Escherichia coli grubunun bakterileri (koliform bakteriler). İçme suyunda bulunan koliform bakteriler

Koliformlar kimdir ve nerede yaşarlar?

Koliform bakteriler için GOST

Koliform mikroplarının tanımlanması ve miktarının belirlenmesine yönelik yöntemler için eyaletler arası bir standart geliştirilmiştir. Bu GOST gıda güvenliğini sağlar. GOST listesine dahil olan herhangi bir ürünün laboratuvar testlerinden geçmesi gerekir. Koliform değerlerinin kabul edilebilir olduğu laboratuvar testlerinden sonra ürünler satışa sunulur. Aşağıdakiler zorunlu araştırmaya tabidir:

Su.
Konserve yiyecek.
Et ürünleri.
Hayvan yemi.
Mutfak eşyaları ve ekipmanlar.

GOST'un süt ve süt ürünleri için geçerli olmadığını bilmek önemlidir. Toplu veya dökme olarak satın alınan tüm süt ve diğer süt ürünlerinin, koliform mikroorganizmaları yok etmek için pastörize edilmesi gerekir. Pastörizasyon – 30 dakika boyunca +80⁰С'ye ısıtma.

GOST suyun sıhhi ve bakteriyolojik durumunu izlemekle yükümlüdür. Koliformların varlığını belirlemek için su alınır:

Şehir su temin sistemi.
Açık su rezervuarları (nehirler, denizler, rezervuarlar).
İçme suyu kaynakları (kuyular, kaynaklar).
Yüzme havuzları.
Atık su (arıtmadan önce ve sonra).

Ellerinizi yıkayın!

Kaynatma veya pastörizasyon yoluyla her türlü koliform bakteri öldürülür. +60⁰C'nin üzerindeki sıcaklıklarda süt, et ve suda Escherichia ve Salmonella toksini kalmayacaktır. Kapı kolları veya masa yüzeyleri dezenfektan solüsyonla silinmelidir. Koliform bakteriler alkol veya başka bir antibakteriyel madde tarafından anında öldürülür. Ancak GOST ve yaşam deneyimine göre bağırsak hastalıklarını önlemenin en güvenilir yolu ellerinizi sabunla yıkamaktır. Sabunun alkali ortamı mikropların duvarlarını yok eder. Örneğin yolda ellerinizi yıkamanız mümkün değilse dezenfektanlı ıslak mendil veya el jeli kullanın.

"Toprağın sıhhi ve mikrobiyolojik çalışması. Su kütlelerinin mikroflorası." konusunun içindekiler tablosu:

Arasında sıhhi gösterge mikroorganizma grupları açıkça tanımlanmış sınırlar yoktur. Bazı mikroorganizmalar hem fekal hem de oral kontaminasyonun göstergesidir. Bazıları kendi kendini arındırma süreçlerinin göstergeleridir. Bu bakımdan tüm kutsal doğal alanlar biyolojik kirliliğin göstergesi olarak değerlendirilmektedir.

Hijyenik gösterge mikroorganizmaların A Grubu. İnsan ve hayvanların bağırsaklarında yaşayanları içerir. Mikroorganizmalar dışkı kontaminasyonunun göstergeleri olarak kabul edilir. Koliformları içerir - Escherichia, Enterococcus, Proteus, Salmonella. A grubuna ayrıca sülfit indirgeyen clostridia (Clostridium petfringens, vb.), termofiller, bakteriyofajlar, bakteroidler, Pseudomonas aeruginosa, kandida, Akinetobacter ve aeromonas dahildir.

Hijyenik gösterge mikroorganizmaların B Grubu. Üst solunum yolu ve nazofarinks sakinlerini içerir. Mikroorganizmalar oral kontaminasyonun göstergeleri olarak kabul edilir. Viridans, a- ve (3-streptokoklar, stafilokoklar (plazma pıhtılaştırıcı, lisitinaz pozitif, hemolitik ve antibiyotiğe dirençli; bazı durumlarda Staphylococcus aureus türü de belirlenir) içerir.

Hijyenik gösterge mikroorganizmaların C Grubu. Dış ortamda yaşayan saprofitik mikroorganizmaları içerir. Mikroorganizmalar kendi kendini temizleme süreçlerinin göstergeleri olarak kabul edilir. Proteolitik bakterileri, amonifikasyon bakterilerini ve nitrifikasyon bakterilerini, bazı spor oluşturan bakterileri, mantarları, aktinomisetleri, selülobakterileri, bdellovibriosları ve mavi-yeşil algleri içerir.

Hijyen indikatörü mikroorganizmaların ana grupları

Ana sıhhi gösterge mikroorganizmalarına koliform bakterileri, enterokoklar, Proteus, salmonella, Clostridium perfringens, termofilik bakteriler ve enterobakterilerin bakteriyofajlarını (kolifajlar) içerir.

Koli bakterileri

Escherichia coli tüm SPM grubunun temelini attı. Koliformlar Enterobacteriaceae familyasının çeşitli üyelerini içerir. Çalışmanın amacına ve nesnesine bağlı olarak, sıhhi gösterge niteliğindeki koliformlara çeşitli gereksinimler getirilmektedir. Geleneksel olarak üç alt gruba ayrılırlar ve çeşitli koşullar altında varlıkları, bir nesnenin veya substratın bakteriyolojik karakterizasyonu için kullanılır.

Alt grup I Escherichia coli Tanımlanmaya çalışılan ancak doğası gereği "saf" olan veya işlenmesi (örneğin termal) sonucunda saf hale gelen nesneler ve substratlar incelenirken mevcut olmaması gereken koliformları içerir. Bu tür özelliklere sahip olan nesne grubu aşağıdakileri içerir. İçme (artezyen, klorlu musluk, kuyu) ve damıtılmış su (damıtıcıdan veya boru hattından alınır). Termal olarak işlenmiş gıda ürünleri (pirzola, sosis, balık vb.). Ürünün kalınlığından alınan numuneler analiz edilir.

Süt(süt boru hatlarına girmeden önce pastörizatörden alınır), çorbalar, soslar, kompostolar, ana yemekler (kazanlardan alınır). Dezenfeksiyon tedavisinin etkinliğinin izlenmesi sırasında, öngörülen süre içerisinde (tedaviden en erken 45 dakika ve en geç 1 saat sonra) yapılan yıkamalar.

Escherichia coli'nin bu alt grubunun bakterileri 37 °C'de laktozu ve glikozu veya yalnızca glikozu gaza fermente eder ve oksidaz aktivitesi göstermez. Bu alt grup Escherichia ha //, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter ve Enterobacteriaceae familyasının diğer temsilcilerini içerir. "Temiz" olarak sınıflandırılmayan nesnelerde bunların varlığına izin verilir.

Alt grup II Escherichia coli belirsiz dışkı kontaminasyonunu gösteren koliformları içerir. Mikroorganizmalar 43-44,5 °C'de laktozu ve glikozu asit ve gaza fermente ederler. Bu alt grup, yüksek sıcaklıklarda gaz oluşturma yeteneğini koruyan bakterileri (E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter vb.) içerir. Substratı kontaminasyondan korumak mümkün değilse, koliformlara da benzer gereklilikler uygulanır. Bu durumda kendimizi yalnızca epidemiyolojik hastalığın göstergelerini belirlemekle sınırlamalıyız. Bu tür nesneler şunları içerir: açık rezervuarlardan gelen su, atık su, toprak ve ısıl işlemden sonra yüksek kirlenme riski olan tüm gıda ürünleri. Bu gibi durumlarda, katı gıda ürünleri (yüzey tabakası), sıvı gıda ürünleri, servis edilen ikinci ve üçüncü yemekler ve ekipman ve mutfak aletlerinden kaynaklanan yıkamalar incelenir. Mahsuller 43-44,5 °C sıcaklıkta yetiştirilir. E. coli, laktozu ve glikozu veya sadece glikozu fermente etme yeteneğiyle diğer bakterilerden ayrılır.

Alt grup III Escherichia coli taze dışkı kontaminasyonunu gösteren koliformları içerir. Bu gruptaki bakterilerin ayırt edici bir özelliği, laktozu 43-44,5 °C'de gaza parçalama yeteneğidir.

Suyu dezenfekte ettiğimiz kişilere adanmış bir konu (“Lejyoner hastalığı (lejyonelloz)” makalesine bakın). Ancak suda yaşayan ve örneğin ultrafiltrasyon kullanarak kendinizi korumanız gereken çok daha fazla bakteri var. Bu nedenle bugünkü konumuz suyumuzdaki bakteriler. Suyumuzda hangi bakterilerin yaşamaması gerektiğini size biraz anlatacağız.

Suyumuzdaki bakteriler, aşağıda tartışacağımız birçok nedenden dolayı istenmeyen bir olgudur. Bakteriler genel olarak suyun mikrobiyolojik analizi ile belirlenir ve bir ölçü birimi ile toplam mikrobiyal sayı olarak ifade edilir. koloni oluşturan birimler", k.o.e. (veya Ukraynaca'da k.u.o, koloni oluşturan birimler - İngilizce'de CFU).

Toplam mikrobiyal sayım, yalnızca belirli yetiştirme koşulları altında besin ortamında çıplak gözle görülebilen koloniler oluşturanları değil, sudaki bakterilerin genel seviyesini yansıtır.

Toplam mikrobiyal sayıyla ifade edilen bir bütün olarak bakteriler, çeşitli bakteri gruplarını ve alt gruplarını içerir. Bu:

Koliform bakteriler (sıcağa dayanıklı olanlar dahil).
Sülfit azaltıcı clostridia.

Clostridium hakkında birkaç söz. Clostridia bir tür standarttır. Çok inatçıdırlar veya bilimsel olarak konuşursak dezenfeksiyona karşı dayanıklıdırlar, bu da onları bir tür gösterge haline getirir - clustridia yoktur ve başka, hatta daha tehlikeli mikroorganizmalar yoktur.

Ve son olarak, suyun mikrobiyolojik analizinde tökezleyen bloklardan biri olan en yaygın gösterge olan koliform bakterilere dikkat edelim.

Bu arada, tökezleyen engel, bunların genellikle patojenik bakteriler olduğuna inanılmasıdır ve bu tür sudan bir yudum alırsanız dizanteri veya kolera neredeyse anında başlar. Ancak bu koliform bakteriler için tamamen doğru değildir. Sözlük tanımına göre,

Koliform bakterileri, Escherichia coli grubunun bakterileridir (koliformlar, aynı zamanda koliform ve koliform bakteriler olarak da adlandırılır) - sıhhi mikrobiyoloji tarafından dışkı kontaminasyonunun bir belirteci olarak kullanılan, morfolojik ve kültürel özelliklerle şartlı olarak ayırt edilen, enterobakteri ailesinden bir grup bakteri

Normal dilde bu, "Escherichia coli" bakterisine (Escherichia coli, Theodor Escherich'ten adını alan; E.coli olarak kısaltılır) bir şekilde benzeyen tüm bakterilerin "koliform bakteriler", yani bakteriler adı verilen tek bir grupta birleştirildiği anlamına gelir. , "E.coli"ye benzer. Ayrıca koliform organizmalar içme suyu kalitesinin uygun mikrobiyal göstergeleridir ve uzun yıllardan beri bu şekilde kullanılmaktadır. Bunun nedeni her şeyden önce tespit edilmesinin ve ölçülmesinin kolay olmasıdır.

"Koliform organizmalar" (veya "koliform bakteriler") terimi, öncelikle insanların ve çoğu sıcakkanlı hayvanın (çiftlik hayvanları ve su kuşları gibi) alt sindirim kanalında yaşayan ve üreyen gram negatif, çubuk şekilli bir bakteri sınıfını ifade eder. ). Sonuç olarak, genellikle dışkı atıklarıyla birlikte suya girerler ve birkaç hafta boyunca hayatta kalabilirler, ancak (büyük çoğunlukta) üreme yeteneğinden yoksundurlar.

Buna göre içme suyunda bu bakterilerin bulunması, suyun atık sudan kirlenme ihtimalinin olduğu anlamına gelir.
İkincisi, koliform bakteriler arasında öldürücü bakteri türleri (patojenik çeşitler) varsa, o zaman hastalıklar da ortaya çıkabilir.

Ek olarak, koliform bakteriler arasında sıklıkla başka bir grup tanımlanır - ısıya dayanıklı koliform bakteriler. Bunlar “Escherichia coli”ye benzeyen, yiyecekleri daha yüksek sıcaklıklarda (44 - 45 o C) sindirebilen bakterilerdir ve Escherichia cinsinin kendisini (daha çok E. Coli olarak bilinir) ve diğerlerini içerir.

Termotolerant koliform bakteriler, güncel fekal kontaminasyonu işaret ettikleri için mikrobiyolojik analizde ayrı bir alt grup olarak sınıflandırılır. Üstelik bunların belirlenmesi nispeten kolaydır; öyleyse neden bunları analizinize dahil etmiyorsunuz?

Öyle olsa bile, sudaki bakteri seviyesinin artması endişe verici bir işarettir ve ortaya çıktığında suyla bir şeyler yapmanız (örneğin kullanmaya başlamanız) gerekir.

Böylece suyumuzdaki bakterilere teorik olarak genel bir bakış yaptık ve artık pratiğe geçebiliriz.

Bazen şu durum ortaya çıkar: Birisi suyun mikrobiyolojik analizini yapmak ister. Bir su örneği alıyor, onu sıhhi ve epidemiyoloji istasyonuna götürüyor ve orada... Binlerce ve binlerce bakteri. Sorun şu ki bu, bu bakterilerin kaynak suyunda olduğu anlamına gelmiyor. Aslında bir su numunesinde görünmeleri için üç seçenek vardır:

bakteriler aslında suda mevcuttur;
ekipman ve boru hatlarının kurulumu sırasında girilen;
Mikrobiyoloji için uygun olmayan örnekleme yapıldı.

Sudaki fazla bakteri miktarının üçüncü nedenini dışlamak için su örneğini doğru şekilde almanız gerekir. Bu doğrultuda önemli hususları dikkatinize sunuyoruz. uygun numune alma kuralları Mikrobiyolojik analiz için su. Evet, ihtiyacınız var:

Yalnızca daha önce otoklavda dezenfekte edilmiş şişeleri kullanın.
Örnek almadan önce ellerinizi sabunla yıkayın.
Numune alınacak musluğun ağzı alkolle silinmeli veya çakmak veya kibrit aleviyle yakılmalıdır.
Ağzına kadar su dolu şişeyi mümkün olan en kısa sürede (örneğin iki saat içinde) laboratuvara götürün.

Bu nedenle şu sonuca varabiliriz: Bakteriler yalnızca hastalıklara yol açabilecekleri için değil, aynı zamanda yan ürünler (örneğin çok fazla organik madde, dışkı suyu vb.) nedeniyle su kirliliğinin bir göstergesi oldukları için suda olmamalıdır. .). Başka bir deyişle, bu veriler dışkı kirliliğinin tespiti açısından çok az değere sahiptir ve bir yeraltı suyundan alınan suyun analizinde koloni sayısında ani bir artış olmasına rağmen içme suyu kaynaklarının güvenliğinin değerlendirilmesinde önemli bir gösterge olarak değerlendirilmemelidir. kaynak akifer kirliliğinin erken bir sinyali olabilir.

Buna göre suyumuzdaki bakteriler olması gerektiği gibi değil :)

1. Literatür kaynaklarının gözden geçirilmesi

.1 Escherichia coli'nin taksonomisi

Bilimsel sınıflandırma

Etki Alanı: Bakteriler

Tür: Proteobakteriler

Sınıf: Gamaproteobakteriler

Sipariş: Enterobakteriler

Aile: Enterobacteriaceae

Cins: Escherichia

Tür: Coli (Escherichia coli)

Uluslararası bilimsel ad

Escherichia coli (Migula 1895)

1.2 Bakteri hücresinin yapısı ve kimyasal bileşimi

Bakteri hücresinin iç organizasyonu karmaşıktır. Her sistematik mikroorganizma grubunun kendine özgü yapısal özellikleri vardır.

Bakteri hücresi yoğun bir zarla kaplıdır. Sitoplazmik membranın dışında yer alan bu yüzey tabakasına hücre duvarı denir. Duvar, koruyucu ve destekleyici işlevleri yerine getirir ve ayrıca hücreye kalıcı, karakteristik bir şekil verir (örneğin, bir çubuk veya kok şekli) ve hücrenin dış iskeletini temsil eder. Bu yoğun kabuk, bakterileri bitki hücrelerine benzeterek onları yumuşak kabuklu hayvan hücrelerinden ayırır. Bakteri hücresinin içindeki ozmotik basınç, dış ortama göre birkaç kat, bazen de onlarca kat daha yüksektir. Dolayısıyla hücre, hücre duvarı gibi yoğun ve sert bir yapı tarafından korunmadığı takdirde hızla parçalanır.

Hücre duvarının kalınlığı 0,01-0,04 mikrondur. Kuru bakteri kütlesinin %10 ila %50'sini oluşturur. Hücre duvarını oluşturan madde miktarı bakteri büyümesi sırasında değişir ve genellikle yaşla birlikte artar.

Bugüne kadar incelenen hemen hemen tüm bakterilerdeki sert yapılarının temeli olan duvarların ana yapısal bileşeni, mureindir (glikopeptit, mukopeptit). Bu, nitrojen taşıyan şekerler - amino şekerler ve 4-5 amino asit içeren karmaşık bir yapıya sahip organik bir bileşiktir. Üstelik hücre duvarı amino asitleri doğada nadiren bulunan alışılmadık bir şekle (D-stereoizomerler) sahiptir.

İlk olarak 1884 yılında Christian Gram tarafından önerilen boyama yöntemi kullanılarak bakteriler iki gruba ayrılabilir: gram pozitif ve gram negatif. .

Gram-pozitif organizmalar, kristal viyole gibi bazı anilin boyalarını bağlayabilir ve iyot ve ardından alkol (veya aseton) ile muameleden sonra iyot-boya kompleksini tutabilir. Bu kompleksin etil alkolün etkisi altında yok edildiği (hücrelerin rengi değişir) aynı bakteriler gram negatif olarak sınıflandırılır.

Gram pozitif ve gram negatif bakterilerin hücre duvarlarının kimyasal bileşimi farklıdır. Gram pozitif bakterilerde hücre duvarlarının bileşimi, mukopeptitlere ek olarak polisakkaritler (karmaşık, yüksek moleküler şekerler), teikoik asitleri (şekerler, alkoller, amino asitler ve fosforik asitten oluşan bileşim ve yapıdaki karmaşık bileşikler) içerir. ). Polisakaritler ve teikoik asitler duvar çerçevesi - murein ile ilişkilidir. Gram pozitif bakterilerin hücre duvarını oluşturan bu bileşenlerin hangi yapıyı oluşturduğunu henüz bilmiyoruz. İnce kesitlerin (katmanlama) elektronik fotoğrafları kullanılarak duvarlarda gram pozitif bakteri tespit edilmedi. Muhtemelen tüm bu maddeler birbirine çok sıkı bir şekilde bağlıdır.

Gram-negatif hücrelerin duvarları, karmaşık komplekslerdeki (lipoproteinler ve lipopolisakkaritler) proteinler ve şekerlerle ilişkili önemli miktarda lipit (yağ) içerir. Gram negatif bakterilerin hücre duvarlarında gram pozitif bakterilere göre genellikle daha az murein bulunur. Gram negatif bakterilerin duvar yapısı da daha karmaşıktır. Elektron mikroskobu kullanılarak bu bakterilerin duvarlarının çok katmanlı olduğu bulundu.

İç katman müreinden oluşur. Üstünde gevşek bir şekilde paketlenmiş protein moleküllerinden oluşan daha geniş bir katman bulunur. Bu katman da bir lipopolisakkarit katmanıyla kaplanır. En üst katman lipoproteinlerden oluşur.

Hücre duvarı geçirgendir: içinden besinler serbestçe hücreye geçer ve metabolik ürünler çevreye çıkar. Yüksek moleküler ağırlığa sahip büyük moleküller kabuktan geçemez.

Birçok bakterinin hücre duvarı, üst kısımda bir mukoza tabakası - bir kapsül - ile çevrilidir. Kapsülün kalınlığı, hücrenin çapından birçok kez daha büyük olabilir ve bazen o kadar incedir ki, yalnızca bir elektron mikroskobu - bir mikrokapsül - ile görülebilir.

Kapsül hücrenin önemli bir parçası değildir; bakterilerin bulunduğu koşullara bağlı olarak oluşur. Hücre için koruyucu bir örtü görevi görür ve su metabolizmasına katılarak hücrenin kurumasını önler.

Kapsüllerin kimyasal bileşimi çoğunlukla polisakkaritlerdir. Bazen glikoproteinlerden (şeker ve proteinlerin karmaşık kompleksleri) ve polipeptitlerden (Bacillus cinsi), nadir durumlarda liflerden (Acetobacter cinsi) oluşurlar.

Bazı bakteriler tarafından substrata salgılanan mukoza maddeleri, örneğin bozulmuş süt ve biranın mukoza-ipliksi kıvamına neden olur.

Bir hücrenin çekirdeği ve hücre duvarı dışındaki tüm içeriğine sitoplazma denir. Sitoplazmanın (matris) sıvı, yapısız fazı ribozomları, membran sistemlerini, mitokondriyi, plastidleri ve diğer yapıları ve ayrıca yedek besinleri içerir. Sitoplazma son derece karmaşık, ince bir yapıya (katmanlı, granüler) sahiptir. Elektron mikroskobu yardımıyla hücre yapısına ilişkin pek çok ilginç detay ortaya çıkarıldı.

Bakteri protoplastının özel fiziksel ve kimyasal özelliklere sahip dış lipoprotein tabakasına sitoplazmik membran denir.

Sitoplazmanın içinde tüm hayati yapılar ve organeller bulunur.

Sitoplazmik membran çok önemli bir rol oynar - maddelerin hücreye girişini ve metabolik ürünlerin dışarıya salınmasını düzenler.

Besinler, enzimlerin dahil olduğu aktif bir biyokimyasal sürecin sonucu olarak membrandan hücreye girebilir. Ek olarak, esas olarak hücre duvarı ve kapsül bileşenleri olmak üzere bazı hücre bileşenlerinin sentezi membranda meydana gelir. Son olarak en önemli enzimler (biyolojik katalizörler) sitoplazmik membranda bulunur. Enzimlerin membranlar üzerindeki düzenli dizilişi, aktivitelerini düzenlemeyi ve bazı enzimlerin diğerlerinin tarafından yok edilmesini önlemeyi mümkün kılar. Membrana bağlı olan ribozomlar - üzerinde proteinin sentezlendiği yapısal parçacıklar. Membran lipoproteinlerden oluşur. Yeterince güçlüdür ve kabuksuz bir hücrenin geçici olarak varlığını sağlayabilir. Sitoplazmik membran hücrenin kuru kütlesinin %20'sini oluşturur.

Bakterilerin ince kesitlerinin elektronik fotoğraflarında, sitoplazmik membran, iki koyu katman (protein) arasına sıkıştırılmış açık renkli bir katmandan (lipidler) oluşan, yaklaşık 75A kalınlığında sürekli bir iplikçik olarak görünür. Her katmanın genişliği 20-30A'dır. Böyle bir zara temel denir.

Plazma zarı ile hücre duvarı arasında desmos - köprü şeklinde bir bağlantı vardır. Sitoplazmik membran sıklıkla hücre içine invaginasyonlara (invajinasyonlara) yol açar. Bu invaginasyonlar sitoplazmada mezozom adı verilen özel membran yapıları oluşturur. Bazı mezozom türleri sitoplazmadan kendi membranlarıyla ayrılmış yapılardır. Bu zar keselerinin içinde çok sayıda vezikül ve tübül bulunur. Bu yapılar bakterilerde çeşitli işlevleri yerine getirir. Bu yapılardan bazıları mitokondri analoglarıdır. Diğerleri endoplazmik retikulum veya Golgi aparatının işlevlerini yerine getirir. Sitoplazmik membranın istilasıyla bakterilerin fotosentetik aparatı da oluşur. Sitoplazmanın yayılmasından sonra, zar büyümeye devam eder ve bitki kloroplast granüllerine benzer şekilde tilakoid yığınlar adı verilen yığınlar oluşturur. Çoğunlukla bakteri hücresinin sitoplazmasının çoğunu dolduran bu zarlarda, fotosentez işlemini gerçekleştiren pigmentler (bakterioklorofil, karotenoidler) ve enzimler (sitokromlar) lokalize olur.

Bakterilerin sitoplazması, 200A çapında protein sentezleyen parçacıklar olan ribozomlar içerir. Bir kafeste binden fazlası var. Ribozomlar RNA ve proteinden oluşur. Bakterilerde birçok ribozom sitoplazmada serbestçe bulunur, bazıları membranlarla ilişkili olabilir.

Bakteri hücrelerinin sitoplazması genellikle çeşitli şekil ve boyutlarda granüller içerir. Ancak bunların varlığı bir mikroorganizmanın kalıcı bir işareti olarak kabul edilemez; genellikle büyük ölçüde ortamın fiziksel ve kimyasal koşullarıyla ilgilidir. Birçok sitoplazmik kapanım, enerji ve karbon kaynağı olarak hizmet eden bileşiklerden oluşur. Bu rezerv maddeler vücuda yeterli besin sağlandığında oluşur ve tam tersi, vücut beslenme açısından daha az elverişli koşullar altında bulunduğunda kullanılır.

Birçok bakteride granüller nişasta veya diğer polisakkaritlerden (glikojen ve granüloza) oluşur. Şeker açısından zengin bir ortamda büyüdüğünde bazı bakterilerin hücre içinde yağ damlacıkları bulunur. Granüler kalıntıların bir diğer yaygın türü ise volütindir (metakromatin granülleri). Bu granüller polimetafosfattan (fosforik asit kalıntıları içeren bir rezerv maddesi) oluşur. Polimetafosfat vücut için fosfat grupları ve enerji kaynağı olarak hizmet eder. Kükürt içermeyen ortamlar gibi olağandışı beslenme koşulları altında bakterilerin volutin biriktirme olasılığı daha yüksektir. Bazı kükürt bakterilerinin sitoplazmasında kükürt damlacıkları bulunur.

Çeşitli yapısal bileşenlere ek olarak sitoplazma, sıvı bir kısımdan (çözünür kısım) oluşur. Proteinler, çeşitli enzimler, t-RNA, bazı pigmentler ve düşük molekül ağırlıklı bileşikler (şekerler, amino asitler) içerir.

Sitoplazmada düşük molekül ağırlıklı bileşiklerin bulunması sonucu hücresel içeriklerin ve dış ortamın ozmotik basıncında farklılık ortaya çıkar ve bu basınç farklı mikroorganizmalar için farklı olabilir. En yüksek ozmotik basınç gram pozitif bakterilerde gözlenir - 30 atm; gram negatif bakterilerde 4-8 atm'den çok daha düşüktür.

Nükleer madde, deoksiribonükleik asit (DNA), hücrenin orta kısmında lokalizedir.

Bakterilerin daha yüksek organizmalar (ökaryotlar) gibi bir çekirdeği yoktur, ancak kendi analoğuna - "nükleer eşdeğeri" - nükleoide sahiptir. , nükleer maddenin evrimsel olarak daha ilkel bir organizasyon şeklidir. Gerçek bir çekirdeğe sahip olmayan ancak onun bir benzerine sahip olan mikroorganizmalar prokaryot olarak sınıflandırılır. Tüm bakteriler prokaryottur. Çoğu bakterinin hücrelerinde DNA'nın büyük bir kısmı bir veya daha fazla yerde yoğunlaşmıştır. Bakterilerde DNA, gerçek çekirdeklerin aksine daha az sıkı bir şekilde paketlenmiştir; Bir nükleoidin bir zarı, bir nükleolusu veya bir kromozom seti yoktur. Bakteriyel DNA, ana proteinler (histonlar) ile ilişkili değildir ve nükleoidde bir fibril demeti şeklinde bulunur.

Bazı bakterilerin yüzeyinde ek yapılar bulunur; Bunlardan en yaygın olanı flagella'dır - bakterilerin hareket organları.

Flagellum, iki çift disk kullanılarak sitoplazmik membranın altına sabitlenir. Bakterilerde bir, iki veya daha fazla flagella bulunabilir. Konumları farklıdır: hücrenin bir ucunda, iki ucunda, tüm yüzey boyunca. Bakteriyel flagella'nın çapı 0,01-0,03 mikrondur, uzunlukları hücrenin uzunluğundan birkaç kat daha fazla olabilir. Bakteriyel flagella, bir protein olan flagellinden oluşur ve bükülmüş sarmal filamentlerden oluşur.

1.3 Escherichia coli ve temsilcilerinin morfolojisi

coli mikroflorası

Escherichia coli, yuvarlak uçlu, polimorfik fakültatif anaerobik kısa (uzunluk 1-3 µm, genişlik 0,5-0,8 µm) gram negatif bir çubuktur. Smearlardaki suşlar spor ve peritrik oluşturmadan rastgele düzenlenir. Bazı suşların mikrokapsülü ve pilileri vardır ve sıcakkanlı organizmaların alt bağırsaklarında yaygın olarak bulunurlar. E. coli'nin çoğu türü zararsızdır ancak O157:H7 serotipi insanlarda ciddi gıda zehirlenmesine neden olabilir.

Coli grubunun bakterileri basit besin ortamlarında iyi gelişir: et-pepton suyu (MPB), et-pepton agar (MPA). Endo ortamında orta büyüklükte düz kırmızı koloniler oluştururlar. Kırmızı koloniler koyu metalik parlaklığa sahip olabilir (E. coli) veya hiç parlaklığa sahip olmayabilir (E. aerogenes).

Laktoz, glikoz ve diğer şekerlerin yanı sıra alkollere karşı yüksek enzimatik aktiviteye sahiptirler. Oksidaz aktivitesi yoktur. Bakteriler, 37°C sıcaklıkta laktozu parçalama yeteneklerine göre uluslararası standartlara göre oluşturulan laktoz negatif ve laktoz pozitif Escherichia coli (LKP) veya koliform olarak ikiye ayrılır. LCP grubundan, 44,5°C sıcaklıkta laktozu fermente edebilen fekal koliformlar (FEC) kolilerin her zaman sadece gastrointestinal sistemde yaşamamalarını sağlar; çevrede bir süre hayatta kalma yetenekleri onları önemli kılar. dışkı kontaminasyonunun varlığı açısından numunelerin test edilmesi için gösterge.

Yaygın koliform bakteriler (TCB), diferansiyel laktoz ortamında büyüyebilen, laktozu asit, aldehit ve gaza 37 +/- 1°C sıcaklıkta 24 - 48 saat boyunca fermente edebilen gram negatif, spor oluşturmayan çubuklardır.

Koliform bakterileri (koliformlar), öncelikle insanların ve çoğu sıcakkanlı hayvanın (çiftlik hayvanları ve su kuşları gibi) alt sindirim kanalında yaşayan ve üreyen bir grup gram negatif çubuktur. Vvoda genellikle dışkı atıklarında bulunur ve birkaç hafta boyunca hayatta kalabilirler, ancak (büyük çoğunlukta) çoğalmazlar.

Isıya dayanıklı koliform bakteriler, dışkı bakterilerinden su arıtımının etkinliğinin değerlendirilmesinde önemli bir rol oynar. Daha doğru bir gösterge E. coli'dir (Escherichia coli), çünkü diğer bazı ısıya dayanıklı koliformların kaynağı sadece dışkı suyu olamaz. Aynı zamanda, ısıya dayanıklı koliformların toplam konsantrasyonu çoğu durumda E. coli konsantrasyonuyla doğru orantılıdır ve bunların dağıtım ağındaki ikincil büyümeleri olası değildir (suda yeterli besin maddesinin bulunduğu, belirli sıcaklıklarda olduğu durumlar hariç). 13°C'nin üzerinde

Termotolerant koliform bakteriler (TCB) - yaygın koliform bakteriler arasındadır, tüm özelliklerine sahiptir ve ayrıca 24 saat boyunca 44 +/- 0,5 ° C sıcaklıkta laktozu asit, aldehit ve gaza fermente edebilir.

Escherichia cinsini ve daha az ölçüde Citrobacter, Enterobacter ve Klebsiella'nın bireysel suşlarını içerir. Bu organizmalardan yalnızca E. coli spesifik olarak dışkı kökenlidir ve insan ve hayvan dışkısında her zaman büyük miktarlarda bulunur ve dışkıyla kirlenmemiş su ve toprakta nadiren bulunur. E. coli'nin saptanmasının ve tanımlanmasının, kontaminasyonun dışkı yapısını belirlemek için yeterli bilgi sağladığına inanılmaktadır.

Koliformlar evsel atık sularda ve hayvancılık çiftliklerinin yüzeysel akışında büyük miktarlarda bulunur. Merkezi içme ve kullanma suyu temini için kullanılan su kaynaklarında, yaygın koliformların sayısının 1000 birimden (CFU/100 ml, CFU - koloni oluşturan birimler) ve ısıya dayanıklı koliformların - 100 birimden fazla olmamasına izin verilir. İçme suyunda 100 ml'lik numunede koliform tespit edilmemelidir. E. coli'nin bulunmaması koşuluyla, herhangi bir 12 aylık dönemde toplanan numunelerin %5'inden fazlasında koliform organizmaların dağıtım sistemine ara sıra girmesi kabul edilebilir değildir.

Suda koliform organizmaların varlığı, yetersiz arıtımı, ikincil kirliliği veya sudaki fazla besin maddesinin varlığını gösterir.

2. Malzemeler ve araştırma yöntemleri

Nispeten mikrobiyal olarak temiz suyu patojenik mikroorganizmaların varlığı açısından incelerken, suda ihmal edilebilir miktarlarda bulunan istenen mikrofloranın konsantre edilmesi gerekir. Açık sularda ve atık sularda bağırsak enfeksiyonlarının patojenlerinin, baskın bir saprofitik mikroflora kütlesinin arka planına karşı tespiti, istenen bakterilerin, eşlik eden mikrofloranın büyümesini engelleyen birikim ortamlarında yoğunlaşması durumunda en etkili yöntemdir. Sonuç olarak, değişen derecelerde genel mikrobiyal kontaminasyona sahip suyu analiz ederken, patojenik mikroflorayı izole etmek için belirli yöntemler kullanılır.

Açık sular genellikle önemli miktarda askıda katı madde içeriğiyle karakterize edilir; bulanıklık, sıklıkla renk, düşük tuz içeriği, nispeten düşük sertlik, büyük miktarda organik madde varlığı, nispeten yüksek oksitlenebilirlik ve önemli bakteri içeriği . Nehir suyu kalitesindeki mevsimsel dalgalanmalar genellikle oldukça keskindir. Taşkınlar sırasında suyun bulanıklığı ve bakteri kirliliği büyük ölçüde artar, ancak sertliği (alkalinite ve tuzluluk) genellikle azalır. Su kalitesindeki mevsimsel değişiklikler yılın belirli dönemlerinde su arıtma tesislerinin işleyişini önemli ölçüde etkilemektedir.

1 ml sudaki mikrop sayısı, içindeki besinlerin varlığına bağlıdır. Su organik kalıntılarla ne kadar kirlenirse, mikroplar da o kadar fazla olur. Özellikle açık rezervuarlar ve nehirler mikrop açısından zengindir. İçlerindeki en fazla sayıda mikrop, kıyı bölgelerinin yüzey katmanlarında (su yüzeyinden 10 cm'lik bir katmanda) bulunur. Kıyıdan uzaklaştıkça ve derinlik arttıkça mikrop sayısı azalır.

Nehir alüvyonu mikroplar açısından nehir suyundan daha zengindir. Çamurun yüzey katmanında o kadar çok bakteri var ki onlardan bir film oluşuyor. Bu film çok sayıda filamentöz kükürt bakterisi ve demir bakterisi içerir; bunlar hidrojen sülfürü sülfürik asite oksitler ve böylece hidrojen sülfürün engelleyici etkisini önler (balık ölümü önlenir).

Kentsel alanlardaki nehirler genellikle evsel ve dışkısal atık sulardan gelen atık suyun doğal alıcılarıdır, dolayısıyla nüfuslu bölgelerde mikrop sayısı keskin bir şekilde artar. Ancak nehir şehirden uzaklaştıkça mikrop sayısı giderek azalıyor ve 3-4 onlarca kilometre sonra tekrar orijinal değerine yaklaşıyor. Suyun bu şekilde kendi kendini temizlemesi bir dizi faktöre bağlıdır: mikrobiyal cisimlerin mekanik çökelmesi; mikroplar tarafından sindirilebilen su besin maddelerinde azalma; doğrudan güneş ışınlarına maruz kalma; bakterileri protozoa vb. yoluyla yok etmek.

Patojenler atık su ile nehirlere ve rezervuarlara girebilir. Bruselloz basili, tularemi basili, çocuk felci virüsü, şap hastalığı virüsü ve ayrıca bağırsak enfeksiyonlarının patojenleri - tifo basili, paratifo basili, dizanteri basili, Vibrio cholerae - suda uzun süre kalabilir ve su haline gelebilir. bulaşıcı hastalıkların kaynağıdır. Arıza durumunda meydana gelen su şebekesine patojen mikropların girmesi özellikle tehlikelidir. Bu nedenle rezervuarların durumu ve bunlardan sağlanan musluk suyu üzerinde sıhhi biyolojik kontrol oluşturulmuştur.

2.1 Su akış hızını ölçmek ve belirlemek için hidrometrik şamandıra yöntemi

Su akış hızını ölçmek ve belirlemek için, akışa indirilen bir nesnenin (şamandıra) hareketinin aletler veya çıplak göz kullanılarak izlenmesine dayanan bir şamandıra yöntemi vardır. Kıyıdan veya bir tekneden küçük nehirlerdeki suya şamandıralar atılır. Kronometre kullanılarak, şamandıranın, aralarındaki mesafe bilinen iki bitişik hedef arasındaki süresi ve geçişi belirlenir. Akıntının yüzey hızı şamandıranın hızına eşittir. Şamandıranın kat ettiği mesafenin gözlem süresine bölünmesiyle akış hızı elde edilir.

2.2 Numunelerin su toplanması, depolanması ve taşınması

Bakteriyolojik analiz için su numuneleri sterilite kurallarına uygun olarak alınır: steril şişelerde veya steril cihazlarla - 1 litre miktarındaki şişe ölçüm cihazlarıyla.

Şişe batometresi olarak adlandırılan cihaz, açık rezervuarlardan, atık sulardan, yüzme havuzlarından ve kuyulardan su toplamak için uygundur.

Sudaki bağırsak bakteriyel enfeksiyonlarının patojenlerini tespit etmeye yönelik kılavuzlar.

Açık rezervuarlardan su numuneleri alırken aşağıdaki noktalar sağlanmalıdır: durgunluk noktasında ve en hızlı akışın olduğu yerde (yüzeyden ve 50 - 100 cm derinlikte).

Şişe şişe ölçer. Bathometreler, farklı derinliklerden su numuneleri almak için çeşitli tasarımlara sahip cihazlardır. Klasik haliyle bunlar belli bir derinliğe indirilebilen, daha sonra kapatılıp çıkarılabilen silindirlerdir. Klasik bir batometreyi kendiniz yapmak kolay değildir. Ancak bunun yerine, dar boyunlu, bir tür ağırlıkla ağırlıklandırılmış ve bir mantarla, tercihen bir mantarla tıkanmış basit bir cam veya plastik şişe kullanabilirsiniz. Halatlar şişenin boynuna ve mantarına bağlanır. Şişeyi istenen derinliğe indirdikten sonra (asıl mesele batmasıdır, yük bunun içindir), kapağı çıkarmanız gerekir - bu yüzden sıkıca kapatmamalısınız. Şişeye istenilen derinlikte dolması için süre verildikten sonra (1-2 dakika) yüzeye çekilir. Bu mümkün olduğu kadar enerjik bir şekilde yapılmalıdır - yüksek bir yükselme hızı ve dar bir boyun ile üstteki katmanlardan gelen su pratik olarak içeri girmeyecektir.
Bathometre kullanılarak yüzeye çıkarılan numuneler ayrıca plankton ağı kullanılarak "kalınlaştırılmalı" ve ardından süzülen suyun hacmi hesaplanmalıdır. Bu hacmin mümkün olduğu kadar büyük olması gerektiğinden, şişe ölçer mümkün olduğu kadar büyük yapılmalıdır, örneğin 2 litrelik bir cam veya plastik şişe veya dar boyunlu başka bir büyük kap kullanılmalıdır. Ayrıca numune alma derinliğini belirlemek için şişenin bağlı olduğu ipin her metresinde işaretler yapılmalıdır.

Barajdaki ilk kontrol noktası (kumsalın başlangıcı) çit noktasıdır (TZ1).

Tekne istasyonundaki ikinci kontrol noktası (plajın sonu) karşılama noktasıdır (TZ2).

T31-barajdaki ilk kontrol noktası (plajın başı) T32-tekne istasyonundaki ikinci kontrol noktası (plajın sonu)

2.3 Numune saklama ve taşıma

Laboratuvarda numune incelemesi, numune alındığı andan itibaren mümkün olan en kısa sürede başlamalıdır.

Analiz toplandıktan sonra 2 saat içinde yapılmalıdır.

Numune teslim süresi ve saklama sıcaklığı karşılanamıyorsa numune analiz edilmemelidir.

2.4 Analiz için cam eşyaların hazırlanması

Laboratuvar cam malzemeleri iyice yıkanmalı, deterjanlar ve diğer yabancı yabancı maddeler tamamen giderilene kadar damıtılmış su ile durulanmalı ve kurutulmalıdır.

Test tüpleri, şişeler ve flakonlar, çalışma ve depolama sırasında sterilizasyon sonrası kontaminasyonu önleyecek şekilde silikon veya pamuklu gazlı bez tıpalarla kapatılmalı ve paketlenmelidir. Kapaklar metal, silikon, folyo veya kalın kağıt olabilir.

Yeni kauçuk tıpalar %2'lik sodyum bikarbonat çözeltisinde 30 dakika kaynatılır ve 5 kez musluk suyuyla yıkanır (kaynatma ve yıkama iki kez tekrarlanır). Daha sonra mantarlar damıtılmış suda 30 dakika kaynatılır, kurutulur, kağıt veya folyoya sarılır ve buhar sterilizatöründe sterilize edilir. Daha önce kullanılmış olan lastik tıpalar dezenfekte edilir, nötr bir deterjanla musluk suyunda 30 dakika kaynatılır, musluk suyunda yıkanır, kurutulur, takılır ve sterilize edilir.

Pamuklu çubukların yerleştirildiği pipetler metal kutulara yerleştirilmeli veya kağıda sarılmalıdır.

Petri kapları kapatıldığında metal kutulara yerleştirilmeli veya kağıda sarılmalıdır.

Hazırlanan kaplar, belirtilen sıcaklığa ulaşıldığı andan itibaren sayılarak 160-170°C'deki kuru-ısıtmalı fırında 1 saat süreyle sterilize edilir. Sterilize edilmiş kaplar ancak 60 °C'nin altına soğuduktan sonra kurutma kabininden çıkarılabilir.

Analiz sonrasında kullanılan tüm kap ve tüpler otoklavda (126±2)°C'de 60 dakika süreyle dezenfekte edilir. Pipetler %2'lik NaHC03 solüsyonunda kaynatılarak dezenfekte edilir.

Soğutulduktan sonra kalan ortam çıkarılır, kaplar ve test tüpleri ıslatılır, musluk suyunda kaynatılır ve yıkanır, ardından damıtılmış su ile durulanır.

Önceden hazırlanmış besin agarı ENDO Petri kaplarına dökülerek sertleşmeye bırakılır.

2.5 Membran filtre yöntemi

Sıvının birim hacmi başına E. coli hücresi sayısını belirleme yöntemi (coli indeksi); Yöntemin özü, analiz edilen sıvının bakterileri tutan membran filtrelerden filtrelenmesi, ardından bu filtrelerin katı bir besin ortamına yerleştirilmesi ve üzerinde büyüyen bakteri kolonilerinin sayılmasıdır.

Membran filtrelerin hazırlanması

Membran filtreler üreticinin talimatlarına uygun olarak analize hazırlanmalıdır.

Filtre aparatının hazırlanması

Filtre aparatı alkolle nemlendirilmiş ve alevli pamuklu çubukla silinir. Soğuduktan sonra filtre aparatının (masa) alt kısmına alevli cımbız yardımıyla steril membran filtre yerleştirilir, cihazın üst kısmı (cam, huni) ile bastırılır ve cihazın tasarımında öngörülen aparatla sabitlenir. .

Membran filtre yöntemi ile belirli bir miktar su, gözenek büyüklüğü yaklaşık 0,45 mikron olan özel bir membrandan geçirilir.

Bunun sonucunda sudaki tüm bakteriler membran yüzeyinde kalır. Bundan sonra bakteri içeren membran özel bir besin ortamına (ENDO) yerleştirilir. Bundan sonra Petri kapları ters çevrilerek belirli bir süre ve sıcaklıkta bir termostata yerleştirildi. Toplam koliform bakteriler (TCB) - 37 +/- 1°C sıcaklıkta 24-48 saat inkübe edilir. Isıya dayanıklı bakterileri belirlemek için aşılama, önceden 44°C sıcaklığa ısıtılan bir ortamda gerçekleştirilir ve aynı sıcaklıkta inkübe edilir. 24 saat boyunca sıcaklık.

Ortam ışığa duyarlıdır. Bu nedenle tüm tohumlu kaplar ışıktan korunur.

Kuluçka adı verilen bu dönemde bakteriler çoğalarak kolaylıkla görülebilen ve kolaylıkla sayılabilen koloniler oluşturabilirler.

Kuluçka döneminin sonunda mahsuller incelenir:

a) Filtrelerde mikrobiyal büyümenin olmaması veya bağırsak bakterilerinin karakteristiği olmayan kolonilerin (süngerimsi, pürüzlü yüzeyi ve kenarı olan incecik) saptanması, araştırmanın analizin bu aşamasında tamamlanmasına izin verir (18- 24 saat) analiz edilen su hacminde bağırsak bakteri çubuklarının varlığı açısından negatif sonuç ile;

b) Filtrede E. coli'ye özgü koloniler tespit edilirse (metalik parlaklığı olan veya olmayan koyu kırmızı, pembe ve şeffaf) çalışmaya devam edilir ve mikroskopik olarak incelenir.

Yuvarlak kolonilerin büyümesi 2,0-3,0 mm çapında metalik parlaklığa sahip koyu kırmızı renkteyse - Escherichia coli 3912/41 (055:K59);

1,5-2,5 mm çapında, bulanık metalik parlaklığa sahip koyu kırmızı renkli yuvarlak kolonilerin büyümesi halinde - Escherichia coli 168/59 (O111:K58)

2.6 Sonuçların muhasebeleştirilmesi

Yaygın koliform bakteriler için 48 saatlik ve ısıya dayanıklı bakteriler için 24 saatlik bir inkübasyon süresinden sonra plakalar üzerinde büyüyen koloniler sayılır.

Agarın derinliklerinde olduğu gibi yüzeyinde de büyüyen koloniler, beş kat büyütmeli bir büyüteç veya büyüteçli özel bir cihaz kullanılarak sayıldı. Bunu yapmak için, kap siyah bir arka plan üzerine baş aşağı yerleştirilir ve her koloni alttan mürekkep veya cam mürekkebi ile işaretlenir.

OKB'nin varlığını doğrulamak için aşağıdakiler incelenir:

filtrelerde 5'ten az koloni geliştiyse tüm koloniler;

her türden en az 3 - 4 koloni.

TSD'nin varlığını doğrulamak için tüm tipik koloniler incelenir, ancak 10'dan fazla olmamalıdır.

Her türden kolonilerin sayısı sayılır.

Sonuçların hesaplanması ve sunumu.

Analizin sonucu, 100 ml sudaki toplam koliform bakterilerin koloni oluşturan birimlerinin (CFU) sayısı olarak ifade edilir. Sonucu hesaplamak için, tüm filtrelerde üreyen toplam koliform bakteri olarak doğrulanan kolonilerin sayısı toplanır ve 3'e bölünür.

Bu su analizi yöntemi yalnızca farklı türlerde bakteri oluşturan toplam koloni sayısını belirlemeyi içerdiğinden, sonuçları sudaki patojenik mikropların varlığını net bir şekilde değerlendiremez. Ancak yüksek mikrobiyal sayı, suyun genel bakteriyolojik kirliliğini ve patojenik organizmaların varlığının yüksek olasılığını gösterir.

Seçilen her izole koloni Gram kökeni açısından incelenir.

Gram boyama

Gram boyama, bakterilerin taksonomisinde olduğu kadar enfeksiyon hastalıklarının mikrobiyolojik tanısında da büyük önem taşımaktadır. Gram boyamanın bir özelliği, çeşitli mikroorganizmaların trifenilmetan grubunun boyalarına karşı eşit olmayan tutumu: yılan otu, metil veya kristal menekşe. Gram pozitif Gram (+) grubuna ait mikroorganizmalar, örneğin stafilokoklar, streptokoklar, belirtilen boyalar ve iyot ile güçlü bir bağlantı sağlar. Boyalı mikroorganizmalar alkole maruz kaldıklarında renk değiştirmezler, bunun sonucunda Gram fuksin (+) ile ek boyama ile mikroorganizmalar başlangıçtaki mor renklerini değiştirmezler. Gram-negatif Gram (-) mikroorganizmalar (bacteroides, fusobakteriler vb.), kristalize yılan otu veya metilen menekşe ve iyot ile alkol tarafından kolayca yok edilen bir bileşik oluşturur, bunun sonucunda renkleri bozulur ve daha sonra fuksin ile lekelenirler. kırmızı renk.

Reaktifler: yılan otu menekşesi veya kristal menekşenin karbolik çözeltisi, sulu Lugol çözeltisi, %96 etil alkol, fuksinin sulu-alkollü çözeltisi.

Boyama tekniği. Sabit smearın üzerine bir parça filtre kağıdı yerleştirilir ve üzerine 1/2 ila 1 dakika süreyle yılan otu karbolik solüsyonu dökülür. Boyayı boşaltın ve durulamadan Lugol solüsyonunu 1 dakika boyunca dökün. Lugol solüsyonunu boşaltın ve preparatı %96 alkolde boyanın çıkması durana kadar 1/2 ila 1 dakika boyunca durulayın. Suyla yıkayın. Ek olarak seyreltilmiş fuksin ile 1/2 ila 1 dakika süreyle lekeleyin. Boyayı boşaltın, preparatı yıkayın ve kurutun.

3. Araştırma sonuçları

.1 Pechersk Gölü suyunun mikrobiyolojik analizi (örnek kullanılarak)e. koli) çalışmanın 2009-2013 bahar döneminde (Mayıs) gerçekleştirilmiştir.

İki numune alma noktasında (TZ1 - plajın başlangıcı, barajın yanı, TZ2 - plajın sonu, tekne istasyonu) üç kez su örneklemesi sonucunda OKB ve TKB'nin ortalama göstergelerini hesapladık, sonuçlar Bunlardan bazıları Tablo 3.1'de sunulmaktadır.

Tablo 3.1. Mayıs 2013 için Pechersk Gölü suyundaki OKB ve TKB'nin ortalama göstergeleri.

OKB'ye göre Mayıs ayı başında ve sonunda TZ1'de (barajın yakınında) E. coli bakterisi içeriğinin göstergesi farklılık göstermez, suya kıyasla 3,3 kat daha az olan 195 CFU/cm3 tutarındadır. Mayıs ayı başında TZ2'den (tekne istasyonunda) alınan numune ve Mayıs ayı sonunda 4,3 kat daha fazla numune alınmıştır.

SES'e göre Mayıs 2013'te Pechersk Gölü suyundaki E. coli içeriğinin dinamikleri üzerine yapılan bir çalışma, kendi araştırmamızın doğruluğunu doğruladı ve TZ2'deki TBC göstergesinin TZ1'den 3,4 kat daha yüksek olduğunu gösterdi (göre kendi sonuçlarımız 3,3 kat daha yüksek).

2009'dan 2013'e kadar Mayıs ayı için OKB ve TKB göstergelerindeki değişimlerin incelenmesi. Şekil 3.1 - 3.2'de açıkça gösterilen göstergelerde geniş bir çeşitlilik gösterdi

Mayıs 2008-2013 başı için sağlık kurumu "Mogilev Bölge Hijyen ve Epidemiyoloji Merkezi" verilerinin analizi.

Mayıs 2008-2013 başlangıcına ait verilerin analizi sonucunda, 2008 ve 2012 yıllarında TZ1'de TZ2'ye göre daha fazla OKB bulunduğunu tespit ettik.

Mayıs 2008-2013 sonu için sağlık kurumu “Mogilev Bölge Hijyen ve Epidemiyoloji Merkezi” verilerinin analizi.

SanPiN'e göre 100 ml içme suyunda yaygın koliform bakterilerin bulunmaması gerekiyor

SanPiN'e göre, test edilen içme suyunun 100 ml'sinde sıcaklığa dayanıklı fekal koliformların bulunmaması gerekiyor.

Açık rezervuarlar için OKB'ye göre 100 ml su başına 500 CFU'dan, TKB'ye göre 100 ml su başına 100 CFU'dan fazla olmamalıdır.

Suda E. coli'nin varlığı, kirlenmenin dışkıdan kaynaklandığını doğrulamaktadır.

Ölçüm sonuçlarına göre, yaz aylarında suyun az olduğu dönemde koliform bakterileri genellikle yüz ila birkaç yüz birim arasında küçük miktarlarda bulunur ve yalnızca sel dönemlerinde kısa süreliğine 1000 veya daha fazla birime yükselir.

Yaz aylarındaki düşük değerler birkaç faktörden kaynaklanabilir:

) bakterilere zararlı olan yoğun güneş radyasyonu;

) Yaz aylarında artan pH değerleri (genellikle yazın pH > 8, kışın ise< 8) за счет развития фитопланктона;

) fitoplankton metabolitlerinin suya salınması, bakteriyel floranın engellenmesi.

Sonbahar-kış sezonunun başlamasıyla birlikte bu faktörler önemli ölçüde zayıflar ve bakteri sayısı birkaç bin birim düzeyine çıkar. En büyük aşırılıklar, kar erimesi dönemlerinde, özellikle de eriyen suların havza yüzeyindeki bakterileri yıkadığı sel sırasında meydana gelir.

Yaz ortasında koloni oluşturan bakterilerin toplam sayısı, bakterilere zarar veren yoğun güneş ışınımının olduğu ilkbahar-sonbahar dönemine göre daha düşüktür.

Açık su kütlelerindeki en fazla sayıda mikrop, kıyı bölgelerinin yüzey katmanlarında (su yüzeyinden 10 cm'lik bir katmanda) bulunur. Kıyıdan uzaklaştıkça ve derinlik arttıkça mikrop sayısı azalır.

Çözüm

coli patojen bakterileri

E. coli'yi bulmak ve tanımlamak için, Mayıs 2013'ün başında numunelerin mikrobiyolojik analizi yapıldı. Mayıs 2008-2012'nin başı için "Mogilev Bölge Hijyen ve Epidemiyoloji Merkezi" sağlık kurumundan alınan verilerin istatistiksel analizi da gerçekleştirildi.

Analiz sonunda hesapladığımız koliform bakteri sayısının izin verilen sınırı aşmadığı görüldü.

“Mogilev Bölge Hijyen ve Epidemiyoloji Merkezi” sağlık kuruluşunun 2008-2012 yılına ait verilerinin istatistiksel analizi sonucunda, yaz aylarında düşük su koliform bakterilerinin az miktarda mevcut olduğu tespit edildi. Yaz ortasında koloni oluşturan bakteri sayısı, bakterilere zarar veren yoğun güneş ışınımı nedeniyle ilkbahar-sonbahar dönemine göre daha düşük olur ve sonbahar-kış sezonunun başlamasıyla birlikte bakteri sayısı 100.000'e kadar artar. birkaç bin birimlik bir seviye. En büyük aşırılıklar, kar erimesi dönemlerinde, özellikle de eriyen suların havza yüzeyindeki bakterileri yıkadığı sel sırasında meydana gelir.

Referanslar

1. Fomin G.S. Su. Kimyasal, bakteriyel ve radyasyon güvenliğinin uluslararası standartlara göre kontrolü. Ansiklopedik referans kitabı. M .: "Koruyucu" yayınevi, 1995.

Dolgonosov B.M., Dyatlov D.V., Suraeva N.O., Bogdanovich O.V., Gromov D.V., Korchagin K.A. Bilgi ve modelleme sistemi Aqua CAD - bir su tedarik istasyonundaki teknolojik rejimleri yönetmek için bir araç // Su temini ve sıhhi teknoloji. 2003. Sayı 6. sayfa 26-31.

Dolgonosov B.M., Khramenkov S.V., Vlasov D.Yu., Dyatlov D.V., Suraeva N.O., Grigorieva S.V., Korchagin K.A. Bir su temin istasyonunun girişindeki su kalitesi göstergelerinin tahmini // Su temini ve sıhhi teçhizat 2004. No. 11. s. 15-20.

Kochemasova Z.N., Efremova S.A., Rybakova A.M. Sıhhi mikrobiyoloji ve viroloji. M.: Tıp, 1987.

SanPiN 2.1.5.980-00. Nüfuslu alanların drenajı, su kütlelerinin sıhhi korunması. Yüzey sularının korunması için hijyenik gereklilikler.

SanPiN 2.1.4.1074-01. İçme suyu. Merkezi içme suyu tedarik sistemlerinde su kalitesi için hijyenik gereksinimler. Kalite kontrolü.

MUK 4.2.1018-01. Kontrol yöntemleri. Biyolojik ve mikrobiyolojik faktörler. İçme suyunun sıhhi ve mikrobiyolojik analizi.

Sıhhi mikrobiyoloji

İnceleyen: KAFA Epidemiyoloji Bölümü PGMA,

Sıhhi mikrobiyoloji konusu p3
Sıhhi mikrobiyolojik çalışmaların yürütülmesine ilişkin ilke ve yöntemler c3
Sıhhi gösterge mikroorganizmaların ana grupları (SIM) c5
Suyun sıhhi mikrobiyolojisi p11
Toprağın sıhhi mikrobiyolojisi s.14
Havanın sıhhi mikrobiyolojisi p15
Tıbbi kurumlarda sıhhi ve mikrobiyolojik araştırmalar s.16
Test görevleri s.19

Sıhhi mikrobiyoloji– çevrenin mikroflorasını ve bunun insan sağlığı üzerindeki etkisini ve çeşitli biyotoplardaki ekolojik durumu inceleyen bir bilim. Pratik sıhhi mikrobiyolojinin asıl görevi, dış ortamdaki patojenik mikrofloranın erken tespitidir. İnsanların ve sıcakkanlı hayvanların çoğu bulaşıcı hastalığın patojenlerinin ana rezervuarı olduğu ve çok sayıda patojenin aerojenik ve fekal-oral mekanizmalar yoluyla bulaştığı unutulmamalıdır.

Sıhhi mikrobiyolojinin gelişiminin başlangıcı, Fransız doktor E. Mace'in E. coli'yi suyun dışkı kirliliğinin bir göstergesi olarak değerlendirmeyi önerdiği 1888 yılında düşünülebilir.

Sıhhi mikrobiyolojik araştırmanın ilkeleri

Uygun örnekleme. İncelenen her nesne için düzenlenen gerekli tüm koşullara uygun olarak gerçekleştirilir. Sterilite korunur. Anında analiz mümkün değilse malzeme buzdolabında 6-8 saatten fazla saklanmaz.
Yapılan analizlerin seriliği. İncelenen nesnelerin çoğu, son derece dengesiz bir şekilde dağılmış çok çeşitli mikroorganizmalar içerir. Nesnenin farklı alanlarından bir dizi örnek alınır. Laboratuvarda numuneler karıştırılır ve ardından gerekli malzeme miktarı hassas bir şekilde ölçülür (genellikle test edilen tüm malzemenin ortalaması).
Tekrarlanan örnekleme Kural olarak, incelenen nesnelerde mikrofloranın bileşimi oldukça hızlı değişir, ayrıca patojenik mikroorganizmalar içlerinde eşit olmayan şekilde dağılır. Buna göre tekrarlanan örnekleme daha yeterli bilgi elde edilmesini sağlar.
Yalnızca standart araştırma yöntemlerinin kullanılması, farklı laboratuvarlarda karşılaştırılabilir sonuçların elde edilmesini mümkün kılar.
Bir dizi test kullanmak: doğrudan (patojenleri tespit etmek) ve dolaylı.
Nesnelerin, elde edilen sonuçların toplamına göre değerlendirilmesi - diğer hijyenik göstergeler (organoleptik, kimyasal, fiziksel vb.) dikkate alınarak

Sıhhi mikrobiyolojik çalışmaların yürütülmesi için yöntemler

Pratik sıhhi mikrobiyoloji, çevrenin sıhhi ve epidemiyolojik durumunu değerlendirmek için iki ana yöntem kullanır.

BEN. Doğrudan patojen tespitine yönelik yöntemler. Dış ortamın salgın tehlikesini değerlendirmek için en doğru ve güvenilir kriterlerdir. Ana dezavantaj düşük hassasiyettir.

İzole etme zorluğu patojenik Besleyici ortamlardaki mikroorganizmalar aşağıdaki faktörlerle belirlenir:

Dış ortam mikroflorasının toplam tür bileşiminin 1 / 30.000'ini oluşturan, dış ortamdaki nispeten düşük patojenik mikroorganizma içeriği. Ayrıca dengesiz bir şekilde dağılmıştır.
Bir patojenin izolasyonu her zaman diğer patojen türlerinin varlığını göstermez. Yani hemen hemen her patojen üzerinde araştırma yapmak gerekiyor ki bu da mümkün değil.
Patojen değişkenliği. İkincisi, dış ortama girerek, tanınmalarını zorlaştıran yeni özellikler kazanır.
Besin ortamında birlikte büyütüldüklerinde patojenler ve saprofitler arasındaki rekabetçi ilişkiler.
Kültür ortamının seçiciliğinin yetersiz olması ve laboratuvar hayvanları ve doku kültürlerinin kullanılması ihtiyacı.

II. Dış ortamda bir patojenin olası varlığının dolaylı olarak belirtilmesi için yöntemler.

Dış ortamda bir patojenin olası varlığının dolaylı olarak değerlendirilebilmesi için iki kriter kullanılır:

Toplam mikrobiyal sayım (TMC)
Sıhhi gösterge mikroorganizmaların içeriği (SIM)

- Toplam mikrobiyal sayım (TMC) 1 gram veya 1 ml substrattaki tüm mikroorganizmaların sayılmasıyla belirlenir.

Bu durumda, bir nesnenin organik maddelerle ne kadar kontamine olduğu, TMC'nin o kadar yüksek olduğu ve patojenlerin varlığı olasılığının da o kadar yüksek olduğu varsayımından yola çıkıyorlar. Bununla birlikte, TMC saprofitler nedeniyle büyük olabileceğinden ve patojenler bulunmayabileceğinden bu her zaman geçerli değildir. Bu nedenle TMC'yi dış ortamın organik maddelerle kirlenme yoğunluğunun bir göstergesi olarak değerlendirmek daha uygundur.

OMC iki yöntemle belirlenir:

Doğrudan sayma. Bunlar, örneğin Petrov veya Goryaev gibi özel kameralar veya özel elektronik sayaçlar kullanılarak mikroskop altında gerçekleştirilir. Önceden test edilen numune homojenleştirilir ve bir boya (genellikle eritrosin) eklenir. Test sıvısının veya süspansiyonun geçtiği membran filtrelerde doğrudan sayım da yapılabilir. Yöntem acil durumlarda kullanılır. Bakterilerin kantitatif içeriği hakkında acil bir cevaba ihtiyaç duyulursa (örneğin, su temin sistemindeki kazalar durumunda, arıtma tesislerinin verimliliğini değerlendirirken vb.). Ana dezavantaj, kümeler oluştuğunda veya incelenen substratın parçacıklarına "yapıştıklarında" bakterilerin sayılmasının mümkün olmamasıdır. Virüslerden bahsetmeden, küçük mikroorganizmaları saymak imkansızdır. Ve son olarak canlıyı ölü mikroorganizmalardan ayırmak imkansızdır.
Besleyici ortamlara kantitatif aşılama. Test sıvısı veya süspansiyonun hazırlanan seri on kat seyreltilerinden 1 ml steril Petri kaplarına aktarılarak MPA'ya döküldü, eritildi ve 45-50 0 C'ye soğutuldu. Sıvılar eşit şekilde karıştırılır ve agar katılaştıktan sonra tabaklar bir termostata yerleştirilir. İnkübasyondan sonra, büyüyen kolonilerin sayısı sayılır ve seyreltmeler dikkate alınarak, incelenen nesnenin birim hacmi başına canlı mikropların sayısı hesaplanır. Bu durumda yalnızca MPA üzerinde çoğalabilen mezofilik aerobik ve fakültatif anaerobik bakteriler tanımlanır. Dolayısıyla ortaya çıkan rakamlar, incelenen nesnedeki gerçek mikroorganizma sayısından önemli ölçüde düşüktür.

-Mikroorganizmalara sıhhi göstergeler denir, bunu nasıl yapabilirsin dolaylı olarak Dış ortamdaki patojenlerin olası varlığını yargılamak. Bir nesne ne kadar çok insan ve hayvan özleri ile kontamine olursa, o kadar fazla sıhhi gösterge mikroorganizmanın bulunacağı ve patojenlerin varlığı ihtimalinin de o kadar yüksek olacağı varsayılmaktadır.

SPM'nin ana özellikleri:

Mikroorganizmanın sürekli olarak insanların ve hayvanların doğal boşluklarında yaşaması ve sürekli olarak dış ortama salınması gerekir.
Mikrop dış ortamda (gıda ürünleri hariç) çoğalmamalı veya çok az çoğalmalıdır.
Bir mikrobun dış ortamda hayatta kalma süresi, patojenik mikroorganizmalarınkinden daha az olmamalı, hatta daha uzun olmalıdır.
SPM'nin dış ortamdaki stabilitesi patojenik mikroorganizmalara benzer veya daha fazla olmalıdır.
Mikrobun dış ortamda karıştırılabileceği “çiftleri” veya analogları olmamalıdır.
Mikrop, en azından patojen mikroorganizmaların hayatta kalma süresi boyunca dış ortamda değişmemelidir.
Mikroorganizmaları tanımlama ve ayırma yöntemleri basit olmalıdır.

SPM'ler geleneksel olarak 3 gruba ayrılır.

Aralarında açıkça tanımlanmış sınırlar yoktur; Bazı mikroorganizmalar hem dışkı hem de hava kaynaklı kirliliğin göstergesidir. Tüm kutsal doğal alanlar biyolojik kirliliğin göstergesi olarak kabul edilmektedir.

Grup A insan ve hayvanların bağırsaklarında yaşayanları içerir; mikroorganizmalar dikkate alınır dışkı kirliliğinin göstergesi olarak Sözde koliform bakterileri - koliformları içerir. (yeni düzenleyici belgeye göre içme suyu için - İçme suyunun sıhhi mikrobiyolojik analizi. MUK 4.2.1018-01 Yönergeleri - bu gruba yaygın koliform bakteriler OKB denir); Koliform bakteriler - OCB, Escherichia, Enterococcus, Proteus, Salmonella; ve ayrıca sülfit azaltıcı clostridia (dahil) Cl.perfringens), termofiller, bakteriyofajlar, Pseudomonas aeruginosa, Candida, Acinetobacter ve Aeromonas.

Grup Büst solunum yolu ve nazofarinks sakinlerini içerir; Mikroorganizmalar hava kaynaklı kirliliğin göstergesi olarak kabul edilir. Alfa ve beta-hemolitik streptokokları, stafilokokları (plazmakoagülan, lesitinaz pozitif, hemolitik ve antibiyotiğe dirençli; bazı durumlarda stafilokok türü belirlenir - aureus) içerir.

Grup C dış ortamda yaşayan saprofitik mikroorganizmaları içerir; mikroorganizmalar kendi kendini temizleme süreçlerinin göstergeleri olarak kabul edilir. Amonifikasyon bakterileri, nitrifikasyon bakterileri, bazı spor oluşturan bakteriler, mantarlar, aktinomisetler vb. içerir.

SPM titresi– en az bir SPM örneğinin bulunduğu, incelenen malzemenin en küçük hacmi (ml cinsinden) veya ağırlık miktarı (g cinsinden).

SPM Endeksi– incelenen nesnenin belirli bir hacminde (miktarında) bulunan SPM bireylerinin sayısı. Su, süt ve diğer sıvı ürünler için – 1 litre; toprak, gıda ürünleri için - 1 g. İndeks titrenin tersidir, bu nedenle titrenin indekse ve geriye doğru yeniden hesaplanması şu formül kullanılarak yapılabilir: T = 1000/I; I=1000/T – sıvılar için. Buna göre toprak ve gıda ürünleri için T = 1/I, I = 1/T.

Ek bir gösterge olarak şu anda en olası sayı endeksi (MPI) de kullanılmaktadır; bu, istenen mikropun gerçek sayısının %95 olasılıkla dalgalanabileceği güven sınırlarına sahiptir. NHF'yi belirlemek için 3, 5 ve 10 kez çalışma yapılır. Gösterge özel Hoskens-Mouret tabloları kullanılarak belirlenir.

DMA'ların ana grupları

Koli bakterileri

Genel adı altında “koliform bakterileri” - koliformlar - ailenin bakterileri Enterobakteriler doğum Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella. 2001'den sonra yayınlanan yeni düzenleyici belgelere göre bu gruba yaygın koliform bakteriler - TCB adı verilmektedir. Bu grupların özellikleri aynıdır; koliform bakteriler, 37 0 C sıcaklıkta 24 saatte laktozu ve glikozu asit ve gaza fermente eden, gram negatif, spor oluşturmayan çubukları içerir ve oksidaz aktivitesi yoktur. Aynı bakteri grubu için iki ismin kullanılması, farklı yıllara ait düzenleyici belgelerin kullanılmasıyla ilişkilidir. Örneğin, 31 Temmuz 1978 tarih ve 720 sayılı mevcut Kararda "Pürülan cerrahi hastalıkları olan hastalar için tıbbi bakımın iyileştirilmesi ve hastane enfeksiyonlarıyla mücadeleye yönelik önlemlerin güçlendirilmesi hakkında" bu gruba koliform adı verilmektedir ve uygun olarak yürütülen çalışmaların sonuçlarında Bu Sırada koliformların tespit edildiği (tespit edilmediği) not edilecektir. Ve içme suyunu 2001'deki yönergelere göre incelerken şu not edilecektir: OKB tespit edildi (tespit edilmedi).

Escherichia coli

Mikroorganizma tüm SPM'lerin atasıdır. Bu, OCB grubunun ana temsilcisidir; çalışmanın amacına ve nesnesine bağlı olarak, bu grup, TCB - sıcaklığa dayanıklı koliform bakterilerin bir alt grubunu içerir.

Yaygın koliform bakteriler - OKB – gram-, oksidaz-, spor oluşturmayan çubuklar, diferansiyel laktoz ortamında büyüyebilen, laktozu t 0 37 0 C'de 24 saat boyunca KG'ye fermente edebilen.

Termotolerant koliform bakteriler - TCB – OKB grubuna girerler, tüm özelliklerine sahiptirler, ayrıca t 0 44 0 C'de 24 saat boyunca laktozu KG'ye fermente edebilme yeteneğine sahiptirler.

Ek bir test olarak, klorlu sudan (musluk, yüzme havuzu vb.) izole edilen OCB'nin, sıcaklıkta gaz oluşumu ile glikoz fermantasyonuna neden olamayacağı bilindiğinden, farklı yetiştirme sıcaklıklarında glikoz fermantasyonunun belirlenmesi kullanılır. 44 0 C sıcaklık.

Önemli dezavantajlar E.coli SPM olarak:

1. Dış ortamda analogların bolluğu;

2. Olumsuz çevresel etkilere, örneğin çeşitli kimyasallara ve pH değişikliklerine karşı yetersiz direnç. Aynı zamanda bazı patojen mikroorganizmalar, özellikle enterovirüsler bunlara karşı daha dirençlidir;

3. Ekolojisi ve teşhis sorunlarının tamamen çözülmemesi sonucu yüksek değişkenlik;

4. Gıdalarda nispeten kısa hayatta kalma süresi olmasına rağmen bazı patojenik mikroorganizmalar (örn. S. sonnei, S. schottmuelleri, enterovirüsler) uzun süre devam eder;

5. E. coli, organik madde içeriği en az 280 µg/l olan suda çoğalır;

6. E. coli bulanık bir göstergedir. Örneğin, 1 litrede 17 bakteriye kadar patojen içeriğine sahip su kaynaklı salmonelloz salgınları bilinmektedir. E.coli 1 litrede 4 bakteriyi geçmedi yani neredeyse normal kaldı.

Bakteri cinsi Enterokok

SPM'ler Houston (1910) tarafından önerildi. Cins 16 tür içerir, insanlarda ana lezyonlara neden olur E. faecalis, E. faecium, E. durans. Bu bakteriler SPM için bir dizi gereksinimi karşılar.

1. Enterokoklar, niceliksel olarak E. coli'den daha küçük olmalarına rağmen insan bağırsağında kalıcı olarak yaşarlar.

2. Bakteriler pratikte dış ortamda üreyemezler (sıcaklık 20 0 C ve organik madde içeriği 375 µg/l olmalıdır).

3. Enterokoklar dış ortamda belirgin bir değişkenlik göstermez, bu da tanınmalarını kolaylaştırır.

4. Enterokokların dış ortamda analogları yoktur.

5. Enterokoklar dış ortamda olduğundan çok daha erken ölürler. E. coli bu nedenle her zaman taze dışkı kontaminasyonunu gösterirler.

6. Enterokokların en önemli avantajı olumsuz dış etkilere karşı dirençleridir. Enterokoklar Sherman direnç testleri kullanılarak ayırt edilir.

a) Enterokoklar 65 C'ye kadar 30 dakika ısıtılmaya dayanıklıdır, bu da onları ısıl işlemin veya pastörizasyonun kalitesinin bir göstergesi yapar.

b) Deniz suyu çalışmalarında Enterokoklar yüksek konsantrasyondaki NaCl (%6,5-17) - SPM'ye karşı dirençlidir.

c) Enterokoklar pH dalgalanmalarına (3-12) karşı dirençlidir, bu da onların asidik ve alkali ürünlerde (atık su) dışkı kontaminasyonunun bir göstergesi olarak kullanılmasına olanak tanır. Bu tür koşullarda E.coliözelliklerini hızla kaybeder ve tanınması zorlaşır.

Enterokok ve E. coli'nin sayısına ve oranına bağlı olarak dışkı kontaminasyonunun ciddiyeti ve zamanlaması değerlendirilir.

Bakteri cinsi Proteus

Kutsal doğal sit alanlarının üçüncü (en önemli) grubudur. 1911'de SPM olarak önerildiler. Cins 4 tür içerir; çok önemlidir P.vulgaris, P.mirabilis. Aynı zamanda P. vulgaris genellikle bir nesnenin organik maddelerle kirlenmesinin bir göstergesi olarak kabul edilir (çünkü daha çok çürüyen kalıntılarda bulunur) ve P.mirabilis – dışkı kirliliğinin bir göstergesi olarak (daha sıklıkla dışkıda bulunur). P.rettgeri bağırsak enfeksiyonları sırasında dışkıda daha sık tespit edilir - bu nedenle tespiti epidemiyolojik bir soruna işaret eder. Cinsin temsilcileri Proteus Endo ve Lewin'in ortamında genellikle tüm plakayı kaplayan karakteristik bir "sürünen" büyüme sağlar. Proteus'u Shukevich yöntemini kullanarak izole edebilirsiniz - taze kesilmiş MPA'yı yoğunlaşmaya (test tüpünün dibinde) aşılayarak - örnekte Proteus varsa, tüm agar eğimini kaplayacaktır.

Suda, gıda ürünlerinde ve yıkamalarda proteazların varlığı her zaman bir nesnenin çürüyen substratlarla kirlendiğini ve son derece kötü bir sağlık durumunu gösterir. Proteus'un bulaştığı gıda ürünleri genellikle atılır; Proteus içeren sular içilmemelidir. Açık rezervuarlardan ve tedavi edici çamurdan su incelenirken Proteas'ın belirlenmesi önerilir. Gıda ürünlerini incelerken Proteus'un tespiti GOST tarafından sağlanmaktadır.

Clostridium perfringens

SPM, 1895'te neredeyse aynı anda nasıl önerildi? E.coli. Wilson ve Blair (1924-1925), dışkı kaynaklı clostridia'nın dış ortamda yaşayan clostridia'dan ayırt edilmesini sağlayan bir demir-sülfit ortamı önerdiler. Bağırsak clostridia'ları sülfitleri indirgeyerek besiyerinin kararmasına neden olurken, serbest yaşayan clostridia'lar sülfit redüktaz içermez ve besiyerinin rengini değiştirmez. Diğer bazı mikroorganizmalar da besiyerinin kararmasına neden olabilir, bu nedenle eşlik eden mikrofloranın büyümesini baskılamak için mahsullerin 43-44,5 0 C'de yetiştirilmesi veya numunelerin 80 0 C'de 15-20 dakika ısıtılması önerilir. O., Clostridium perfringens Vurgulanması ve ayırt edilmesi kolaydır. Fakat, Clostridium perfringens SPM olarak bazı dezavantajlar vardır.

Basil her zaman insan bağırsağında bulunmaz.
Clostridium perfringens Sporlanma nedeniyle dış ortamda uzun süre varlığını sürdürür. Bu nedenle, bu mikroorganizmanın tespiti, dışkıyla kontaminasyonun bir kez meydana geldiğini gösterir. Bu, enterovirüslerin olası varlığının bir göstergesidir.
Clostridium perfringens dış ortamda (bazı toprak türlerinde) üreyebilir. Sporların çimlenmesi için bir “sıcaklık şoku” gereklidir; 70 0 C'de 15-30 dakika ısıtılır.

Şu anda, spor ve bitkisel formların sayısını karşılaştırarak bir nesnenin dışkıyla kirlenme yaşının değerlendirilmesi önerilmektedir. Clostridium perfringens. Bu amaçla ısıtılmış ve ısıtılmamış numunelerdeki klostridyum sayısı belirlenir.

A) Isıtılmış numunelerde indeks yalnızca spor formlarıyla temsil edilecektir, bu da uzun süreli kontaminasyonu gösterir (taze dışkıların %80-100'ü bitkisel hücrelerdir).

B) Isıtılmamış örneklerde bitkisel ve spor formları tespit edilir.

Toprak, tedavi edici çamur ve açık su çalışmalarında clostridia'nın kantitatif kaydı sağlanmaktadır.

Clostridium perfringens Gıda işleme tesislerinde 100 ml suda bulunmamalıdır. Mikrop aynı zamanda bazı gıda ürünlerinde de tanımlanmaktadır, ancak gıda zehirlenmesinin olası bir nedenidir. Kritik seviye Clostridium perfringens hazır yemeklerde 1 ml veya 1 g üründe 10 hücreye eşittir. Hazır konserve yiyecekler içermemelidir Clostridium perfringens.

E. coli, enterokok ve clostridia miktarlarının oranına bağlı olarak dışkı kontaminasyonunun yaşı değerlendirilir.

Bakteri cinsi Salmonella

Bunlar, akut solunum yolu enfeksiyonlarının en yaygın patojenleridir ve bu nedenle benzer patogenez ve epidemiyolojiye sahip diğer enfeksiyöz ajanların olası varlığının göstergeleri olabilirler.

Son yıllarda Salmonella dış ortamda yaygınlaştı. Bakteri taşıyıcılarının sayısı artmış (%9,2'ye kadar), her gram dışkıyla birlikte milyonlarca ve milyarlarca hücrenin dış ortama salınması hayvanlarda daha da belirgin hale gelmiştir. Et işleme tesislerinden gelen atık sularda, örneklerin %80-100'ünde, arıtılmış atık sularda salmonella bulunur - örneklerin %33-95'inde; Bakteriler ayrıca klorlu atık sularda da bulunur.

SPM Olarak Salmonella'nın Özellikleri

Bu mikroorganizmalar dış ortama ancak insan ve hayvan dışkısı ile girerler. Tespitleri her zaman dışkı kontaminasyonunu gösterir.
Salmonella toprakta yetişmez; suda yalnızca yüksek sıcaklıklarda ve yüksek düzeyde organik maddede çoğalırlar.
Salmonella tespitinde sadece pozitif bulguların yüzdesinin değil aynı zamanda NFP'nin de belirlenmesi gerekmektedir. Yalnızca NHF, salmonelloz ve benzer etiyolojiye sahip diğer akut hastalıkların artışını öngörmeyi mümkün kılmaktadır.

Bakteri virüsleri

SPM'ler olarak bağırsak bakterilerinin (Escherichia, Shigella, Salmonella) bakteriyofajlarının kullanılması önerilmektedir. Bağırsak fajları, adapte oldukları bakterilerin olduğu yerlerde sürekli olarak bulunur. Ancak patojenik bakterilerin olası varlığının göstergesi olarak bazı dezavantajlara sahiptirler. Örneğin bakteriyofajlar dış ortamda karşılık gelen bakterilerden (4-5 ay) daha uzun süre (8-9 ay) hayatta kalırlar. Ancak dışkı kirliliğinin göstergeleri olarak bakteriyofajların önemli bir değeri vardır.

1. Bakteriyofajlar atık sulardan birçok patojenik virüsle (çocuk felci, Coxsackie, hepatit A) aynı sıklıkta izole edilir.

2. Enteropatojenik virüslere olan benzerlik, dezenfektanlara karşı direnci tamamlar.

3. Fajları tespit etme yöntemleri oldukça basittir. Aşılamalar, bir gösterge bakteri kültürü ile et suyunda gerçekleştirilir. İnkübasyondan sonra yoğun agar üzerinde alt kültürler yapılır, deney ve kontroldeki CFU'lar karşılaştırılır ve sonuçlar çıkarılır.

Bakteri cinsi Stafilokok

Stafilokoklar normal mikrofloranın temsilcileridir. Lokalizasyonlarının ana yeri, insanların ve bazı sıcakkanlı hayvanların yanı sıra cildin üst solunum yollarının mukozalarıdır. Sağlıklı insanların bağırsaklarında da stafilokoklar bulunur. Stafilokoklar konuşurken, öksürürken, hapşırırken ve ayrıca deriden çevreye girerler. Rezervuarlarda ve yüzme havuzlarında suyun kirlenmesi insanların banyo yapmasıyla meydana gelirken, yüzme havuzlarında 1 litre suda stafilokok sayısı onbinlere ulaşabilmektedir. Stafilokokların çevrede yayılması, insanlarda, özellikle tıbbi personel arasında patojenik stafilokokların taşınmasıyla ilişkili olan stafilokok kökenli nozokomiyal enfeksiyonlar sorunuyla yakından ilişkilidir. Bütün bunlar stafilokokları hava kirliliğinin gösterge bakterileri olarak sınıflandırmamıza olanak tanır.

Stafilokoklar aileye aittir Mikrokokaceae aile Stafilokok. Görüş S. aureus patojenik anlamına gelir.

Sıhhi indikatör mikroorganizmalar olarak stafilokokların bazı özellikleri vardır:

Besleyici ortamlar konusunda iddiasızdırlar; bunları ortamda belirtme yöntemleri, örneğin streptokoklara göre daha basittir.
Stafilokoklar çeşitli fiziksel ve kimyasal faktörlere karşı önemli bir dirence sahiptir. Stafilokokların dezenfektanlara (özellikle klor preparatlarına) karşı direncine dayanarak, bunların su kütlelerinin (deniz suları dahil) rekreasyonel alanlarında ve yüzme havuzlarında su kirliliği için SPM olarak kullanılması önerilmektedir.
Tesisin sıhhi ve hijyenik durumu, içindeki insan sayısı, patojenik stafilokok taşıyıcılarının sayısı ve havadaki stafilokok içeriği arasında bir korelasyon olduğundan, bunlar iç mekan hava kirliliğinin objektif bir göstergesidir.

Bakteri cinsi Streptokok

Streptokoklar, stafilokoklar gibi, insanların ve birçok hayvanın üst solunum yollarının sakinleridir. Üst solunum yollarının kronik streptokok enfeksiyonu olan hastaların yanı sıra sağlıklı insanların ağız boşluğunda ve nazofarenksinde sürekli ve büyük miktarlarda bulunurlar ve bu nedenle konuşurken ve öksürürken bakteriyel aerosol ile iç mekan havasına girebilirler.

Streptokokların hijyenik indikatör mikroorganizmalar olarak kullanılmasındaki temel zorluk, streptokokların çok sayıda türü içeren geniş bir grubu temsil etmesidir: saprofitlerden kızıl, erizipel, sepsis ve birçok cerahatli inflamatuar süreç gibi hastalıklara neden olan patojenik streptokoklara kadar.

Streptokoklar aileye aittir Streptococcaceae, aile Streptokok. Görüş S.pyogenes insan patolojisinde çok önemlidir .

Çevrede streptokoklar esas olarak a-hemolitik streptokoklarla temsil edilir (kırmızı kan hücrelerini tamamen yok etmezler, kolonilerin etrafında yeşilimsi bölgeler oluştururlar). Bunun nedeni, sağlıklı insanların neredeyse %100'ünün bademcik yüzeyinde α-hemolitik streptokoklara sahip olması, β-hemolitik streptokokların (kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasına neden olan ve bir hemoliz bölgesi oluşturan) yalnızca 25-75'inde bulunmasıdır. %. Genel olarak sıhhi Gösterge hava mikroplarının α- ve β-hemolitik streptokokları içermesinin dikkate alınması tavsiye edilir.

SPM olarak streptokokların özellikleri:

Streptokoklar çevreye çok dayanıklı değildir; odaların tozunda, çarşaflarda ve hastanın ev eşyalarında yalnızca birkaç gün hayatta kalabilirler. Bununla birlikte, canlılıklarının korunma süresi, çevreye havadaki damlacıklar yoluyla giren bir dizi patojenik bakterinin (örneğin, difteri etken maddesi vb.)
Daha yeni iç mekan hava kirliliğinin bir göstergesi, en az dirençli olan α-hemolitik streptokoktur. Streptokoklar, insanların yaşamadığı tesislerin havasında bulunmaz.
Streptokokların endikasyon ve tanımlanmasına yönelik yöntemler, stafilokoklara kıyasla daha karmaşık ve emek yoğundur.

Termofiller

SPM'ler arasında özel bir yer, rezervuarların topraklarında veya suyunda bulunması gübre, kompost veya ayrışmış insan dışkısıyla kirlendiğini gösteren termofilik mikroplar tarafından işgal edilir.

Termofilik mikroorganizmalar arasında gram pozitif bakteriler, koklar, basiller, spirillalar, aktinomisetler ve 60 0 C ve üzeri sıcaklıklarda aktif olarak üreyebilen birkaç mantar türü bulunur. Çoğu termofil aerobdur.

Termofilik mikroorganizmalar, hayati aktiviteleri nedeniyle yüzey katmanlarının 60-70 0 C'ye ısıtıldığı kompost yığınlarında ve gübrede çoğalır. Bu koşullar altında, kendiliğinden ısınan organik kütlelerin biyotermal nötralizasyon süreci gerçekleşir, patojenik mikroorganizmalar ve E. coli ölür.

Bu nedenle, termofillerin varlığı toprağın kompostlarla uzun süredir kirlendiğini gösterirken, koliform bakteriler (OCB) önemsiz miktarlarda tespit edilmiştir. Tam tersine, az sayıda termofil içeren yüksek titrede koliform bakteri (OCB), taze dışkı kontaminasyonunun bir göstergesidir.

Termofiller ayrıca organik atıkların mineralizasyon sürecinin ayrı ayrı aşamalarını karakterize etmek için hijyenik indikatör mikroorganizmalar olarak da görev yapar.

Benzensülfonilamid grubundan ilaçların analizi

Benzensülfonilamid grubundan ilaçların analizi. Kontrol ve analitik laboratuvarda tabletlerdeki sülfadimetoksin içeriği nitritometri ile belirlendi.

Alifatik karboksilik asitler ve hidroksi asitler, askorbik asit, alifatik amino asitler ve türevlerinin tuzları grubundan ilaçların analizi