trí đặc biệt trong số các SPM bị chiếm giữ bởi các vi khuẩn ưa nhiệt, sự hiện diện của chúng trong đất hoặc nước của các hồ chứa cho thấy chúng bị nhiễm phân, phân hữu cơ hoặc phân người bị phân hủy.

Các vi sinh vật ưa nhiệt bao gồm vi khuẩn gram dương, cầu khuẩn, trực khuẩn, tảo xoắn, xạ khuẩn và một số loại nấm có khả năng sinh sản tích cực ở nhiệt độ 60 0 C trở lên. Hầu hết các vi khuẩn ưa nhiệt đều là vi khuẩn hiếu khí.

Các vi sinh vật ưa nhiệt sinh sôi trong đống phân trộn và phân chuồng, trong đó, do hoạt động sống còn của chúng, các lớp bề mặt được làm nóng đến 60-70 0 C. Trong điều kiện như vậy, quá trình trung hòa nhiệt sinh học của các khối hữu cơ tự phát nhiệt diễn ra, các vi sinh vật gây bệnh và E. coli chết.

Do đó, sự hiện diện của vi khuẩn ưa nhiệt cho thấy đất bị ô nhiễm lâu dài bởi phân hữu cơ, trong khi vi khuẩn coliform (OCB) được phát hiện với số lượng không đáng kể. Và ngược lại, hàm lượng vi khuẩn coliform (OCB) cao với số lượng nhỏ vi khuẩn ưa nhiệt là dấu hiệu của ô nhiễm phân tươi.

Vi sinh vật ưa nhiệt cũng đóng vai trò là vi sinh vật chỉ thị vệ sinh để mô tả các giai đoạn riêng lẻ của quá trình khoáng hóa chất thải hữu cơ.

Phân tích thuốc thuộc nhóm benzensulfonylamide

Phân tích thuốc thuộc nhóm benzensulfonylamide. Trong phòng thí nghiệm kiểm soát và phân tích, hàm lượng sulfadimethoxine trong viên nén được xác định bằng phương pháp đo nitrat

Phân tích các thuốc thuộc nhóm muối của axit cacboxylic béo và axit hydroxy, axit ascorbic, axit amin béo và các dẫn xuất của chúng