Koliform bakterileri, hayvanların ve insanların sindirim sisteminde ve bunların atık ürünlerinde her zaman bulunur. Çeşitli patojenlerin neden olduğu hastalık bulaşma olasılığı nedeniyle kirlenmenin ciddi bir sorun olduğu bitkilerde, toprakta ve suda da bulunabilirler.
Vücuda zarar
Koliform bakteriler zararlı mıdır? Çoğu hastalığa neden olmaz, ancak bazı nadir E. coli türleri ciddi hastalıklara neden olabilir. İnsanların yanı sıra koyun ve sığırlar da enfekte olabilir. Kirlenmiş suyun dış özellikleri bakımından tat, koku ve görünüm bakımından sıradan içme suyundan farklı olmaması endişe vericidir. Koliform bakterileri her anlamda kusursuz sayılan ortamlarda bile bulunur. Test, patojenik bakterilerin varlığını öğrenmenin tek güvenilir yoludur.
Tespit edildiğinde ne olur?
İçme suyunda koliform veya başka bir bakteri bulunursa ne yapmalısınız? Bu durumda su temin sisteminde onarım veya değişiklik yapılması gerekli olacaktır. Dezenfeksiyon için kullanıldığında, kaynatmanın yanı sıra, ısıya dayanıklı koliform bakteri olması durumunda kontaminasyonun ortadan kaldırılmadığını doğrulayabilecek tekrarlanan testler de gereklidir.
Gösterge organizmaları
Yaygın koliform bakterilere genellikle gösterge organizmalar denir çünkü bunlar, E. coli gibi suda hastalığa neden olan bakterilerin potansiyel varlığını gösterir. Türlerin çoğu zararsız olmasına ve sağlıklı insanların ve hayvanların bağırsaklarında yaşamasına rağmen, bazıları toksin üretebilir, ciddi hastalıklara neden olabilir ve hatta ölümcül olabilir. Vücutta patojen bakteriler mevcutsa en sık görülen semptomlar mide-bağırsak rahatsızlığı, ateş, karın ağrısı ve ishaldir. Belirtiler çocuklarda ve yaşlı aile bireylerinde daha belirgindir.
Güvenli su
Suda yaygın koliform bakteri yoksa, mikrobiyolojik olarak içme için güvenli olduğu neredeyse kesin olarak varsayılabilir.
Eğer tespit edilirlerse, ek testler haklı gösterilecektir.
Bakteriler sıcaklığı ve nemi sever
Sıcaklık ve hava koşulları da önemli bir rol oynar. Örneğin E. coli dünya yüzeyinde yaşamayı tercih ettiğinden ve sıcaklığı sevdiğinden, sıcak ve nemli hava koşullarında yer altı derelerinde hareket sonucu içme suyunda koliform bakteriler ortaya çıkarken, en az miktarda bakteri bulunacaktır. kış mevsiminde.
Şok klorlama
Bakterileri etkili bir şekilde öldürmek için tüm yabancı maddeleri oksitleyen klor kullanılır. Miktarı pH seviyesi ve sıcaklık gibi su özelliklerinden etkilenecektir. Ortalama olarak litre başına ağırlık yaklaşık 0,3-0,5 miligramdır. İçme suyundaki yaygın koliform bakterileri öldürmek yaklaşık 30 dakika sürer. Klor dozunun arttırılmasıyla temas süresi kısaltılabilir ancak bu, belirli tat ve kokuların giderilmesi için ek filtreler gerektirebilir.
Zararlı ultraviyole ışık
Ultraviyole ışınları popüler bir dezenfeksiyon seçeneği olarak kabul edilir. Bu yöntem herhangi bir kimyasal bileşiğin kullanımını içermez. Ancak toplam koliform bakteri sayısının 100 ml suda bin koloniyi aşması durumunda bu ilaç kullanılmaz. Cihazın kendisi, içinden ultraviyole ışıkla ışınlanan bir sıvının aktığı kuvars cam bir manşonla çevrelenmiş bir UV lambasından oluşur. Cihazın içindeki arıtılmamış su, tüm zararlı organizmalara maruz kalabilmesi için tamamen temiz olmalı ve görünür kirletici maddelerden, tıkanıklıklardan veya bulanıklıktan arınmış olmalıdır.
Diğer temizleme seçenekleri
Suyu dezenfekte etmek için kullanılan birçok başka tedavi vardır. Ancak çeşitli nedenlerden dolayı uzun süreli kullanımları önerilmez.
- Kaynama. Bir dakika boyunca 100 santigrat derecede bakteriler etkili bir şekilde öldürülür. Bu yöntem genellikle acil durumlarda veya gerektiğinde suyu dezenfekte etmek için kullanılır. Bu, zaman alıcı ve enerji yoğun bir işlemdir ve genellikle yalnızca küçük miktarlarda suda kullanılır. Bu, su dezenfeksiyonu için uzun vadeli veya kalıcı bir seçenek değildir.
- Ozonlama. Son yıllarda bu yöntem, su kalitesini iyileştirmenin ve bakteriyel kontaminasyon dahil çeşitli sorunları ortadan kaldırmanın bir yolu olarak kullanılıyor. Klor gibi ozon da bakterileri öldüren güçlü bir oksitleyici maddedir. Ancak aynı zamanda bu gaz kararsızdır ve yalnızca elektrik kullanılarak elde edilebilir. Ozonlama üniteleri, klorlama veya ultraviyole sistemlerden çok daha pahalı olduğundan dezenfeksiyon için genellikle önerilmez.
- İyotlama. Bir zamanlar popüler olan dezenfeksiyon yöntemi, son zamanlarda yalnızca kısa süreli veya acil su dezenfeksiyonu için öneriliyor.
Termotolerant koliform bakteriler
Bu, laktozu 44-45 santigrat derecede fermente edebilen özel bir canlı organizma grubudur. Bunlar arasında Escherichia cinsi ve bazı Klebsiella, Enterobacter ve Citrobacter türleri bulunmaktadır. Suda yabancı organizmalar mevcutsa bu, suyun yeterince arıtılmadığını, yeniden kirlendiğini veya çok fazla besin maddesi içerdiğini gösterir. Tespit edilirse yüksek sıcaklıklara dayanıklı koliform bakterilerin varlığının kontrol edilmesi gerekir.
Mikrobiyolojik analiz
Koliformların tespit edilmesi suya karıştıklarının göstergesi olabilir ve böylece çeşitli hastalıklar yayılmaya başlar. Kirlenmiş içme suyunda salmonella, shigella, E. coli ve hafif sindirim sistemi bozukluklarından şiddetli dizanteri, kolera, tifo ve diğer birçok hastalığa kadar değişen birçok patojen türü bulabilirsiniz.
Evdeki enfeksiyon kaynakları
İçme suyunun kalitesi uzman sıhhi hizmetler tarafından izlenmekte ve düzenli olarak kontrol edilmektedir. Sıradan bir insan kendisini ve istenmeyen enfeksiyonlardan korunmak için ne yapabilir? Ev koşullarında su kirliliğinin kaynakları nelerdir?
- Soğutucudan su. Bu cihaza ne kadar çok kişi dokunursa zararlı bakterilerin girme olasılığı da o kadar artar. Araştırmalar, her üç soğutucudan birinin suyunun canlı organizmalarla dolu olduğunu gösteriyor.
- Yağmur suyu. Şaşırtıcı bir şekilde yağmurdan sonra toplanan nem, koliform bakterilerin gelişimi için uygun bir ortamdır. Gelişmiş bahçıvanlar bu suyu bitkileri sulamak için bile kullanmazlar.
- Durgun sularda sadece bakteriler değil tüm canlı organizmalar daha hızlı çoğaldığı için göller ve rezervuarlar da risk grubu olarak değerlendirilmektedir. Bunun bir istisnası, zararlı formların gelişiminin ve yayılmasının minimum düzeyde olduğu okyanuslardır.
- Boru hattı durumu. Drenaj borularının uzun süre değiştirilmemesi veya temizlenmemesi durumunda bu da sorunlara yol açabilir.
Escherichia coli grubunun bakterileri (koliformlar), sıhhi mikrobiyoloji tarafından dışkı kontaminasyonunun bir belirteci olarak kullanılan, morfolojik ve kültürel özelliklerle şartlı olarak ayırt edilen Enterobacteriaceae familyasından bir bakteri grubudur; bunlar sözde sıhhi gösterge mikroorganizmaları grubuna aittir; .
E. coli grubunun bakterileri, Enterobacteriaceae familyasında birleştirilen Escherichia (E. coli dahil), Citrobacter (C. coli citrovorum'un tipik bir temsilcisi), Enterobacter (E. aerogenes'in tipik bir temsilcisi) cinsinin temsilcilerini içerir. ortak morfolojik ve kültürel özelliklerden dolayı. Farklı enzimatik özellikler ve antijenik yapı ile karakterize edilirler.
4. Hangi bakterilerin varlığı suyun taze fekal kontaminasyonunu gösterir?
Bu bakteriler, laktozu 44°C sıcaklıkta 24 saat boyunca asit ve gaza fermente eden ve nitrat ortamında çoğalmayan, ısıya dayanıklı koliform bakterileri ve fekal koliformları içerir.
Enterokok tespiti aynı zamanda taze dışkı kontaminasyonunu da gösterir.
Taze dışkı kontaminasyonunun belirlenmesi için enterokokların test suyundan izole edilmesini içeren bilinen bir yöntem vardır ve bu mikroorganizmaların indeksi 500'ün üzerinde olduğunda taze dışkı kontaminasyonunun geldiği varsayılır.
5. Suyun sıhhi-mikrobiyolojik testleri sırasında hangi göstergeler belirlenir?
1. Saprofitik mikroorganizmaların sayısının belirlenmesi.
2 . Laktoz pozitif Escherichia coli sayısının belirlenmesi.
3 . Escherichia coli sayısının belirlenmesi.
4. Enterokok sayısının belirlenmesi.
5 . Stafilokok sayısının belirlenmesi.
6 . E. koli fajlarının PFU sayısının belirlenmesi.
7 . Salmonella ve Shigella cinsi bakterilerin belirlenmesi.
8 . Bağırsak virüslerinin varlığının belirlenmesi.
9 . Vibrio cholerae'nin tanımı.
6. “Mikrop sayısı” nedir ve nasıl belirlenir?
Mikrobiyal sayı, laboratuvar sıhhi ve hijyenik göstergelerinden biri olan, 1 ml su, 1 g katı ürün veya toprak, 1 m3 hava, MPA'da 37°C'de 48 saatte büyütüldü
Mikrobiyal sayıyı belirlemek için MPA'lı Petri kaplarına asepsi kurallarına uygun olarak dökme yöntemi kullanılarak kaplarda 30 ila 300 koloni gelişecek şekilde aşılama yapılır.
7. Sudaki koliformları tespit etmek için hangi yöntem kullanılır?
Koliform bakteri sayısını belirlemek için iki yöntem vardır: fermantasyon ve membran filtreler.
Membran filtre yönteminin özü, belirli bir hacimdeki test suyundaki bakterileri bir membran filtre üzerinde konsantre ederek Endo ortamında 37 ± 0,5 °C sıcaklıkta büyütmektir. Bu sıcaklık bakterilerin büyümesi için en uygun koşulları yaratır.
8. Koch ve Krotov yöntemleri hangi amaçlarla kullanılıyor?
Koch ve Krotov yöntemleri havanın sıhhi ve mikrobiyolojik muayenesinde kullanılır.
9. Havadaki varlığıyla saflığının değerlendirilebileceği sıhhi gösterge mikroorganizmalarını adlandırın?
Hava için sıhhi indikatör mikroorganizmalar Staphylococcus aureus ve hemolitik streptokoklardır (Staphylococcus aureus, grup Streptococcus viridans ve Streptococcus haemolyticus).
10. Aspirasyon yöntemi nedir ve hangi amaçla kullanılır?
Aspirasyon yöntemi, mikroorganizmaların yoğun bir besin ortamının yüzeyine veya tutucu bir sıvıya zorla yerleşmesine dayanır. Bu amaçla Krotov aparatı, Rechmensky bakteri tuzağı, POV-1 cihazı vb. kullanılmaktadır.
Toplam bakteri sayısını belirlemek için her biri 100 litrelik iki numune alınır. Mahsuller 24 saat boyunca bir termostatta kuluçkalanır ve daha sonra 48 saat boyunca oda sıcaklığında bırakılır. Bulaşıklardaki kolonilerin sayısı sayılır, aritmetik ortalama hesaplanır ve 1 m3 havadaki mikroorganizma sayısına göre yeniden hesaplanır.
Hava testi, insan nazofarenksinin mikroflorası tarafından havanın biyolojik olarak kirlenmesinin göstergeleri olan saprofitik bakterilerin, stafilokokların, streptokokların toplam sayısının belirlenmesini içerir.
11. Koliform hangi besiyerinde kültürlenir?
Endo ortamında, basit besin ortamlarında: et-pepton suyu (MPB), et-pepton agar (MPA).
12. Eczane tesislerinde sıhhi ve mikrobiyolojik kontrol sırasında hangi nesneler ve eşyalar incelemeye tabidir?
Sıhhi ve mikrobiyolojik kontrol sırasında eczanelerde bakteriyolojik araştırmanın amaçları:
1 . Damıtılmış su.
2 . Sterilizasyondan önce enjeksiyon çözümleri.
3 . Sterilizasyondan sonra enjeksiyon solüsyonları.
4 . Sterilizasyondan sonra göz damlası.
5 . Steril bazlarda aseptik koşullar altında hazırlanan göz damlaları.
6 . Enjeksiyon solüsyonlarının hazırlanmasında kullanılan kuru tıbbi maddeler.
7. Farmasötik cam eşyalar, tıpalar, contalar ve diğer yardımcı malzemeler.
8. Personel için envanter, ekipman, eller ve hijyenik giysiler.
9 . Hava ortamı.
Ana sıhhi gösterge mikroorganizmaları, Enterobacteriaceae familyasının üyeleri olan Escherichia, Citrobacter, Enterobacter olmak üzere 3 mikroorganizma cinsini birleştiren koliform grubunun (koliformlar) bakterileridir. Birçok ortak morfolojik, kültürel ve enzimatik özelliği paylaşırlar.
GOST 2874-82 ve GOST 18963-73'e göre koliformlar, oksidaz aktivitesi olmayan küçük, hareketli, gram negatif, spor oluşturmayan çubukları içerir; laktoz fermentasyonu ve 37 ° C sıcaklıkta (5-24 saat içinde) asit ve gaz oluşumu ile glikoz (Şekil 45).
Escherichia coli (koliform bakteriler), evrensel besin ortamlarında iyi üreyen ve birçok anilin boyasına dirençli fakültatif anaeroblardır. Sınıflandırmalarını zorlaştıran çeşitli değişkenlerin ortaya çıkmasının bir sonucu olarak geniş uyarlanabilir değişkenlik ile karakterize edilirler.
Coli grubunun tüm bakterileri arasında Escherichia cinsinin mikroorganizmaları en büyük sıhhi ve gösterge niteliğinde öneme sahiptir.
Koliformlar, 37°C sıcaklıkta laktozu parçalama yeteneklerine göre, uluslararası standartlara göre standardize edilmiş, laktoz negatif ve laktoz pozitif Escherichia coli (LKP) veya koliform olarak ikiye ayrılır. LCP gruplarından, 44,5 °C sıcaklıkta laktozu fermente edebilen fekal koliformlar (FEC) izole edilir. Bunlara sitrat ortamında büyümeyen E. coli de dahildir.
Koliform bakterileri ayırt etmek için, üzerinde E. coli'nin metalik parlaklığa sahip kırmızı koloniler şeklinde karakteristik bir büyüme ürettiği Endo ortamı kullanılır.
Endo ortamı enterobakteriler için seçici bir ortamdır ve kuru formda mevcuttur. MPA, laktoz, bazik fuksin, sodyum sülfat ve fosfat içerir.
Besiyerinin hazırlanması: 5 g kuru besiyerini 100 cm3 damıtılmış suda çözün, sürekli karıştırarak kaynatın.
Pirinç. 45.Escherichia coli: A- koloniler; B– hücreler
2-3 dakika sonra Petri kaplarına dökün. Büyük miktarlarda yoğuşma oluşumunu önlemek için ortam kaynatıldıktan sonra 50 °C'ye soğutulur. Hazırlanan besiyeri pembe renklidir. Laktoz pozitif suşların kolonileri kırmızıdır (elde edilen laktik asit, sodyum sülfatla reaksiyona girerek fuksinin rengini geri kazanmasına neden olur), laktoz negatif suşların kolonileri ise renksiz veya hafif pembedir.
Koliformlar sıvı besin ortamında (LMM) büyüdüğünde, ortamın önemli ölçüde bulanıklığı ve grimsi, kolayca kırılabilen bir çökeltinin oluşumu gözlenir. Et suyunun yüzeyinde genellikle bir film oluşmaz.
MPA'da koliformlar orta büyüklükte, yuvarlak, pürüzsüz, parlak, yarı saydam koloniler oluşturur.
E. coli jelatini sıvılaştırmaz ve asit ve gaz oluşumuyla bir dizi karbonhidratı (laktoz, glikoz, maltoz, sükroz) fermente edebilir. Enzimatik özellikler (karbonhidratların fermantasyonu) değişkendir, bu nedenle koliformları ayırt ederken bağımsız olarak değil, diğer testlerle birlikte dikkate alınırlar.
Sütte koliform bakteriler iyi çoğalır, asitliğini 60-80 °T'ye getirir ve içinde düzensiz süngerimsi bir pıhtı oluşturur. Laktik asit bakterilerinin varlığında salgıladıkları antibiyotik maddelerin ve asidin etkisi altında E. coli'nin büyümesi engellenir. Süt endüstrisinde benimsenen pastörizasyon rejimleri altında E. coli öldürülür. Genel olarak kabul edilen seyreltmelerdeki geleneksel dezenfektanlar, ekipmanı bu bakterilerden dezenfekte eder.
Koliform grubundan tek tek bakteri cinslerinin sıhhi gösterge önemi farklılık gösterir. Gıda ürünleri, su, toprak ve ekipmanlarda Escherichia cinsi bakterilerin tespiti, bu nesnelerin taze dışkı ile kontaminasyonunu gösterir ki bu da büyük sıhhi ve epidemiyolojik öneme sahiptir.
Bazen Citrobacter ve Enterobacter cinsi bakterilerin dış ortamda bulunduktan sonra Escherichia'yı değiştirdiğine inanılmaktadır. Sonuç olarak, Citrobacter ve Enterobacter daha eski (birkaç haftalık) dışkı kontaminasyonunun göstergeleridir ve bu nedenle Escherichia cinsi bakterilerle karşılaştırıldığında daha az sıhhi değere sahiptir.
Koliform bakterilerin farklılaşması, mikroorganizmaların fizyolojik özelliklerindeki farklılıklar dikkate alınarak gerçekleştirilir. Bu temelde, esas olarak TIMATS (TLIMATS) işaret kompleksi olan dışkı ve dışkı dışı Escherichia coli'yi tanımak için kullanılan özel testler geliştirilmiştir:
T - sıcaklık testi;
I - indol oluşumu testi;
M - metilen kırmızısı ile reaksiyon;
A - asetilmetilkarbinole reaksiyon (Voges-Proskauer reaksiyonu);
C - sitrat testi;
L - laktoz fermantasyonu.
Sıcaklık testi(Eijkman testi) - 44-46 ° C'lik (genellikle 44,5 ° C) bir sıcaklıkta gaz oluşumu ile glikozu ve diğer karbonhidratları (laktoz, mannitol) fermente etme yeteneği. Escherichia için sıcaklık testi pozitiftir; Citrobacter ve Enterobacter cinslerinin temsilcileri bu yeteneğe sahip değildir. Bu test Eikman, Kessler, Boulizh özel ortamlarında belirlenir.
Eijkman ortamı (glikoz-pepton ortamı): pepton - 10 g; sodyum klorür - 5 g, glikoz - 5 g; musluk suyu 1.000 cm3. Konsantre bir ortamda su dışındaki tüm bileşenlerin bileşimi 10 kat arttırılır. Ortam, test tüplerine veya fermantasyon tüpleri (gaz tüpleri) içeren şişelere dökülür, 3 gün boyunca 30 dakika boyunca akan buharla sterilize edilir (112°C-15 dakika arasında bir otoklavda sterilizasyona izin verilir).
İndol oluşumu testi- birçok proteinin bir parçası olan amino asit triptofanı parçalama yeteneği, paradimetilamidobenzaldehit içeren reaktiflerle etkileşime girdiğinde ortamı kırmızıya çeviren indol dahil olmak üzere bir dizi ürünü serbest bırakma yeteneği. İndol, Escherichia tarafından üretilir, Citrobacter ve Enterobacter cinsinden bakteriler indol üretmez. İndolün varlığı, eski et suyu kültürlerinde (tercihen %200-300 mg triptofan içeren Hottinger et suyu içinde) Ehrlich reaktifi kullanılarak belirlenir.
Ehrlich reaktifi: paradimetilamidobenzaldehit - 4 g; 96° etil alkol - 380 cm3; konsantre hidroklorik (hidroklorik) asit - 80 cm3. Kültüre (0,5-1 cm3) Ehrlich reaktifini eklemeden önce, 0,5-1 cm3 hidroklorik asit eter ekleyin (indolü ekstrakte etmek için).
E. coli'nin başlatıcı kültürlerle sütte geliştirildikten sonra biyokimyasal özellikleri üzerine yapılan çalışmalar, indol özelliğinde değişkenlik olduğunu göstermiştir; E. coli suşlarının %36'sı indol üretme yeteneğini kaybedebilir. Bu nedenle fermente süt ürünlerinin takibinde bu özelliğin kullanılması hatalı sonuçlara yol açabilir.
Metil kırmızısı ile reaksiyon(Clark reaksiyonu), bir besin ortamında glikozun fermantasyonu sırasında asit oluşumunun yoğunluğunu belirlemektir. Metil kırmızısı bir gösterge olarak kullanılır ve Clark besiyerinde yetiştirilen 3-5 günlük bir kültüre birkaç damla eklenir. PH 5 ve altında gösterge açık sarıdan kırmızıya döner, bu da yoğun asit oluşumunu gösterir. Escherichia ve Citrobacter cinslerinin temsilcileri besiyerine kırmızı renk verir ve Enterobacter sarı renk verir.
5'in üzerindeki pH'ta ortam açık sarı kalır.
Clark ortamı: proteoz (veya başka bir pepton) - 5 g; dekstroz - 5 g; K2NPO4 - 5 g; 800 cm3'e kadar damıtılmış su. Karışım ara sıra karıştırılarak 20 dakika ısıtılır, süzülür, soğutulur ve hacim damıtılmış su ile 1000 cm3'e ayarlanır. 10 cm3'lük tüplere dökün ve 121 °C'de 15 dakika sterilize edin.
Gösterge: metil kırmızısı - 0,1 g; etil alkol 300 cm3. İndikatörü çözdükten sonra 200 cm3 damıtılmış su ekleyin.
Asetilmetilkarbinole reaksiyon(Voges-Proskauer, 1898), mikroorganizmaların glikoz içeren bir ortamda aromatik madde asetilmetilkarbinol (asetoin) oluşturma yeteneğini ortaya koymaktadır.
Reaksiyonu hazırlamak için, aynı hacimde %40 KOH çözeltisi, glukoz veya Clark ortamı ile pepton ortamı üzerinde büyütülen 4-5 günlük bir kültürün 5 cm3'üne eklenir. Reaksiyonu hızlandırmak için 100 cm3 alkaliye 0,3 g kreatin [CMeaga reaktifi (Mira)] eklenir. Asetilmetil karbinolün varlığında ortam pembeye döner.
Asetilmetilkarbinol (asetoin), Enterobacter cinsinin bakterileri tarafından üretilir. Escherichia ve Citrobacter cinsinin temsilcileri bu yeteneğe sahip değildir.
Sitrat testi- Mikroorganizmaların asimile olma yeteneği. Tek karbon kaynağı olarak sitrik asit veya tuzları. İncelenen kültür sitrat sentetik Coser ortamına veya katı Simmons ortamına ekilir.
Citrobacter ve Enterobacter cinsi bakteriler sitrat besiyerinde büyür (sıvı besiyerinde bulanıklık ve renk bozulmasına ve katı besiyerinde spesifik kolonilerin oluşmasına neden olur) ve denir. sitrat pozitif veya sitrat asimile edici bakteriler , oysa Escherichia bu ortamlarda büyümez ve denir sitrat negatif .
Coser sitrat sentetik ortamı: MgS04 x 7H20 - 0,2 g; NH4H2P04 - 1,5 g; K2NRO 4 - 1 g; sodyum sitrat x 5 H20 - 2,53 g; damıtılmış su - 1.000 cm3 Ortamın reaksiyonundaki değişiklikleri belirlemek için, 10 cm3 %0,5 alkol bromotimol mavisi çözeltisi ekleyin.
Simmons ortamı: Coser ortamına %2 agar ekleyin, pH'ı 7,2-7,4'e ayarlayın ve 112 °C'de otoklavda 15 dakika sterilize edin. İndikatör sterilizasyondan sonra steril tüplere dökülmeden önce eklenir. Ortam zeytin yeşili rengindedir.
Fermente süt ürünlerinde sitrat negatif Escherichia içeriğini belirlerken, Enterobacter cinsinin sitratları kullanma yeteneğini kaybetmiş temsilcilerinin ek olarak dikkate alınması nedeniyle şişirilmiş sonuçlar elde edilebilir.
Enterococcus faecalis sitratları metabolize ettiğinden ve sitrat pozitif Escherichia coli ile karıştırılabileceğinden sitrat testine örneklerin mikroskopisi eşlik etmelidir.
Laktoz fermantasyonu Enterobacteriaceae familyasının çoğu türünde ortaktır. Escherichia cinsinin temsilcileri (laktoz negatif varyantlar hariç) laktozu fermente eder; Citrobacter ve Enterobacter, laktozu tutarsız bir şekilde fermente eder. Mikroorganizmaların laktozu fermente etme yeteneği, çeşitli göstergelerle (Endo ortamı, Hiss ortamı, vb.) Özel laktoz içeren ortamlarda incelenir.
Çoğu zaman E. coli'de TIMAC (TLIMAC) kompleksinin atipik belirtileri bulunabilir ve bu da onların ayırt edilmesini zorlaştırır. Bu, dış ortamda E. coli'nin çeşitli faktörlere maruz kalması ve bunun sonucunda bir takım biyolojik özelliklerinin değişmesiyle açıklanmaktadır. Örneğin, E. coli dış ortamda bulunduktan sonra laktozu fermente etme, karbonhidratları 43 ° C'de ve hatta 37 ° C'de fermente etme yeteneğini kaybeder, ancak sitratları asimile etme (sindirme) yeteneği kazanır.
Antibiyotiklerin ve diğer tıbbi ilaçların uzun süreli kullanımıyla birlikte insan bağırsağında Escherichia'nın laktoz negatif varyantları da bulunur.
TIMAC belirtileri kompleksinde ana olanlar sıcaklık ve sitrat testleridir. Dışkı kökenli koliform bakterilerini dış ortamda yaşayan koliformlardan ayırmayı mümkün kılan en stabil olanlardır.
En büyük sıhhi ve gösterge önemi, Coser ortamında sitratlarla (karbon beslenmesinin tek kaynağı olarak) büyümeyen ve karbonhidratları 43-45 ° C'de (E. coli) fermente eden E. coli'dir. Bunlar taze dışkı kontaminasyonunun göstergeleridir.
Süt endüstrisinde koliform bakterileri hijyenik indikatör mikroorganizmalar olarak tanımlanır, Kessler besiyerine aşılanır ve 37 °C'de 24 saat kültüre edilir.
Modifiye Kessler ortamının hazırlanması: 16 g kuru Kessler ortamı bir şişeye konulur ve 1.000 cm3'e kadar içme suyuyla tamamlanır. Karışım 25 dakika karıştırılarak kaynatılır. Hacim içme suyu ile 1.000 cm3'e getirilip pamuktan süzülür. 5 cm3 şamandıralı test tüplerine veya 40-50 cm3 şamandıralı konilere dökün ve 12 °C'de 10 dakika sterilize edin. Ortam koyu mor renktedir.
Kessler ortamını tek tek bileşenlerden hazırlamak mümkündür.
Bunu yapmak için, 1000 cm3 içme suyuna 10 g pepton ve 50 cm3 steril safra (büyükbaş hayvan veya diğer çiftlik hayvanı safrası) ekleyin, karışımı 25 dakika karıştırarak kaynatın ve pamuk yünden süzün. Elde edilen süzüntüde 2,5 g laktoz eritilir ve içme suyuyla hacim 1000 cm3'e ayarlanır, pH 7,4-7,6'ya ayarlanır, ardından kütle konsantrasyonu 10 g/ olan 2 cm3 kristal mor çözelti dm3 eklenir, şamandıralı test tüplerine veya 40-50 cm3 şamandıralı şişelere dökülür ve 121 ° C'de 10 dakika sterilize edilir. Hazırlanan besiyeri koyu mor renkte olmalıdır.
Gıda ürünleri ve diğer çevresel nesnelerin sıhhi gösterge mikroorganizmaların mevcudiyeti açısından sıhhi değerlendirme kriterleri, koliform bakterilerin ürünün belirli miktarlarında tespit edilmemesi gerektiğini belirten GOST'ler ve Sıhhi Kurallar ve Normlar tarafından sağlanır; ürün birimi başına sıhhi gösterge mikroorganizmaların sayısı standartlaştırılmıştır. Yani örneğin pastörize sütte E. coli 1 cm3'te tespit edilmemeli, sıvı kefir mayasında E. coli bakterisine 3 cm3, ekşi krema ve süzme peynirde - 0,001 cm3 (g), vesaire.
ENTEROKOKLAR
Enterokokların taksonomisi ve biyolojik özellikleri Bölüm 10'da sunulmaktadır.
Enterokoklar, koliform bakterilerle birlikte insanların ve sıcakkanlı hayvanların bağırsaklarının kalıcı sakinleridir; büyük miktarlarda dış ortama salınırlar ve bunların gıda ürünleri, su ve toprakta tespit edilmesi, bu nesnelerin dışkıyla kontamine olduğunu gösterir.
Enterokokların hijyenik indikatör mikroplar olarak avantajları, fiziksel ve kimyasal etkilere karşı daha fazla direnç göstermeleri, aşırı derecede kontamine olmuş nesnelerde enterokokların tespit edilmesini mümkün kılan seçici ortamların varlığı, bunları benzer türlerden ayırmanın kolaylığı ve enterokoklar arasındaki bazı farklılıklardır. Epidemiyolojik açıdan önemli bir öneme sahip olan insan ve hayvan kökenlidir.
Ent'in olduğu tespit edilmiştir. faecalis ve çeşitleri, Ent. dışkı. Ent sığır, domuz, koyun ve atların bağırsak içeriğinde baskındır. dışkı. Dış ortamda algılama Ent. faecalis ve çeşitleri, bir nesnenin insan dışkısıyla kontaminasyonunun bir göstergesi olarak belirli bir sıhhi ve epidemiyolojik öneme sahiptir; tespit Ent. faecium hayvan dışkısından kaynaklanan kontaminasyonun bir göstergesidir.
Enterokokların hijyenik indikatör mikroorganizmalar olarak diğer avantajları, insan ve hayvanların (gıda hariç) bağırsakları dışında çoğalmamalarıdır; dış ortamda E. coli gibi derin değişikliklere uğramaz ve onlara kıyasla dış ortamda daha uzun süre kalır.
Saf kültürde enterokokların yabancı mikroflora ile yoğun şekilde kirlenmiş nesnelerden izole edilmesini mümkün kılan seçici besin ortamları vardır. Enterokokları belirlemek için genellikle Kalina'ya göre polimiksin içeren süt besiyeri kullanılır (bkz. Bölüm 10).
Enterokoklar düşük sıcaklıklara, ısıya, klorlamaya, yüksek şeker ve tuz konsantrasyonuna ve yüksek asitliğe karşı son derece dayanıklıdır. 30 dakika boyunca 60-56 °C'lik ısıtma sıcaklıklarına dayanabilirler (pastörizasyon modları enterokokları nötralize etmelidir), %6,5 NaCl, %40 safra varlığında, pH'ı 9,6-10 olan ortamlarda büyüyebilirler. Bu bakımdan depolamaya tabi olmayan ürünler için sıhhi durumun göstergesi koli grubu bakterilerdir ve uzun süre düşük sıcaklıklarda depolanan ürünler için enterokokların sıhhi gösterge mikroorganizmaları olarak tanımlanması daha iyidir. Bu, E. coli'nin enterokoklardan daha hızlı ölmesi ve bunların varlığının veya yokluğunun bu tür ürünlerin hijyenik durumunu yansıtmaması ile açıklanmaktadır.
Gıda ürünlerindeki enterokokların sayısı oldukça önemli sınırlar içinde değişmektedir - 1 g veya 1 cm3 başına 10 3'ten 10 6'ya kadar.
Isıl işleme tabi tutulan ürünlerde çok sayıda enterokok bulunması, düşük pastörizasyon verimliliğinin (rejimlerin ihlali), pastörizasyon sonrası kontaminasyonun veya enterokok gelişimi için uygun koşullar altında depolamanın göstergesidir.
Resmi belgelerde - Uluslararası İçme Suyu Çalışma Standardı, ABD'de kabul edilen İçme Suyu ve Atık Su Çalışma Standardı ve Avrupa Standardı - enterokoklar suyun sıhhi ve hijyenik kalitesinin ek bir göstergesi olarak kabul edilmektedir, ve Uluslararası Standart, atipik E. coli için su test edilirken enterokokların varlığının veya yokluğunun dışkı kontaminasyonunun değerlendirilmesinde belirleyici olduğunu vurgulamaktadır.
Ülkemizde enterokoklar, koliform bakterilerle birlikte, suyu teknolojik süreçte kullanılan açık rezervuarlardan, özellikle kuyulardan gelen suyun sıhhi değerlendirmesinde sıhhi indikatör mikroorganizmalar olarak kullanılmaktadır.
Enterokokların ayrıca içme suyunun klorlama kalitesini değerlendirirken, maden kaynaklarından gelen suyu ve yüksek konsantrasyonda tuz içeren gıda ürünlerini (et ürünleri) incelerken sıhhi gösterge mikroorganizmaları olarak kullanılması tavsiye edilir.
Sterilizasyondan önce. Hava, üst solunum yolu ve ağız boşluğundan giren Staphylococcus aureus içeriği ile değerlendirilir. Damlacık hava kirliliğinin bir göstergesi olarak kabul edilir. Belirli bir nesnenin hijyen sorunlarını yansıtan diğer mikroplar maya ve küf mantarları, Pseudomonas aeruginosa ve salmonelladır.
Genel ve sıcağa dayanıklı koliform bakteriler (100 ml sudan 3 numunede)
Su kalitesini belirlerken suyun belirlenen standartları karşılayıp karşılamadığını belirlemek için mevcut koliform bakteri miktarının hesaplanması gerekir. Pozitif koliform testlerini (varsayımsal, doğrulayıcı ve dışkı) saymak için (Çoklu fermantasyon tüpleri) kullanılır. Sayım yaparken, numunenin seri seyreltilmesiyle gerçekleştirilen test sonuçlarının istatistiksel olarak işlenmesine yönelik bir yöntem kullanılır. Örneğin NP 10, 100 ml suda 10 koliform bakteri olduğu anlamına gelir.
Çoğu durumda, bakteri sayısının restorasyonu çalışması, toplam ve dışkı koliform bakteri grupları üzerinde gerçekleştirildi. Aynı zamanda, koliform bakteri sayısının restorasyonunun sağlık açısından ne kadar tehlikeli olduğu sorusu açık kalmaktadır, çünkü farklı bakteri türleri farklı patojenik özelliklere sahiptir, ayrıca ne genel ne de dışkı koliform bakteri grupları tek patojenik mikrobiyolojik değildir. Su ortamında etkili olan faktörler.
Bu çalışmanın amacı, klorlu atık sudaki koliform bakterilerinin bu üç ana alt grubunun görünür geri kazanımı olgusunu araştırmaktı. Klorlu sularda bakterilerin geri kazanımı ve klorsuz sularda hayatta kalmaları gerçekleştirilmiştir. Klorlamadan sonra uzun süre boyunca bakterilerin yok edilmesinin doğal olandan önemli ölçüde farklı olmadığı durumlarda, özellikle atık su deşarj edildikten sonra insanlar tarafından hemen kullanılmazsa, klorlamanın uygulanabilirliği sorgulanabilir.
Sunulan veriler koliform bakteri içeriğindeki artışın istatistiksel olarak ne kadar anlamlı olduğunu göstermektedir. Tüm bakteri alt gruplarının içeriğinin arttığı, maksimum içeriğin dördüncü veya beşinci günde gözlendiği bulunmuştur (Tablo 13.5).
| Pirinç. 12.3. Biyolojik atık su arıtımı için tipik bir kurulumun şeması ve işleminin verimlilik derecesini belirlemek için yapılması gereken testler / - akış parametrelerinin belirlenmesi g - kaba yabancı maddeler 3 - kum tutucu 4 - birincil çökeltme tankı 5 - birincil çökeltme işleminden gelen tortu tanklar 5 - sıkıştırıcı 7 - çamur suyu 8 sıkıştırılmış çökelti 9 - vakum filtresi / O -filtrat - şartlandırma kimyasalları t - kek 13 - biyolojik arıtma ve çökeltme 14 - aktif çamur fazlası 5 - klorlama C - akış hızı 55 - askıda katı madde içeriği U55 - askıda katıların tutuşması kaybı - kuru kalıntı kolortları - dışkı koliform bakteri içeriği |
Dezenfeksiyon işleminin etkinliği, su kalitesinin göstergesi olan bir grup koliform bakterinin analizi ile belirlenir. Bakterilerin klorlamaya duyarlılığı iyi bilinirken, klorlamanın protozoa ve virüsler üzerindeki etkisi tam olarak açık değildir. Protozoon larvaları ve bağırsak virüsleri, koliformlara ve diğer bağırsak bakterilerine göre klora karşı daha dirençlidir. Ancak mevcut su arıtma uygulamalarının yetersiz olduğunu gösteren çok az kanıt bulunmaktadır. Viral veya protozoal enfeksiyonlar içeren su tüketimiyle ilişkili belgelenmiş herhangi bir hastalık salgını yaşanmamıştır.
Artık hemen hemen tüm eyaletler, hizmet verilen nüfusa bağlı olarak gereken test sayısıyla birlikte, arıtılmış suyun koliform testini zorunlu kılmaktadır. Dışkı koliform sayımı, düzenleyici açıdan genellikle gereksiz olmasına rağmen basittir ve duruma ilişkin ek bilgiler sağlayabilir. Bazen belirli bir kurulumla ilgili olarak, artık klor konsantrasyonu, bulanıklık, çözünmüş katı içeriği, nitratlar ve renk gibi belirli göstergeler için sınır değerler özel olarak belirlenir. Dağıtım sistemindeki artık klor konsantrasyonu, klorlamanın yeterli olup olmadığını belirlemek için ölçülür. Diğer laboratuvar testleri, kimyasal arıtmaların izlenmesi, dağıtım sistemi tesislerinde meydana gelen bazı sorunların belirlenmesi ve düzeltilmesi ve su kalitesiyle ilgili tüketici şikayetleriyle ilgilidir. Kimyasal reaktifler ilgili spesifikasyonların gerekliliklerini karşılamalı ve spesifikasyonlardan sapmaları halinde tedarikçiye para cezası uygulanarak geleneksel analize tabi tutulmalıdır. Örneğin, kireç tipik olarak %88-90 CaO, şap %17 AI2O3 ve aktif karbon fenol içeriği spesifikasyonlarına göre satın alınır. Kimyasal tedarik sözleşmesinin tedarikçiye laboratuvar test sonuçlarına göre cezalar öngörmesi durumunda, bu durum su arıtma tesisinin kontamine malzemeleri almasını engelleyebilir.
Klorlu sularda koliform bakteri içeriğinin geri kazanılması
İlk