Antibiyotik direnci, mikropların antimikrobiyal ilaçlara karşı gösterdiği dirençtir. Bakteriler, gerçekte makroorganizmada oluşturulan ilacın bu tür konsantrasyonları tarafından nötralize edilmedikleri takdirde dirençli olarak kabul edilmelidir. Direnç doğal veya edinilmiş olabilir.
Doğal stabilite. Bazı mikrop türleri, uygun bir hedefin bulunmaması nedeniyle (örneğin, mikoplazmaların hücre duvarı yoktur, bu nedenle bu seviyede etkili olan tüm ilaçlara duyarlı değildir) veya belirli antibiyotik ailelerine karşı doğal olarak dirençlidir. belirli bir ilaca karşı bakteriyel geçirimsizliğin bir sonucu olarak (örneğin, gram-negatif mikroplar, dış zarlarının "küçük" gözenekleri olduğundan, büyük moleküler bileşiklere gram-pozitif bakterilere göre daha az geçirgendir).
Kazanılmış direnç. Direncin kazanılması, mikroorganizmaların çevresel koşullara adaptasyonuyla ilişkili biyolojik bir modeldir. Bu, değişen derecelerde de olsa, tüm bakteriler ve tüm antibiyotikler için doğrudur. Sadece bakteriler değil, ökaryotik formlardan (protozoa, mantarlar) virüslere kadar diğer mikroplar da kemoterapi ilaçlarına uyum sağlar. Mikropların ilaç direncinin oluşumu ve yayılması sorunu, kural olarak antibiyotiklere karşı çoklu dirence (sözde çoklu direnç) sahip olan "hastane suşlarının" neden olduğu nozokomiyal enfeksiyonlar için özellikle önemlidir.
Kazanılmış direncin genetik temeli. Antibiyotik direnci, direnç genleri (r-genleri) ve bunların mikrobiyal popülasyonlarda yayılmasını destekleyen koşullar tarafından belirlenir ve korunur. Edinilmiş ilaç direnci aşağıdakilerin bir sonucu olarak bakteri popülasyonunda ortaya çıkabilir ve yayılabilir:
- * Bir bakteri hücresinin kromozomundaki mutasyonlar ve ardından mutantların seçilmesi (yani seçimi). Seçilim özellikle antibiyotiklerin varlığında kolayca gerçekleşir, çünkü bu koşullar altında mutantlar popülasyonun ilaca duyarlı diğer hücrelerine göre bir avantaj elde eder. Mutasyonlar antibiyotiğin kullanımına bakılmaksızın meydana gelir; yani ilacın kendisi mutasyonların sıklığını etkilemez ve onların nedeni değildir, ancak bir seçim faktörü olarak hizmet eder. Dirençli hücreler daha sonra yavrular üretir ve bir sonraki konağın (insan veya hayvan) vücuduna aktarılarak dirençli türler oluşturup yayabilir. Mutasyonlar şunlar olabilir: 1) tek (eğer mutasyon bir hücrede meydana gelmişse, bunun sonucunda değiştirilmiş proteinler onun içinde sentezlenir) ve 2) çoklu (sonuç olarak bir değil, bütün bir set olan bir dizi mutasyon) protein değişiklikleri, örneğin penisiline dirençli pnömokoktaki penisilin bağlayan proteinler;
- * bulaşıcı direnç plazmitlerinin (R-plazmitleri) transferi. Direnç (bulaşıcı) plazmidler genellikle çeşitli antibiyotik ailelerine karşı çapraz direnci kodlar. İlk defa bu kadar çoklu direnç Japon araştırmacılar tarafından bağırsak bakterileriyle ilişkili olarak tanımlandı. Artık diğer bakteri gruplarında da meydana geldiği gösterilmiştir. Bazı plazmitler farklı türdeki bakteriler arasında aktarılabilir, dolayısıyla taksonomik olarak birbirinden uzak bakterilerde aynı direnç geni bulunabilir. Örneğin, TEM-1 plazmidi tarafından kodlanan beta-laktamaz, Gram-negatif bakterilerde yaygındır ve Escherichia coli ve diğer enterik bakterilerin yanı sıra penisiline dirençli gonokok ve ampisiline dirençli Haemophilus influenzae'de de bulunur;
- * r-genlerini (veya göç eden genetik dizileri) taşıyan transpozonların transferi. Transpozonlar bir kromozomdan plazmit'e ve geriye doğru göç edebildiği gibi, bir plazmitten başka bir plazmit'e de göç edebilir. Bu şekilde direnç genleri kardeş hücrelere veya rekombinasyon yoluyla diğer alıcı bakterilere aktarılabilir.
Kazanılan kararlılığın uygulanması. Bakteri genomundaki değişiklikler bakteri hücresinin bazı özelliklerinde değişikliklere neden olur ve bunun sonucunda bakteri antibakteriyel ilaçlara karşı dirençli hale gelir. Tipik olarak bir ilacın antimikrobiyal etkisi şu şekilde elde edilir: Ajan bakteriye bağlanmalı ve onun membranından geçmeli, daha sonra etki alanına iletilmeli ve ardından ilaç hücre içi hedeflerle etkileşime girmelidir. Kazanılmış ilaç direncinin uygulanması aşağıdaki aşamaların her birinde mümkündür:
- * hedef değişikliği. Hedef enzim, fonksiyonları bozulmayacak şekilde değiştirilebilir, ancak kemoterapi ilacına bağlanma yeteneği (afinite) keskin bir şekilde azaltılabilir veya metabolizmanın bir "bypass"ı etkinleştirilebilir, yani başka bir enzim aktive edilebilir. ilaçtan etkilenmeyen hücrede.
- * Hücre duvarı ve hücre zarlarının geçirgenliğindeki azalma veya hücre antibiyotiği kendi dışına "ittiğinde" "atık mekanizma" nedeniyle hedefin "erişilemezliği".
- * İlacın bakteriyel enzimler tarafından inaktivasyonu. Bazı bakteriler ilaçları etkisiz hale getiren özel enzimler üretme yeteneğine sahiptir (örneğin beta-laktamazlar, aminoglikozid değiştirici enzimler, kloramfenikol asetiltransferaz). Beta-laktamazlar, beta-laktam halkasını yok ederek inaktif bileşikler oluşturan enzimlerdir. Bu enzimleri kodlayan genler bakteriler arasında yaygındır ve bir kromozom üzerinde ya da bir plazmit üzerinde bulunabilir.
Beta-laktamazların etkisizleştirici etkisiyle mücadele etmek için inhibitör maddeler kullanılır (örneğin klavulanik asit, sulbaktam, tazobaktam). Bu maddeler bir beta-laktam halkası içerir ve beta-laktamazlara bağlanarak beta-laktamlar üzerindeki yıkıcı etkilerini önleyebilirler. Ancak bu tür inhibitörlerin intrinsik antibakteriyel aktivitesi düşüktür. Klavulanik asit bilinen beta-laktamazların çoğunu inhibe eder. Penisilinlerle birleştirilir: amoksisilin, tikarsilin, piperasilin.
Bakterilerde antibiyotik direncinin gelişmesini önlemek neredeyse imkansızdır, ancak antimikrobiyal ilaçların direncin gelişmesine ve yayılmasına katkıda bulunmayacak şekilde kullanılması gerekir (özellikle antibiyotikleri kesinlikle endikasyonlara göre kullanın, bunların kullanımından kaçının). profilaktik amaçlı kullanın, antibiyotik tedavisini 10-15 gün sonra değiştirin, mümkünse dar spektrumlu ilaçlar kullanın, veteriner hekimlikte antibiyotik kullanımını sınırlandırın ve büyüme faktörü olarak kullanmayın). No. 45 Bakterilerin antibiyotiklere duyarlılığını belirleme yöntemleri.
Bakterilerin antibiyotiklere (antibiyotikogramlar) duyarlılığını belirlemek için genellikle aşağıdakiler kullanılır:
- *Agar difüzyon yöntemi. İncelenen mikrop bir agar besin ortamına aşılanır ve ardından antibiyotikler eklenir. Tipik olarak, ilaçlar ya agardaki özel kuyucuklara eklenir ya da aşılama yüzeyine antibiyotikli diskler yerleştirilir (“disk yöntemi”). Sonuçlar, deliklerin (disklerin) çevresinde mikrobiyal büyümenin varlığına veya yokluğuna bağlı olarak iki günde bir kaydedilir. Disk yöntemi nitelikseldir ve mikrobun ilaca karşı duyarlı veya dirençli olup olmadığını değerlendirmenizi sağlar.
- * Minimum inhibitör ve bakterisidal konsantrasyonları belirleme yöntemleri, yani bir besin ortamında mikropların gözle görülür büyümesini in vitro olarak önlemeye veya tamamen sterilize etmeye izin veren minimum antibiyotik seviyesi. Bunlar, ilacın dozunu hesaplamanıza izin veren kantitatif yöntemlerdir, çünkü kandaki antibiyotiğin konsantrasyonu, bulaşıcı ajan için minimum inhibitör konsantrasyondan önemli ölçüde daha yüksek olmalıdır. Etkili tedavi ve dirençli mikropların oluşumunun önlenmesi için ilacın yeterli dozda uygulanması gereklidir.
Otomatik analizörlerin kullanıldığı hızlandırılmış yöntemler vardır.
Bakterilerin antibiyotiklere duyarlılığının disk yöntemi kullanılarak belirlenmesi. İncelenmekte olan bakteri kültürü, bir Petri kabındaki besin agarına veya AGV ortamına aşılanır.
AGV ortamı: kuru besin balık suyu, agar-agar, disodyum fosfat. Ortam talimatlara uygun olarak kuru tozdan hazırlanır.
Belirli dozlarda farklı antibiyotik içeren kağıt diskler, aşılanmış yüzeye cımbızla birbirinden eşit uzaklıkta yerleştirilir. Mahsuller ertesi güne kadar 37°C'de inkübe edilir. İncelenen bakteri kültürünün büyüme inhibisyonu bölgelerinin çapı, antibiyotiklere duyarlılığını değerlendirmek için kullanılır.
Güvenilir sonuçlar elde etmek için, ilgili mikroorganizmaların hangi standart suşlarının kullanıldığını kontrol etmek için standart diskler ve besin ortamlarının kullanılması gerekir. Disk yöntemi, mikroorganizmaların agara zayıf şekilde yayılan polipeptit antibiyotiklere (örneğin polimiksin, ristomisin) duyarlılığını belirlerken güvenilir veriler sağlamaz. Bu antibiyotiklerin tedavi amacıyla kullanılması amaçlanıyorsa, seri seyreltme yapılarak mikroorganizmaların duyarlılığının belirlenmesi önerilir.
Bakterilerin antibiyotiklere duyarlılığının seri seyreltme yöntemiyle belirlenmesi. Bu yöntem, test bakteri kültürünün büyümesini engelleyen antibiyotiğin minimum konsantrasyonunu belirler. Öncelikle özel bir solvent veya tampon solüsyonu içerisinde belirli bir konsantrasyonda antibiyotik (μg/ml veya IU/ml) içeren bir stok solüsyon hazırlayın. Et suyu içindeki sonraki tüm seyreltmeler (1 ml'lik bir hacimde) ondan hazırlanır, daha sonra her seyreltmeye 1 ml'de 106-107 bakteri hücresi içeren 0,1 ml test bakteri süspansiyonu eklenir. Son test tüpüne 1 ml et suyu ve 0,1 ml bakteri süspansiyonu (kültür kontrolü) ekleyin. Mahsuller ertesi güne kadar 37 °C'de inkübe edilir, ardından deneyin sonuçları, kontrol kültürüyle karşılaştırılarak besin ortamının bulanıklığına göre not edilir. Şeffaf besin ortamına sahip son tüp, içinde bulunan antibiyotiğin minimum inhibitör konsantrasyonunun (MIC) etkisi altında incelenen bakteri kültürünün büyümesinde bir gecikme olduğunu gösterir.
Mikroorganizmaların antibiyotiklere duyarlılığının belirlenmesinin sonuçları, dirençli, orta derecede dirençli ve hassas suşlar için büyüme inhibisyon bölgelerinin çaplarının sınır değerlerinin yanı sıra MİK değerlerini içeren özel bir hazır tablo kullanılarak değerlendirilir. Dirençli ve hassas suşlar için antibiyotikler.
Hassas suşlar, normal dozda antibiyotik kullanıldığında hastanın kan serumunda bulunan ilacın konsantrasyonlarında büyümesi engellenen mikroorganizma suşlarını içerir. Orta derecede dirençli suşlar, büyümenin inhibisyonu, ilacın maksimum dozlarının uygulanması üzerine kan serumunda oluşturulan konsantrasyonları gerektiren suşlardır. Dirençli, izin verilen maksimum dozlar kullanıldığında vücutta oluşturulan konsantrasyonlarda büyümesi ilaç tarafından baskılanmayan mikroorganizmalardır.
İnsan vücudunun kanında, idrarında ve diğer sıvılarında antibiyotiklerin belirlenmesi. Bir rafa iki sıra test tüpü yerleştirilir. Bunlardan birinde standart antibiyotiğin seyreltileri hazırlanırken, diğerinde test sıvısının seyreltileri hazırlanır. Daha sonra her test tüpüne Hiss ortamında hazırlanan glikozlu test bakterisi süspansiyonu eklenir. Test sıvısında penisilin, tetrasiklinler ve eritromisin belirlenirken test bakterisi olarak standart S. aureus suşu kullanılır ve streptomisin belirlenirken E. coli kullanılır. Ekinlerin 37°C'de 18-20 saat süreyle inkübe edilmesinden sonra deneyin sonuçları, ortamın bulanıklığı ve glikozun test bakterileri tarafından parçalanması nedeniyle bir göstergeyle boyanması ile not edilir. Antibiyotiğin konsantrasyonu, test bakterilerinin büyümesini engelleyen test sıvısının en yüksek seyreltiminin, aynı test bakterilerinin büyümesini engelleyen referans antibiyotiğin minimum konsantrasyonuyla çarpılmasıyla belirlenir.
Örneğin, test bakterilerinin büyümesini engelleyen test sıvısının maksimum seyreltmesi 1:1024 ise ve aynı test bakterilerinin büyümesini engelleyen referans antibiyotiğin minimum konsantrasyonu 0,313 μg/ml ise, bu durumda ürün 1024 olur. - 0,313 = 320 µg/ml 1 ml'deki antibiyotik konsantrasyonudur.
S. aureus'un beta-laktamaz üretme yeteneğinin belirlenmesi. Penisiline duyarlı standart bir stafilokok türünün günlük et suyu kültürünün 0,5 ml'sini içeren bir şişeye, 20 ml eritilmiş ve 45 ° C besin agarına soğutulmuş ekleyin, karıştırın ve bir Petri kabına dökün. Agar katılaştıktan sonra besiyerinin yüzeyindeki plakanın ortasına penisilin içeren bir disk yerleştirilir. İncelenen mahsuller diskin yarıçapı boyunca bir döngü halinde ekilir. Mahsuller ertesi güne kadar 37°C'de inkübe edilir, ardından deneyin sonuçları not edilir. İncelenen bakterilerin beta-laktamaz üretme yeteneği, bir veya başka bir test kültürünün (diskin etrafında) etrafında standart bir stafilokok suşunun büyümesinin varlığıyla değerlendirilir. No. 46 Akılcı antibiyotik tedavisinin ilkeleri.
Komplikasyonların gelişmesinin önlenmesi, öncelikle rasyonel antibiyotik tedavisinin (antimikrobiyal kemoterapi) prensiplerine uymaktan oluşur:
* Mikrobiyolojik prensip. İlacı reçete etmeden önce enfeksiyonun etken maddesi tanımlanmalı ve antimikrobiyal kemoterapötik ilaçlara karşı bireysel duyarlılığı belirlenmelidir. Antibiyogramın sonuçlarına göre hastaya, minimum inhibitör konsantrasyonundan 2-3 kat daha yüksek bir dozda, belirli bir patojene karşı en belirgin aktiviteye sahip olan dar spektrumlu bir ilaç reçete edilir. Etken ajan hala bilinmiyorsa, genellikle bu patolojiye neden olan tüm olası mikroplara karşı aktif olan daha geniş bir spektrumdaki ilaçlar genellikle reçete edilir.
Tedavinin düzeltilmesi, bakteriyolojik incelemenin sonuçları ve belirli bir patojenin bireysel duyarlılığının belirlenmesi (genellikle 2-3 gün sonra) dikkate alınarak gerçekleştirilir. Enfeksiyonun tedavisine mümkün olduğu kadar erken başlamak gerekir (birincisi, hastalığın başlangıcında vücutta daha az mikrop vardır ve ikincisi, ilaçlar mikropların büyümesi ve çoğalması üzerinde daha aktif etkiye sahiptir).
- * Farmakolojik prensip. İlacın özellikleri dikkate alınır - farmakokinetiği ve farmakodinamiği, vücuttaki dağılımı, uygulama sıklığı, ilaçları birleştirme olasılığı vb. İlaç dozları, biyolojik sıvılarda ve dokularda mikrobostatik veya mikrobisidal konsantrasyonları sağlamak için yeterli olmalıdır. Optimum tedavi süresini anlamak gerekir, çünkü klinik iyileşme ilacı bırakmak için bir neden değildir, çünkü patojenler vücutta kalabilir ve hastalığın nüksetmesi olabilir. Birçok antibiyotiğin gastrointestinal sistemden zayıf bir şekilde emilmesi veya kan-beyin bariyerine nüfuz etmemesi nedeniyle ilacın optimal uygulama yolları da dikkate alınır.
- * Klinik prensip. Bir ilacı reçete ederken, hastanın durumunun bireysel özelliklerine (enfeksiyonun şiddeti, bağışıklık durumu, cinsiyet, hamilelik, yaş, karaciğer ve böbrek fonksiyonunun durumu, eşlik eden hastalıklar vb.) Ciddi vakalarda Hayatı tehdit eden enfeksiyonlarda, zamanında antibiyotik tedavisi özellikle önemlidir. Bu tür hastalara, mümkün olan en geniş etki spektrumunu sağlamak için iki veya üç ilacın kombinasyonları reçete edilir. Birkaç ilacın bir kombinasyonunu reçete ederken, bu ilaçların kombinasyonunun patojene karşı ne kadar etkili olacağını ve hasta için ne kadar güvenli olacağını bilmelisiniz, yani antibakteriyel aktivite ile ilgili olarak ilaçların bir antagonizması olmayacak ve toksik etkilerinin toplamı yoktur.
- * Epidemiyolojik prensip. Özellikle yatan bir hasta için ilaç seçiminde, belirli bir bölümde, hastanede ve hatta bölgede dolaşan mikrobiyal suşların direnç durumu dikkate alınmalıdır. Mikroorganizmanın ilaca karşı doğal duyarlılığı yeniden sağlanırken, antibiyotik direncinin sadece kazanılabileceği değil, aynı zamanda kaybedilebileceği de unutulmamalıdır. Sadece doğal stabilite değişmez.
- * Farmasötik prensip. Son kullanma tarihini dikkate almak ve ilacı saklama kurallarına uymak gerekir, çünkü bu kuralların ihlal edilmesi durumunda antibiyotik sadece aktivitesini kaybetmekle kalmaz, aynı zamanda bozulma nedeniyle toksik hale gelebilir. İlacın maliyeti de önemlidir.
Mikroorganizmaların ilaç direnci Kemoterapi ilaçlarıyla temasa rağmen mikroorganizmaların hayati aktiviteyi sürdürme yeteneği. () mikroorganizmalar, mikrobiyal hücrelerin azaltılmış miktarda otolitik enzim nedeniyle kemoterapi ilaçlarının varlığında ölmediği, aynı zamanda çoğalmadığı toleranslarıyla ayırt edilir. L.u.m. - bulaşıcı hastalıkların tedavisini engelleyen yaygın bir olgu. En çok çalışılan bakteriler. Mikroorganizmaların doğal yapısında bulunan ve mutasyonlar ya da yabancı genlerin edinilmesi sonucu ortaya çıkan ilaç direnci vardır. Doğal L.s.m. mikrobiyal hücrede kemoterapi ilaçları için bir hedefin bulunmamasından veya mikrobiyal hücre zarının bunlara karşı geçirimsizliğinden kaynaklanır. Kural olarak, belirli bir kemoterapi ilacı grubuyla ilgili olarak belirli bir bakteri türünün (bazen cins) tüm temsilcilerinin karakteristik özelliğidir. Örnekler arasında, hücre duvarı eksikliği nedeniyle mikoplazmaların penisiline direnci ve penisilin hedefleri olan sentez enzimlerinin yanı sıra Pseudomonas aeruginosa'nın, ikincisinin zarından geçememesi nedeniyle eritromisine direnci yer alır. hedefleri, ribozomlar. Mutasyonların bir sonucu olarak mikroorganizmaların ilaca direnci veya başlangıçta spesifik kemoterapi ilaçlarına duyarlı olan türlerin temsilcileri tarafından yabancı genlerin edinilmesi, spesifik olarak dirençli bakteri formlarının hayatta kalması için yaygın olarak kullanılan ilaçların yarattığı seçici arka plan nedeniyle yaygınlaşmıştır. Bu nedenle, bazı bölgelerde penisiline dirençli stafilokokların tespit sıklığı% 80-90'a, streptomisin dirençli -% 60-70, ampisilin dirençli shigella -% 90, tetrasiklin ve streptomisin dirençli -% 50'den fazla, vb. Direnci belirleyen genlerin kromozom veya plazmit içindeki konumuna bağlı olarak, kromozomal ve plazmit kökenli L.m'yi ayırt etmek gelenekseldir. Ancak plazmit genleri bir kromozomun içinde yer alabilir, kromozomal genler ise bir replikonda bulunabilir. Bunun nedeni, bir hücrede bir replikondan diğerine geçiş yapabilen genetik elementler olan transpozonların varlığıdır. Mikroorganizmaların ilaç direnci çoğunlukla indüklenebilir; Direnç genlerinin ekspresyonu yalnızca hücrenin antimikrobiyal bir maddeyle temasından sonra meydana gelir. Bunun bir örneği, bir bakteri kültürünün bir beta-laktam antibiyotiği ile temasından sonra inaktive edici bir enzim oluşumunun sıklıkla meydana gelmesidir. Mikroorganizmaların ilaç direnci aşağıdaki ana mekanizmalardan kaynaklanmaktadır: antimikrobiyal ajanın enzimatik inaktivasyonu, patojen hücreye nüfuzunun zayıflaması, antimikrobiyal ajan için hücre içi hedefin konformasyonundaki değişiklikler, bu da hedef ile etkileşimini önler, Antimikrobiyal ajanın üzerinde etki gösterdiği artan sayıda hedef molekülün oluşumu. Hidrolazların temsilcileri, penisilinler, sefalosporinler ve diğer beta-laktamlardaki (monobaktamlar, karbapenemler, vb.) beta-laktam halkasını katalize eden inaktive edici enzimler - beta-laktamazlar ve ayrıca diğer bazı yapılara yakın olarak etki eden esterazlar olarak bilinir. ona. Etkinleştirici enzimlerin bir başka grubu da. Bunlar arasında kloramfenikol-(kloramfenikol-)-asetiltransferazlar, aminoglikozit asetil, fosfo- veya adenililtransferazlar ve eritromisin üzerinde etkili olanlar yer alır. Beta-laktamazlar birçok gram pozitif ve gram negatif bakteri tarafından üretilir. Hem kromozomal hem de plazmid genler tarafından kodlanır. Substrat spesifikliğine, inhibitörlere duyarlılığına, izoelektrik noktasına ve diğer göstergelere dayalı olarak beta-laktamazlar için çeşitli sınıflandırma sistemleri vardır. beta-laktamazların penisilinazlara ve sefalosporinazlara karşı etkisi büyük ölçüde koşulludur. Gram-pozitif bakterilerin beta-laktamazları kural olarak dış ortama salınırken, gram-negatif bakteriler sitoplazmik membranda ve periplazmik boşlukta (dış zarın altında) bulunur. Hem kromozomal hem de plazmid kökenli beta-laktamazlar bir hücrede mevcut olabilir. Transferazlar, bir antibiyotiğin fonksiyonel bir grubunun asetik, fosforik veya adenilik asit kalıntısıyla değiştirilmesi reaksiyonunu katalize eder. Aminoglikosit antibiyotikler kullanıldığında, amino gruplarının (N-asetalasyon) ve hidroksil gruplarının (O-fosforilasyon ve O-adenilasyon) ikamesi tarif edilmiştir. Biri genellikle bir fonksiyonel grubu etkiler. Kloramfenikol ve eritromisinin O-fosforilasyonu da tarif edilmiştir. Modifikasyona uğrayan antibiyotikler kaybeder. Transferazlar yalnızca (donör fosforik veya adenilik asit kalıntısı) veya koenzim A (donör asetil kalıntısı) varlığında koruyucu rol oynayabilir, dolayısıyla dış ortama aktarıldığında koruyucu rolleri kaybolur. Çoğu durumda hücreden salınmazlar. Bakteri hücre zarının kemoterapi ilaçlarına geçirgenliği, porin proteinlerinin sayısının ve bunların dış zarda oluşturdukları, ilaçların yayıldığı su kanallarının azalması sonucu zayıflar. Böyle bir L.u.m mekanizması, beta-laktamlar, amino-glikozitler, florokinolonlar vb. ile ilişkili olarak gerçekleştirilebilir. Belirgin hidrofobikliğe sahip antimikrobiyal maddeler (penisilinlerin, florokinolonların bazıları vb.) dış zarın lipit bölgelerinden hücreye nüfuz eder. Lipidlerin yapısındaki değişiklikler L.m'yi etkileyebilir. Örneğin bazı antibiyotikler, enerjiye bağımlı spesifik taşıma sistemlerini kullanarak sitoplazmik membrandan nüfuz eder. İşleyen sitokrom elektron taşıma sistemlerinin yokluğunda aminoglikozitlerin hücreye transferi durur. Bu, anaerobik koşullar altında aminoglikozitlerin aktivitesindeki keskin düşüşü ve anaerobların bunlara karşı doğal direncini açıklar. Tetrasiklin direncinin mekanizması hücre zarındaki değişikliklerle ilişkilidir. Kromozomal veya plazmid genler tarafından kodlanan membran TET proteinleri nedeniyle, bu durumda, kural olarak, hücreye nüfuz eden ve hedefleri olan ribozomla reaksiyona girecek zamanı olmayan tetrasiklin moleküllerinin hızlı bir şekilde ortadan kaldırılması söz konusudur. Antibiyotik vankomisine direnç, sitoplazmik membranda kalkan oluşturan proteinlerin ortaya çıkmasıyla ilişkilidir; bu polimerin birleşmesi sırasında reaksiyona girdiği peptidoglikanın peptid zincirleri ona erişilemez hale gelir. Mikroorganizmalar beta-laktamlara, florokinolonlara ve diğer kemoterapi ilaçlarına dirençli olduğunda hedef konformasyonunda bir değişiklik sıklıkla gözlemlenir. bakteriyel hücre duvarı peptidoglikanı - transpeptadaz ve D1D-karboksipeptidaz (penisilin bağlama olarak da bilinir) biyosentezi, konformasyon değiştiğinde beta-laktamlara bağlanmayı durdurur ve DNA giraz (florokinolonların hedefi) bu kemoterapi ilaçlarıyla reaksiyona girmeyi bırakır. Aminoglikozitlere karşı direnç, bireysel ribozomal proteinlerin konformasyonundaki değişikliklerin bir sonucu olarak bunların ribozomlara bağlanmasındaki azalmaya bağlı olabilir. Hedef seviyesinde (ribozomlar) eritromisine direnç, büyük ribozomal alt ünitedeki spesifik ribozomal metilasyondan kaynaklanmaktadır. Bu, eritromisinin ribozomlarla reaksiyonunun önlenmesine yol açar. Folik asit redüktaz oluşumunun artması nedeniyle trimetoprim direnci ile birlikte hücrede hedef molekül sayısında artış ve bunun sonucunda antimikrobiyal maddeye karşı direnç gözlendi. Antibiyotiğe dirençli bakterilerin seçimi ve yaygınlaşması, antibiyotiklerin mantıksız ve haksız kullanımıyla kolaylaştırılmaktadır. Mikroorganizmaların direnci, iltihap bölgesindeki patojenlerin sayıları 10 8'e ulaştığında büyüme aşamasıyla ilişkilendirilebilir. -
1'de 10 9 kişi ml test malzemesinin homojenleştirilmiş numunesi. Bu aşamada mikrobiyal hücreler durur ve patojen, birçok antimikrobiyal ilacın engelleyici etkilerine karşı kayıtsız veya daha az duyarlı hale gelir. Kemoterapide bilinen zorluklar, duyarlılığı normal hücre duvarına sahip orijinal bakterilerden farklı olan L-form bakterilerden kaynaklanmaktadır. Patojenlerin antimikrobiyal ilaçlara, bu ilaçları inaktive eden bakterilerle birleşmesi durumunda dirençli olabilmeleri mümkündür. Antibiyotiklerin aktivitesi ayrıca ortamın pH değerinden, anaerobiyoz derecesinden, yabancı maddelerin varlığından, spesifik olmayan direnç ve bağışıklık faktörlerinin durumundan ve ilaçlar arası etkileşimlerden de etkilenir. Mantarların ve protozoanın ilaca direnç mekanizmaları, hücrelerinin yapısal organizasyonu ve kimyasal bileşimi ile ilişkili özelliklere sahiptir. Mantarların, sitoplazmik membran sterolleri ile reaksiyona giren polienlere (nistatin, amfoterisin B vb.) karşı direncinin, membrandaki sterol miktarının azalmasıyla veya moleküler yapıdaki değişiklikler sonucunda bir miktar arttığı kaydedilmiştir. Membranın organizasyonu, polienin sterollerle temasının azalmasına yol açar. Virüslerin ilaca direnci yeterince araştırılmamıştır. Nükleozidler antiviral ajanlar olarak kullanıldığında direncin viral timidin kinaz genlerindeki veya DNA polimerlerindeki mutasyonlarla ilişkili olabileceği gösterilmiştir. .
Bu nedenle herpes simpleks virüslerinin neden olduğu keratitlerde idoksuridin direnci ortaya çıkabilmektedir. Herpes simpleks virüsünün mutantlarında. Vidarabine dirençli olan DNA polimeraz geni değişir. Mikroorganizmaların duyarlılığı veya direnci ile ilgili sonuç, antimikrobiyal maddelerle emprenye edilmiş disklerin etrafındaki yoğun bir besin ortamında (disk difüzyon yöntemi) büyümelerinin baskılandığı bölgenin boyutunun belirlenmesine dayanarak yapılır. Antimikrobiyal ilaçlar aynı zamanda katı ve sıvı besin ortamlarında da kullanılır (bkz. Mikrobiyolojik teşhisler); antiviral ilaçlar, hücre kültüründe virüs yetiştirme yöntemleri kullanılarak belirlenir. tavuk embriyoları veya laboratuvar hayvanları. L.u.m'un üstesinden gelmek çeşitli yollarla gerçekleştirilir: nispeten dirençli mikroorganizmaların büyümesini baskılayabilen antimikrobiyal ilaçların yükleme dozları olarak adlandırılan dozlarının uygulanması, yeterince yüksek dozda ilaç kullanarak tedaviye devam edilmesi ve önerilen rejimin takip edilmesi. Klinikte kullanılan antibiyotiklerin değiştirilip kombine edilmesi ilaca dirençli mikroorganizmalarla mücadelede oldukça etkilidir. Ancak, örneğin, bakteriyostatik bir antibiyotik bakterisidal bir antibiyotikle (penisilin ile kloramfenikol) birleştirildiğinde, ilaçlar arası antagonizma mümkündür ve bu da antimikrobiyal etkinin zayıflamasına yol açar. Beta-laktam antibiyotiklerini bakteriyel beta-laktamazlardan korumak için, bu enzimlerin inhibitörleri kullanılır - klavulanik asit, sulbaktam (penisilanik asit sülfon), vb. Bir beta-laktam halkası içeren ve bir dizi betayı bloke eden klavulanik asidin keşfi -laktamazlar, çeşitli enzim inhibitörlerinin (substrat analogları) araştırılmasını teşvik etti, bu da onları etkisiz hale getiren enzimlere duyarlı antibiyotiklerin kullanımını önemli ölçüde genişletmeyi mümkün kıldı. Halihazırda kullanılan ilaçlara dirençli, bakterilere karşı etkili antimikrobiyal maddeler elde etmek amacıyla yeni doğal antibiyotikler ve bilinen antibiyotiklerin kimyasal modifikasyonu için de araştırmalar sürüyor. İlaca dirençli mikroorganizmaların sistematik olarak tanımlanması ve bu bölgelerde dolaşan ilaç direnci fenotipleri hakkında zamanında bilgi sahibi olunması, doktorun etki spektrumu açısından en uygun ilacın ve elbette en uygun ilaç kombinasyonlarının kullanılması yönünde yönlendirilmesini mümkün kılmaktadır. olası uyumsuzluklarını dikkate alarak (bkz. İlaçların uyumsuzluğu) .
Tarım ürünleri için büyüme uyarıcıları olarak. hayvanlar, veterinerlik ve bitkisel üretimde, klinikte kullanılan ve tıbbi antibiyotiklerle çapraz direnç oluşturan antibiyotiklerin kullanılmaması tavsiye edilir. Kaynakça: Briand L.E. Bakteriyel direnç ve kemoterapiye duyarlılık. İngilizce'den, M., 1984; Lancini D. ve Parenti F., çev. İngilizce'den, s. 89.M., 1985; Navashin S.M. ve Fomina I.P. Rasyonel, s. 25, M., 1982; Franklin T. ve Snow J. antimikrobiyal eylem, İngilizceden çevrilmiş, s. 197, M., 1984.
1. Küçük tıp ansiklopedisi. - M .: Tıp ansiklopedisi. 1991-96 2. İlk yardım. - M .: Büyük Rus Ansiklopedisi. 1994 3. Ansiklopedik Tıbbi Terimler Sözlüğü. - M .: Sovyet Ansiklopedisi. - 1982-1984.
- - bir bakteri hücresinin sitoplazmasında bağımsız olarak çoğalabilen ve var olabilen bakterilerin kromozom dışı (kromozoma ek olarak) genetik yapıları. Bazı plazmitler belirli bir frekansta açılabilir... ... Tıp ansiklopedisi
Kimyasal yapılarında 5 nitrofuran türevi olan antimikrobiyal maddeler. Tıbbi uygulamada kullanılan N. furatsilin, furagin, furadonin, furazolidon ve furazolin içerir. N. geniş bir antimikrobiyal spektruma sahip... ... Tıp ansiklopedisi
Ayrıca bakınız: Tüberküloz Tüberkülozun, özellikle de akciğer dışı formlarının tedavisi, çok zaman ve entegre bir yaklaşım gerektiren karmaşık bir konudur. İçindekiler 1 Tüberküloza neden olan ajanda ilaç direnci türleri ... Wikipedia
Bu makalenin tarzı ansiklopedik değildir veya Rus dilinin normlarını ihlal etmektedir. Makale Vikipedi'nin üslup kurallarına göre düzeltilmelidir. Tüberküloz ... Vikipedi
ilaç direnci- mikroorganizmaların bir ilaca karşı ilaç direnci (direnç) direnci - [aşı bilimi ve bağışıklamayla ilgili temel terimler İngilizce-Rusça sözlüğü. Dünya Sağlık Örgütü, 2009] Konular... ... Teknik Çevirmen Kılavuzu
Mikroorganizmaların antibiyotik direnci
İn vivo (vücuttaki) mikroplar üzerinde seçici bir etkiye sahip olan antibiyotiklerin keşfiyle, insanın bulaşıcı hastalıklara karşı nihai zaferinin çağı gelmiş gibi görünebilir. Ancak çok geçmeden patojenik mikropların bireysel suşlarının antibiyotiklerin yıkıcı etkilerine karşı direnç (direnç) olgusu keşfedildi. Antibiyotiklerin pratik kullanım süresi ve ölçeği arttıkça dirençli mikroorganizma türlerinin sayısı da arttı. 40'lı yıllarda klinisyenler dirençli mikrop formlarının neden olduğu izole enfeksiyon vakalarıyla uğraşmak zorunda kaldıysa, şimdi örneğin penisilin, streptomisin, kloramfenikole (kloramfenikol) dirençli stafilokokların sayısı% 60-70'i aşıyor. Antibiyotik direnci olgusunu ne açıklıyor?
Mikroorganizmaların antibiyotiklerin etkisine karşı direnci çeşitli nedenlerden kaynaklanmaktadır. Temel olarak aşağıdakilere indirgenirler. İlk olarak, substratın belirli bir bölgesinde bir arada bulunan herhangi bir mikroorganizma koleksiyonunda, doğal olarak antibiyotiğe dirençli varyantlar bulunur (yaklaşık milyonda bir kişi). Bir popülasyon bir antibiyotiğe maruz kaldığında, hücrelerin çoğunluğu ölür (eğer antibiyotiğin bakterisit etkisi varsa) veya gelişimi durur (eğer antibiyotiğin bakteriyostatik etkisi varsa). Aynı zamanda antibiyotiğe dirençli tek hücreler hiçbir engelle karşılaşmadan çoğalmaya devam ediyor. Bu hücrelerin antibiyotik direnci kalıtsaldır ve antibiyotiğe dirençli yeni bir popülasyonun ortaya çıkmasına neden olur. Bu durumda dirençli varyantların seçimi (seçimi) bir antibiyotik kullanılarak gerçekleşir.
İkincisi, antibiyotiğe duyarlı mikroorganizmalar, antibiyotik maddenin zararlı etkilerine karşı bir adaptasyon (adaptasyon) sürecine girebilirler. Bu durumda, bir yandan mikroorganizmanın metabolizmasındaki, antibiyotiğin doğal seyrini bozduğu bazı bağlantıların, ilaçtan etkilenmeyen başka bağlantılarla yer değiştirmesi söz konusu olabilir. Bu durumda mikroorganizma antibiyotik tarafından da baskılanamayacaktır. Öte yandan mikroorganizmalar, antibiyotik molekülünü yok eden maddeleri yoğun bir şekilde üretmeye başlayabilir ve böylece etkisini nötralize edebilir. Örneğin, bazı stafilokok türleri ve spor taşıyan bakteriler, penisilini yok ederek antibiyotik aktivitesi olmayan ürünler oluşturan penisilinaz enzimini üretir. Bu olaya antibiyotiklerin enzimatik inaktivasyonu denir.
Penisilinazın artık bir panzehir olarak pratik kullanım bulduğunu belirtmek ilginçtir; bu ilaç, hastanın hayatını tehdit eden ciddi alerjik reaksiyonlara neden olduğunda penisilinin zararlı etkilerini ortadan kaldıran bir ilaçtır.
Son olarak, hücrelerinde R-faktörleri veya direnç faktörleri (direnç) olarak adlandırılan mikroorganizma türleri vardır. R-faktörlerinin patojen bakteriler arasında büyük ölçüde yayılması, diğer mikrobiyal direnç türlerine kıyasla birçok antibiyotikle tedavinin etkinliğini azaltır, çünkü aynı anda birkaç antibakteriyel maddeye karşı dirence neden olur.
Bütün bu gerçekler, antibiyotiklerle başarılı bir tedavi için, patojenik mikropların antibiyotik direncini reçete etmeden önce belirlemenin ve ayrıca mikropların ilaç direncinin üstesinden gelmeye çalışmanın gerekli olduğunu göstermektedir.
Tedavinin etkinliğini azaltan antibiyotiklere karşı mikrobiyal direncin üstesinden gelmenin başlıca yolları şunlardır:
yeni antibiyotiklerin araştırılması ve uygulanmasının yanı sıra bilinen antibiyotiklerin türevlerinin üretimi;
farklı etki mekanizmalarına sahip bir değil, aynı anda birkaç antibiyotiğin tedavisi için kullanılması; bu durumlarda, mikrobiyal hücrenin çeşitli metabolik süreçleri aynı anda baskılanır, bu da onun hızlı ölümüne yol açar ve mikroorganizmalarda direnç gelişimini büyük ölçüde zorlaştırır; antibiyotiklerin diğer kemoterapi ilaçlarıyla kombinasyonunun kullanılması. Örneğin, streptomisinin para-aminosalisilik asit (PAS) ve ftivazid ile kombinasyonu, tüberküloz tedavisinin etkinliğini önemli ölçüde artırır;
antibiyotikleri yok eden enzimlerin etkisinin baskılanması (örneğin penisilinazın etkisi kristal menekşe ile baskılanabilir);
dirençli bakterilerin, belirli boyaların kullanılabileceği çoklu ilaca direnç faktörlerinden (R faktörleri) arındırılması.
İlaç direncinin kökenini açıklamaya çalışan birçok çelişkili teori vardır. Bunlar esas olarak mutasyonların ve adaptasyonun direncin kazanılmasındaki rolüne ilişkin sorularla ilgilidir. Görünüşe göre hem adaptif hem de mutasyonel değişiklikler, antibiyotikler de dahil olmak üzere ilaçlara karşı direncin gelişmesinde belirli bir rol oynuyor.
Antibiyotiklerin yaygın olarak kullanıldığı günümüzde antibiyotiklere dirençli mikroorganizma formları da oldukça yaygındır.
Bitkilerin ömrü: 6 ciltte. - M.: Aydınlanma. Düzenleyen: A. L. Takhtadzhyan, baş editör, ilgili üye. SSCB Bilimler Akademisi, prof. A.A. Fedorov. 1974 .
Diğer sözlüklerde “Mikroorganizmaların antibiyotiklere karşı direnci” nin ne olduğuna bakın:
antibiyotik direnci- Mikroorganizmaların ilaçlara karşı direnç biçimlerinden biri, birçok doğal suşun karakteristiğidir, örneğin gastroenteritte, izole edilmiş Salmonella suşlarının %86'sı çeşitli antibiyotiklere direnç gösterir. [Arefyev V.A.,... ... Teknik Çevirmen Kılavuzu
- ... Vikipedi
Antibiyotik direnci Antibiyotiklere karşı direnç. Mikroorganizmaların ilaçlara karşı direnç biçimlerinden biri birçok doğal suşun karakteristiğidir; örneğin gastroenteritte izole edilmiş Salmonella suşlarının %86'sı... ... Moleküler biyoloji ve genetik. Açıklayıcı sözlük.
Mikroorganizmalar gibi fajlar da tüm özelliklerini değiştirebilir: Negatif kolonilerin şekli ve boyutu, litik etki spektrumu, mikrobiyal hücreye adsorbe olma yeteneği, dış etkilere karşı direnç, antijenik özellikler.... ... Biyolojik ansiklopedi
Antibiyotik direnci bulaşıcıdır (aktarılabilir)- rekombinant DNA GMM'nin en yaygın seçici belirteci olan mikrobiyal hücrenin kromozom dışı gen elemanlarında kodlanan mikroorganizmaların antibiyotiklere karşı direnci... Kaynak: GIDA KONTROLÜNÜN DÜZENİ VE ORGANİZASYONU... ... Resmi terminoloji
Antibiyotiklerin veteriner hekimlikte kullanımı, keşfedilmelerinden hemen sonra başlamıştır. Bu, antibiyotiklerin diğer kemoterapötik maddelerle karşılaştırıldığında sahip olduğu bir dizi avantajla açıklanmaktadır: antimikrobiyal etkisi çok... ... Biyolojik ansiklopedi
Mikroorganizmalar tarafından üretilen, bakteri ve diğer mikropların büyümesini engelleyebilen ve ölümüne neden olabilen kimyasal maddeler. Antibiyotiklerin antimikrobiyal etkisi seçicidir: bazı organizmalar üzerinde, onlardan daha güçlü etki gösterirler... ... Collier Ansiklopedisi
Kemoterapi ilaçlarıyla temasa rağmen mikroorganizmaların üreme de dahil olmak üzere hayati aktivitelerini sürdürme yeteneği. Mikroorganizmaların ilaç direnci (direnç), mikrobiyal hücrelerin toleranslarından farklıdır... ... Tıp ansiklopedisi
Tetrasiklinlerin temel kimyasal yapısı Tetrasiklinler (eng. tetrasiklinler), kimyasal yapı ve biyolojik özellikler bakımından benzer olan poliketid sınıfına ait bir grup antibiyotiktir ... Wikipedia
Ov; pl. (birim antibiyotik, a; m.) [Yunanca'dan. anti-karşı ve bios yaşamı]. Patojenik mikroorganizmaların aktivitesini baskılayabilen biyolojik kökenli maddeler. Bir al. Güçlü a. * * * antibiyotikler (anti... ve Yunan biyolarından ... ... Ansiklopedik Sözlük
İlaç direnci oluşum mekanizmaları.
~ antibiyotiğin enzimatik inaktivasyonu
~ Antibiyotik için hedefin yapısında değişiklik
~ hedefin aşırı üretimi (ajan-hedef oranındaki değişiklik)
~ bir mikrobiyal hücreden antibiyotiğin aktif salınımı
~ hücre duvarı geçirgenliğinde değişiklik
~ “metabolik şantın” etkinleştirilmesi (metabolik bypass)
MBT'nin ilaç direncinin çeşitleri.
Monodirenç– bir anti-tüberküloz ilaca (ATD) direnç.
Çoklu ilaç direnci- bu MBT'nin izoniazid ve rifampisine eşzamanlı direnç olmaksızın iki veya daha fazla anti-TB ilaca karşı direncidir.
Çoklu ilaç direnci (MDR)- diğer anti-TB ilaçlara direnç olsun veya olmasın, izoniazid ve rifampisinin eşzamanlı etkisine direnç. Sürecin bu tür suşlardan kaynaklandığı hastaların tedavisi çok zor olduğundan, Mycobacterium tuberculosis'in bu suşlarına özel önem verilmektedir. Uzundur, pahalıdır ve çoğu pahalı olan ve ciddi advers reaksiyonlara neden olabilen yedek ilaçların kullanımını gerektirir. Ayrıca çoklu ilaca dirençli suşlar hastalığın ciddi, ilerleyici formlarına neden olur ve sıklıkla olumsuz sonuçlara yol açar.
İlaca karşı kapsamlı direnç (XDR, XDR, aşırı DR)- bu, MBT'nin izoniazid, rifampisin, enjekte edilebilir aminoglikozidler ve florokinolonlara karşı eşzamanlı direncidir.
Toplam ilaç direnci– tüm trafik karşıtı ilaçlara karşı direnç.
Çapraz ilaç direnci– bu, bir anti-inflamatuar ilaca karşı direncin, diğer anti-inflamatuar ilaçlara karşı direnci gerektirdiği bir durumdur. Çapraz LN özellikle aminoglikozid grubu içinde sıklıkla gözlenir.
MBT DR'yi belirleme yöntemleri.
Mikobakterilerin anti-tüberküloz ilaçlara karşı direnç spektrumunun ve derecesinin belirlenmesi, hastalar için kemoterapi taktikleri, tedavinin etkinliğinin izlenmesi, hastalığın prognozunun belirlenmesi ve belirli bir bölgedeki mikobakterilerin ilaç direncinin epidemiyolojik izlenmesinin yapılması açısından önemlidir. ülke ve dünya topluluğu. Mikobakterilerin ilaç direncinin derecesi, hem ilacın antitüberküloz aktivitesine hem de lezyondaki konsantrasyonuna, maksimum terapötik doza, ilacın farmakokinetiğine ve diğer birçok faktöre bağlı olan belirlenmiş kriterlere göre belirlenir.
Kültürel yöntem, MBT'nin anti-tüberküloz antibiyotiklere duyarlılığını ve direncini belirlemeyi mümkün kılar. Mikobakterilerin ilaç direncini belirlemeye yönelik en yaygın yöntem, katı bir Lowenstein-Jensen besin ortamı üzerinde gerçekleştirilmelidir.
İlaç direncini belirlemeye yönelik tüm yöntemler iki gruba ayrılır:Şu anda uluslararası uygulamada mikobakterilerin anti-tüberküloz ilaçlara karşı ilaç duyarlılığını belirlemek için aşağıdaki yöntemler kullanılmaktadır:
- Lowenstein-Jensen ortamı veya Middlebrook 7N10 ortamı üzerinde orantı yöntemi
- Levenstein-Jensen'in yoğun yumurta ortamı üzerinde mutlak konsantrasyon yöntemi
- direnç katsayısı yöntemi
- Bactec 460/960 radyometrik yönteminin yanı sıra diğer otomatik ve yarı otomatik sistemler
- mutasyonları tespit etmek için moleküler genetik yöntemler (TB biyoçipleri, GeneXpert)
Mutlak konsantrasyon yöntemi çoğu durumda ilaç direncinin dolaylı olarak belirlenmesi için kullanılır. Lowenstein-Jensen besiyerinde belirtilen yöntemi kullanarak ilaç direncini belirlemenin sonuçları genellikle materyalin aşılanmasından en geç 2 - 2,5 ay sonra elde edilir. “Novaya” besin ortamının kullanılması bu süreleri önemli ölçüde azaltabilir.
Mutlak konsantrasyon yöntemi için görünüm 20'den fazla CFUİlacı kritik konsantrasyonda içeren besin ortamında mikobakterilerin görülmesi, bu mikobakteri suşunun ilaç direnci.
İlacı içeren bir besiyeri bulunan bir test tüpünde 20'den az küçük koloni büyürse ve kontrol tüpünde bol miktarda üreme varsa, kültürün belirli bir ilaç konsantrasyonuna duyarlı olduğu kabul edilir.
Bir kültürün, belirli bir test tüpünde bulunan ilacın konsantrasyonuna dirençli olduğu kabul edilir; eğer test tüpünde ortamla ("birleşik büyüme") 20'den fazla koloni büyümüş ve kontrolde bol miktarda çoğalmışsa.
Oranlar yöntemi. Yöntem, ilacın yokluğunda ve kritik konsantrasyonlarda varlığında gelişen izole bir kültürdeki mikobakterilerin sayısının karşılaştırılmasına dayanmaktadır. Bunu yapmak için hazırlanan mikobakteri süspansiyonu 10-4 ve 10-6 konsantrasyonuna kadar seyreltilir. Süspansiyonun her iki seyreltisi de ilaç içermeyen bir besin ortamına ve farklı ilaçlar içeren bir ortam seti üzerine aşılanır. İlaç içeren besiyerinde koloniler, ilacın bulunmadığı besiyerinde yetiştirilenlerin sayısının %1'inden daha fazla gelişirse, kültürün bu ilaca dirençli olduğu kabul edilir. Bu ilaca dirençli CFU sayısı %1'den az ise kültür duyarlı kabul edilir.
Direnç katsayısı yöntemi. Bu yöntem, belirli bir hastanın belirli bir suşu için belirlenen minimum inhibitör konsantrasyonunun (MIC), ilaca duyarlı standart bir suşun MIC'sine oranının belirlenmesine dayanmaktadır. N 37 Rv aynı deneyde test edilmiştir. Bu durumda zorlanma N 37 Rv deneyi kontrol etmek için değil, testi ayarlarken olası varyasyonları belirlemek için kullanılır. Bu açıdan bakıldığında bu yöntem yukarıda sıralanan üç yöntem arasında en doğru olanıdır ancak besin ortamı içeren çok sayıda test tüpü kullanılması gerektiğinden aynı zamanda en pahalı olanıdır. İkinci durum, kullanımını keskin bir şekilde sınırlamaktadır.
VASTES sistemi. Bu yöntem için hazırlanan sıvı besin ortamındaki ilaçların mutlak konsantrasyonları kullanılır. Sonuçlar otomatik olarak kaydedilir.
Antibiyotiklerin uzun geçmişi ve yaygın kullanımı, hassasiyeti dikkate almadan doğru kullanımdaki ihlaller, endikasyonlar, ulusal ekonomide yaygın kullanım - hayvancılık, bitkisel üretim, gıda endüstrisi - yeni bir karmaşık soruna yol açmıştır - ilaca direnç mikroorganizmalardan oluşur. Mikroorganizmaların direnci doğal, doğuştan veya sonradan kazanılmış olabilir.
Doğru (doğal doğuştan birincil) Direnç, hedef mikroorganizmalarda antibiyotik etkisinin olmaması veya birincil düşük geçirgenlik veya enzimatik inaktivasyon nedeniyle hedefin erişilememesi ile karakterize edilir. Doğal direnç, mikroorganizmaların sabit bir tür özelliğidir ve kolaylıkla tahmin edilebilir. Mikoplazmalarda hücre duvarının bulunmaması buna bir örnektir.
Kazanılmış direnç- bireysel bakteri suşlarının, gen mutasyonu, rekombinasyon vb. sonucunda elde edilen mikrobiyal popülasyonun ana bölümünü baskılayan antibiyotik konsantrasyonlarında canlı kalma özelliği.
Her durumda direnç oluşumu genetik olarak belirlenir - yeni genetik bilginin edinilmesi veya kişinin kendi genlerinin ifade düzeyindeki değişiklik.
İkincil direncin ana mekanizması, transpozonlar ve plazmidler tarafından taşınan direnç genlerinin (r-genleri) kazanılmasıdır.
AB'lerin bu plazmidlerin oluşumuna katkıda bulunmadığını, yalnızca evrime yardımcı olduklarını (seçim faktörü) hatırlamak önemlidir.
Aşağıdaki biyokimyasallar bilinmektedir Bakterilerde antibiyotik direncinin mekanizmaları:
1. Eylem hedefinin değiştirilmesi (yapı değişikliği)
2. Antibiyotik inaktivasyonu
3. Antibiyotiklerin mikrobiyal hücrelerden aktif olarak uzaklaştırılması
4. Mikrobiyal hücrenin dış yapılarının geçirgenliğinin ihlali
5. Metabolik bir “şant” oluşumu
Eylem hedefinin değiştirilmesi (yapısındaki değişiklik)– b-laktam antibiyotiklerin hedefleri peptidoglikan sentezinde rol oynayan enzimlerdir. İlgili genlerdeki mutasyonlar sonucu bu enzimlerin yapısında meydana gelen değişiklikler, antibiyotiklerin hedef enzimleri tanımaması ve doğrudan etki etmemesi anlamına gelir.
Antibiyotik inaktivasyonu– enzimatik. b-laktamazlar klinik olarak önemli mikroorganizmaların büyük çoğunluğunda bulunur. B-laktam halkasının bağlarından birinin hidrolizi sonucunda antibiyotik etkisiz hale gelir. Aminoglikozitlere karşı direncin ana mekanizması, bunların modifikasyon yoluyla enzimatik olarak inaktivasyonudur. Mikroorganizmaların R-plazmitleri, örneğin fosforilasyona, antibiyotiğin asetilasyonuna neden olabilen, bunun sonucunda yapısının değiştiği ve kural olarak inaktivasyonun meydana geldiği genler içerir. Modifiye edilmiş aminoglikozit molekülleri, ribozomlara bağlanma ve protein biyosentezini baskılama yeteneklerini kaybeder.
Bakterilerin penisilinlere ve sefalosporinlere karşı ikincil direncinin, beta-laktam antibiyotiklerin aktif merkezini yok eden enzimler olan beta-laktamazların plazmid bağımlı (çok daha az sıklıkla kromozomal) üretimi ile ilişkili olduğunu bir kez daha tekrarlayalım. 100'den fazla beta-laktamaz bilinmektedir, ancak bunların hepsi klinik olarak anlamlı bakteri direncine dahil değildir.
İki tane var beta-laktamaz türü - penisilinaz Ve sefalosporinazlar Bu oldukça keyfidir, çünkü her ikisi de farklı etkililiklere sahip olsa da her iki antibiyotiğe de saldırır. Gram pozitif bakteriler (örneğin stafilokok) genellikle üretir Bakterilerle temas etmeden önce ilaçları yok eden hücre dışı beta-laktamazlar. Onlar kategoriye ait uyarılabilir enzimler ve antibiyotiklerin kendileri sıklıkla bir indükleyici görevi görür. Bu gibi durumlarda dozajın arttırılması antibakteriyel etkiyi arttırmaz çünkü inaktive edici enzimin aşırı üretimine yol açar..
Gram negatif bakterilerde beta-laktamazlar periplazmada yoğunlaşır veya iç zarla ilişkilidir . Çoğu zaman kurucu niteliktedirler, onlar. Antibiyotiğin etkisi altında değişmeyen sabit bir seviyede üretilirler. Bu nedenle dozajın arttırılması bazen direncin aşılmasına yardımcı olur.Örneğin bel soğukluğunun tedavisini hatırlayabiliriz: İlk başta gonokok benzilpenisiline karşı inanılmaz bir hassasiyet gösterdi, ancak son 30 yılda dozajının sürekli olarak arttırılması gerekti.
Doğal penisilinlere karşı direncin hızlı gelişiminin kötü şöhretli bir örneği Staphylococcus aureus'tur. Duyarlılık testi yapılmaksızın, bugün yeni izole edilmiş herhangi bir Staphylococcus aureus suşunun penisiline dirençli olarak kabul edilmesi tavsiye edilmektedir, bu da aslında bu özelliğin tür sıralamasını tanımaktadır. Ancak yakın zamanda beta-laktamlara karşı kesinlikle duyarlı olduğu düşünülen diğer bakteriler için pek çok istisna ortaya çıktı. Penisiline dirençli suşlar tüm gram pozitif ve gram negatif bakteriler arasında görülür, ancak felaket derecede hızlı beta-laktamaz direnci gelişimi örneği stafilokoklara özgüdür. Bunun nedeni, birçok bakteride direncin kromozomal (“hareketsiz”) temelde ortaya çıkması ve ancak daha sonra mobil r genlerine sahip türlerin baskın olmaya başlaması olabilir. Ayrıca beta-laktam antibiyotiklerin beta-laktamazlara olan afiniteleri de farklılık gösterir. Bunlardan bazıları (penisilinaz dirençli penisilinler, 3. kuşak sefalosporinler, imipenem) az sayıda beta-laktamaz tarafından hidrolize edilir ve (bunlara beta-laktamaz dirençli denir), diğerleri (örneğin ampisilin) çok daha duyarlıdır. Gram-negatif beta-laktamazlara karşı dirençli olan ancak gram-pozitif bakteriler (örneğin temosilin) tarafından yok edilen antibiyotikler vardır.
Beta-laktamazların aktivitesini baskılamakİnhibitörlerinin ilaçların bileşimine dahil edilmesi önerilmektedir - klavulanik asit ve penisillanik asit sülfonlar (sulbaktam, YTR-830, vb.). Beta-laktam ailesine aittirler ancak antibiyotik aktiviteleri zayıftır. Aynı zamanda beta-laktam halkasına sahip oldukları için beta-laktamazlarla mükemmel reaksiyona girerler ve onları yakalayarak "gerçek" antibiyotiklerin yok edilmesini önlerler. Enzim ve inhibitör, kırılgan bir kompleks oluşturmak için geçici bir ilişkiye girebilir, ancak daha sıklıkla enzimin geri döndürülemez inaktivasyonu meydana gelir. Engellenebilen beta-laktamazların aralığı, en yaygın gram-pozitif ve gram-negatif beta-laktamazlar dahil olmak üzere çok geniştir. Kararlı monomoleküler antibiyotikler elde etme fırsatına sahip olduklarında (yukarıya bakın), karmaşık karışımlar oluşturma yolunu seçmeleri garip görünebilir. Ancak gerçek şu ki, beta-laktamaz direncinin elde edilmesini sağlayan yapısal değişiklikler bazen ilacın antibakteriyel ve farmakolojik özelliklerini olumsuz yönde etkilemektedir (örneğin, penisilinaz dirençli penisilinlerin aktivitesi, doğal penisilinden 10-30 kat daha düşüktür). İnhibitörlerle kombinasyon, "klasik" beta-laktamların avantajlarını kullanarak bunu önlemenizi sağlar.
Genellikle r-plazmidlerin kaynakları makroorganizmanın normal mikroflorasıdır.
Antibiyotiklerin hücreden aktif olarak uzaklaştırılması– CPM'de mikroorganizmaların, antibakteriyel ilaçların aktif seçici olarak uzaklaştırılmasını gerçekleştiren çeşitli genler tarafından kodlanan taşıma sistemleri vardır; antibiyotiklerin hedeflerine ulaşmak için zamanları yoktur.
Dış yapıların geçirgenliğinin ihlali– Mutasyonlar sonucunda dış zardan taşımayı gerçekleştiren yapıların tamamen veya kısmen kaybedilmesi mümkündür. Örneğin, maddeleri sitoplazmik membran boyunca taşıyan porin proteinlerinin tamamen veya kısmen kaybı.
Metabolik bir “şant” oluşumu- bakterilerin antibiyotiklere karşı duyarsız olan hedef enzimlerin biyosentezi için metabolik yolları "bypass" etmesi sonucunda yeni genlerin edinilmesinin bir sonucu olabilir.