Việc xác định thành phần axit amin của protein có thể được thực hiện bằng nhiều phương pháp khác nhau: hóa học, sắc ký, vi sinh và đồng vị. Phương pháp sắc ký thường được sử dụng nhiều hơn.
Sắc ký giấy. Sắc ký giấy được sử dụng để xác định các thành phần của hỗn hợp axit amin với di- và tri-peptide thu được bằng cách thủy phân một phần protein và polypeptide.
Quá trình thủy phân có thể được thực hiện bằng phương pháp axit, kiềm hoặc enzyme. Phương pháp axit được sử dụng thường xuyên hơn (6 N HCl, 8 N H 2 SO 4). Quá trình thủy phân được thực hiện bằng cách đun nóng, đôi khi ở áp suất cao. Các dấu hiệu cho thấy quá trình thủy phân đã kết thúc có thể là: sự ngừng phát triển của các nhóm cacboxyl hoặc amin trong dịch thủy phân hoặc phản ứng biuret âm tính. Loại bỏ thuốc thử thủy phân dư: axit sulfuric được kết tủa bằng Ca(OH) 2, axit clohydric được chưng cất trong chân không và axit còn lại được kết tủa bằng bạc nitrat.
Các thành phần của dịch thủy phân được phân phối giữa nước hấp phụ trên cellulose, pha tĩnh và dung môi hữu cơ, pha động, di chuyển lên hoặc xuống dọc theo tấm. Hỗn hợp axit-butanol-axetic-nước (4:1:5) được sử dụng làm pha động. Nhiều axit amin ưa nước bị thu hút mạnh hơn vào dung môi hữu cơ, trong khi những axit amin ưa nước hơn có xu hướng liên kết với pha tĩnh nhiều hơn. Các hợp chất tương đồng khác nhau dù chỉ một đơn vị methylene di chuyển với tốc độ khác nhau và có thể dễ dàng tách ra. Khi kết thúc quá trình sắc ký, giấy được làm khô và xử lý bằng chất hiện hình (dung dịch ninhydrin 0,5% trong hỗn hợp axeton-axit axetic băng-nước) và đun nóng trong vài phút. Axit amin xuất hiện dưới dạng đốm màu. Độ linh động là một đặc tính có giá trị không đổi của mỗi hợp chất và tăng khi tăng trọng lượng phân tử. Đối với các axit amin chuỗi thẳng, giá trị linh động cao hơn một chút so với các đồng phân tương ứng. Việc đưa các nhóm cực vào phân tử làm giảm tính linh động của hợp chất. Các axit amin có chuỗi bên không phân cực cồng kềnh (leucine, isoleucine, phenylalanine, tryptophan, v.v.) di chuyển nhanh hơn các axit amin có chuỗi bên không phân cực ngắn hơn (proline, alanine, glycine) hoặc có chuỗi bên phân cực (threonine, arginine, cystein, histidin, lysine). Điều này là do khả năng hòa tan lớn hơn của các phân tử phân cực trong pha tĩnh ưa nước và các phân tử không phân cực trong dung môi hữu cơ.
Sắc ký giấy có thể được sử dụng để định lượng hàm lượng axit amin. Mỗi vết được cắt bỏ và rửa giải bằng dung môi thích hợp; sau đó thực hiện xét nghiệm đo màu định lượng (anhydrin). Theo một phương án khác, giấy được phun ninhydrin và cường độ màu của vết được đo bằng quang kế trong ánh sáng phản xạ hoặc truyền qua. Trong đánh giá bán định lượng, hàm lượng axit amin được đánh giá bằng diện tích vết trên sắc ký đồ, tỷ lệ thuận với nồng độ axit amin trong hỗn hợp được tách ra.
Sắc ký lớp mỏng. Sắc ký lớp mỏng cũng có thể được sử dụng để tách và xác định axit amin. TLC, như đã biết, tồn tại ở hai phiên bản. TLC phân vùng tương tự như TLC phân vùng trên giấy và TLC hấp phụ dựa trên các nguyên tắc hoàn toàn khác nhau.
Khi thực hiện RTLC trên bột xenlulo hoặc các chất mang tương đối trơ khác, có thể sử dụng cùng hệ dung môi và thuốc thử hiện màu giống như trong sắc ký giấy.
Việc tách bằng ATLC được xác định bởi khả năng của dung môi (dung môi này không nhất thiết phải là hỗn hợp nhị phân hoặc phức tạp hơn) để rửa giải các thành phần của mẫu khỏi vị trí hấp phụ của nó trên chất hấp phụ đã hoạt hóa. Ví dụ, trên silica gel nóng. ATLC rất hữu ích cho việc tách các hợp chất không phân cực như lipid, nhưng không hữu ích cho việc tách axit amin và hầu hết các peptide. Để tách các axit amin, RTLC được sử dụng, cho phép bạn nhanh chóng tách và xác định 22 axit amin của chất thủy phân protein.
Axit amin trong dịch thủy phân protein cũng có thể được xác định bằng sắc ký khí, nhưng trước khi phân tích sắc ký, axit amin thường được chuyển thành các hợp chất dễ bay hơi.
Tương tác với ninhydrin. Các aldehyd tương ứng được hình thành.
Do đó, một hỗn hợp các aldehyd thu được và được phân tích. Đây là trường hợp đơn giản nhất, chỉ phù hợp với một số axit amin.
Axit amin được chuyển hóa thành este dễ bay hơi (este alkyl, este metyl của axit hydroxy, este metyl của axit clo hóa, v.v.).
Việc lựa chọn dẫn xuất phụ thuộc vào hỗn hợp axit amin đang được nghiên cứu.
Sắc ký trao đổi ion. Hiện nay, thành phần axit amin của các sản phẩm thực phẩm được xác định hoàn toàn bằng sắc ký trao đổi ion tự động.
| Sắc ký trao đổi ion dựa trên sự trao đổi cân bằng hóa học thuận nghịch của các ion trong dung dịch với các ion có trong bộ trao đổi ion (bộ trao đổi cation, bộ trao đổi anion) và dựa trên khả năng khác nhau của các ion được tách ra để trao đổi ion với các ion hấp phụ cố định được hình thành do sự phân ly của ion tạo ra. các nhóm. |
Phương pháp Moore và Stein sử dụng các cột ngắn và dài chứa đầy nhựa polystyrene sulfon hóa ở dạng Na +. Khi chất thủy phân axit ở pH = 2 được đưa vào cột, các axit amin sẽ liên kết thông qua trao đổi cation với ion natri. Cột sau đó được rửa giải bằng dung dịch natri citrat ở các giá trị pH và nhiệt độ được lập trình sẵn. Cột ngắn được rửa giải bằng một đệm, cột dài được rửa giải bằng hai đệm. Dịch rửa giải được xử lý bằng ninhydrin, đo cường độ màu bằng máy đo màu dòng chảy. Dữ liệu được tự động ghi lại trên máy ghi biểu đồ và có thể truyền sang máy tính để tính diện tích dưới đỉnh.
Điện di cao áp trên chất mang trơ. Trong hóa sinh, việc tách axit amin, polypeptide và các ampholyte khác (các phân tử có tổng điện tích phụ thuộc vào độ pH của môi trường) dưới tác động của điện trường không đổi ứng dụng đã được ứng dụng rộng rãi. Đây là phương pháp điện di ở điện áp cao trên các chất mang trơ. Khi tách axit amin, dải giấy hoặc lớp bột xenlulo mỏng thường được sử dụng làm chất mang trơ. Quá trình phân tách được thực hiện trong 0,5–2 giờ ở điện áp 2000–5000 V, tùy thuộc vào tổng điện tích của các ampholyte và trọng lượng phân tử của chúng. Trong số các phân tử mang điện tích giống nhau, những phân tử nhẹ hơn sẽ di chuyển nhanh hơn. Nhưng một thông số quan trọng hơn trong quá trình tách là tổng điện tích. Phương pháp này được sử dụng để tách các axit amin, peptit trọng lượng phân tử thấp, một số protein và nucleotide. Mẫu được đặt trên chất mang, được làm ẩm bằng dung dịch đệm ở độ pH thích hợp và nối với bể chứa dung dịch đệm bằng một dải giấy lọc. Giấy được phủ một tấm thủy tinh hoặc ngâm trong dung môi hydrocarbon để làm mát. Trong điện trường, các phân tử mang điện tích âm ở độ pH nhất định sẽ di chuyển đến cực dương và những phân tử mang điện tích dương sẽ di chuyển đến cực âm. Tiếp theo, điện tâm đồ khô được “phát triển” bằng ninhydrin (khi làm việc với axit amin, peptide) hoặc đo độ hấp thụ dưới tia UV (khi làm việc với nucleotide).
Việc lựa chọn độ pH được xác định bởi giá trị pK của các nhóm phân ly có trong phân tử của hỗn hợp. Ở pH 6,4, glutamate và aspartate mang điện tích –1 và di chuyển về phía cực dương; sự phân tách của chúng được thực hiện do sự khác biệt về trọng lượng phân tử. Lysine, arginine và histidine di chuyển theo hướng ngược lại và tất cả các axit amin khác tạo nên protein vẫn ở gần vị trí ứng dụng. Khi tách các peptide do quá trình tiêu hóa bằng enzyme, việc giảm độ pH xuống 3,5 sẽ làm tăng điện tích của các nhóm cation và giúp phân tách tốt hơn.
| Axit amin mang ít nhất hai nhóm ion hóa yếu: -COOH và -NH 3+. Trong dung dịch, các nhóm này tồn tại ở hai dạng tích điện và không tích điện, giữa đó duy trì trạng thái cân bằng proton: R-COOH « R-COO – + H + R-NH 3 + « R-NH 2 + H + (axit và bazơ liên hợp ) R -COOH và R-NH 3 + là các axit yếu, nhưng axit đầu tiên mạnh hơn vài bậc. Do đó, hầu hết các nhóm carboxyl (huyết tương, dịch nội bào pH 7,1–7,4) thường ở dạng ion carboxylate, các nhóm amino bị proton hóa. Axit amin không tồn tại ở dạng phân tử (không phân ly) ở bất kỳ độ pH nào. Giá trị pK gần đúng của axit a-amino và nhóm a-amino trong axit a-amino lần lượt là 2 và 10. |
Tổng điện tích (tổng) (tổng đại số của tất cả các điện tích dương và âm) của một axit amin phụ thuộc vào độ pH, tức là vào nồng độ proton trong dung dịch. Điện tích của một axit amin có thể được thay đổi bằng cách thay đổi độ pH. Điều này tạo điều kiện thuận lợi cho việc phân tách vật lý các axit amin, peptide và protein.
Phân tích thành phần axit amin bao gồm quá trình thủy phân hoàn toàn protein hoặc peptide đang nghiên cứu và xác định định lượng tất cả các axit amin trong dịch thủy phân. Vì liên kết peptide ổn định ở pH trung tính nên sử dụng xúc tác axit hoặc kiềm. Xúc tác enzyme ít thích hợp hơn cho quá trình thủy phân hoàn toàn. Quá trình thủy phân hoàn toàn protein thành các axit amin cấu thành của nó chắc chắn sẽ đi kèm với sự mất đi một phần dư lượng axit amin. Để thủy phân, người ta thường sử dụng 6N. dung dịch axit clohydric (110°С), trong ống chân không. Việc xác định định lượng axit amin trong dịch thủy phân được thực hiện bằng máy phân tích axit amin. Trong hầu hết các máy phân tích này, hỗn hợp axit amin được tách trên bộ trao đổi cation sulfonic và việc phát hiện được thực hiện bằng phương pháp đo quang phổ bằng phản ứng với ninhydrin hoặc bằng phương pháp đo huỳnh quang với ồ-phthalic dialdehyt.
Tuy nhiên, dữ liệu về thành phần axit amin của các sản phẩm tương tự thu được ở các phòng thí nghiệm khác nhau đối với từng axit amin đôi khi khác nhau tới 50%.
Những khác biệt này không chỉ do sự khác biệt về giống, loài hoặc công nghệ mà chủ yếu là do các điều kiện thủy phân sản phẩm thực phẩm. Với quá trình thủy phân bằng axit tiêu chuẩn (6 N HСl, 110–120°С, 22–24 giờ), một số axit amin bị phá hủy một phần, bao gồm threonine, serine (từ 10–15% trở lên, thời gian thủy phân càng lâu) và đặc biệt là methionine (30–60%) và cystin 56–60%, cũng như phá hủy gần như hoàn toàn tryptophan và cysteine. Quá trình này được tăng cường khi có một lượng lớn carbohydrate trong sản phẩm. Để xác định định lượng methionine và Cystin, nên tiến hành oxy hóa sơ bộ chúng bằng axit performanceic. Trong trường hợp này, Cystine được chuyển thành axit Cysteic và methionine thành Methionine sulfone, rất ổn định trong quá trình thủy phân axit tiếp theo.
Axit Cystine Cysteine
Một nhiệm vụ khó khăn trong phân tích axit amin là xác định tryptophan. Như đã đề cập, trong quá trình thủy phân bằng axit, nó gần như bị phá hủy hoàn toàn (tới 90%). Do đó, để xác định tryptophan, một trong những phương án thủy phân kiềm 2 N được thực hiện. NaOH, 100°С, 16–18 giờ với sự có mặt của thiếc clorua 5% hoặc 2 N. bari hydroxit, trong đó nó bị phá hủy nhẹ (lên đến 10%). Sự phân hủy tối thiểu xảy ra khi có mặt axit thioglycolic và tinh bột đã được thủy phân trước. (Trong quá trình thủy phân bằng kiềm, serine, threonine, arginine và cysteine bị phá hủy). Sau khi trung hòa bằng hỗn hợp axit xitric và axit clohydric, chất thủy phân ngay lập tức được phân tích (để tránh tạo gel) trên máy phân tích axit amin. Đối với nhiều phương pháp hóa học để xác định tryptophan, theo quy luật, chúng có khả năng tái sản xuất kém trong các sản phẩm thực phẩm và do đó việc sử dụng chúng không được khuyến khích.
Đối với sản phẩm thịt, bổ sung thêm một loại axit amin thiết yếu là hydroxyproline, đặc trưng cho lượng protein mô liên kết có trong thịt. Nó có thể được xác định bằng sắc ký trao đổi ion sử dụng máy phân tích tự động hoặc bằng phương pháp đo màu hóa học. Phương pháp này dựa trên quá trình trung hòa chất thủy phân axit đến pH 6,0, sau đó oxy hóa hydroxyproline bằng dung dịch cloramin T (hoặc cloramin B) 1,4% trong hỗn hợp rượu propyl và dung dịch đệm, xác định bằng phương pháp so màu ở bước sóng 533 nm các sản phẩm oxy hóa của hydroxyproline sau phản ứng với 10% - dung dịch para-dimethylaminobenzaldehyde trong hỗn hợp axit perchloric và rượu propyl (1:2).
Do thực tế là tyrosine, phenylalanine và proline có thể bị oxy hóa một phần khi có mặt oxy nên nên thực hiện quá trình thủy phân bằng axit tiêu chuẩn trong môi trường nitơ. Một số axit amin, bao gồm leucine, isoleucine và valine, cần thời gian thủy phân axit lâu hơn để phân lập hoàn toàn khỏi protein - lên đến 72 giờ. Trong hóa sinh, khi phân tích protein, các mẫu song song được thủy phân trong 24, 48, 72 và 96 giờ.
Để định lượng chính xác tất cả các axit amin, cần phải thực hiện 5 quá trình thủy phân khác nhau, điều này kéo dài thời gian xác định rất nhiều. Thông thường, quá trình thủy phân 1–2 được thực hiện (tiêu chuẩn bằng axit clohydric và oxy hóa sơ bộ bằng axit performanceic).
Để tránh mất axit amin, việc loại bỏ axit dư trong quá trình thủy phân bằng axit phải được thực hiện ngay bằng cách làm bay hơi nhiều lần trong bình hút ẩm chân không có bổ sung nước cất.
Khi máy phân tích hoạt động chính xác, cột trao đổi ion hoạt động khá lâu mà không cần thay thế nhựa. Tuy nhiên, nếu các mẫu chứa một lượng đáng kể thuốc nhuộm và lipid, cột sẽ nhanh chóng bị tắc và cần phải tái sinh nhiều lần, đôi khi phải đóng gói lại cột để khôi phục khả năng tách của nó. Vì vậy, đối với những sản phẩm chứa trên 5% chất béo, trước tiên nên loại bỏ lipid bằng phương pháp chiết. Bảng 2.3 trình bày các điều kiện chuẩn bị mẫu các sản phẩm thực phẩm chính khi phân tích thành phần axit amin.
Bảng 2.3. – Điều kiện chuẩn bị mẫu thực phẩm để phân tích
| Sản phẩm | Phương pháp loại bỏ lipid | Tỷ lệ trọng lượng của protein: HCl (6M) |
| Protein cô đặc (cô lập) | Không bắt buộc | 1:200 |
| Thịt, cá, thịt và cá đóng hộp, nội tạng) | Chiết xuất với lượng diethyl ete gấp 10 lần 3–4 lần hoặc hỗn hợp etanol-chloroform (1:2) gấp 10 lần lượng 2 lần | 1:250 |
| Sữa và các sản phẩm từ sữa | Chiết với lượng mẫu gấp 10 lần bằng hỗn hợp etanol-chloroform (1:2) 2 lần | 1:1000 |
| Ngũ cốc và sản phẩm ngũ cốc | Không bắt buộc | 1:1000 |
| Sản phẩm thực vật | Không bắt buộc | 1:500 |
| Các sản phẩm thịt-rau và cá-rau | Chiết xuất với lượng diethyl ete gấp 10 lần 3-4 lần; hỗn hợp etanol-chloroform (1:2) gấp 10 lần khối lượng cân gấp 2 lần | 1:1000 |
| Trứng, sản phẩm từ trứng | Chiết bằng hỗn hợp etanol-chloroform (1:2), gấp 10 lần khối lượng cân 2 lần | 1:200 |
Câu hỏi bảo mật:
1. Định nghĩa khái niệm “protein”.
2. Protein được chia thành những nhóm nào theo chức năng của chúng trong cơ thể?
3. Vai trò của protein trong dinh dưỡng con người là gì?
6. Bạn biết những axit amin thiết yếu nào và axit amin nào có thể trở nên thiết yếu?
7. Hàm lượng nitơ tổng số trong thực phẩm được xác định như thế nào?
8. Thành phần axit amin của protein được xác định như thế nào?
9. Bạn biết những phương pháp xác định axit amin nào?
§ 2.4. Carbohydrate
Carbohydrate có mặt rộng rãi trong thực vật và động vật, nơi chúng thực hiện cả chức năng cấu trúc và trao đổi chất. Ở thực vật, trong quá trình quang hợp, glucose được tổng hợp từ carbon dioxide và nước, sau đó được lưu trữ dưới dạng tinh bột hoặc chuyển đổi thành cellulose, cơ sở cấu trúc của thực vật. Động vật có thể tổng hợp một số carbohydrate từ chất béo và protein, nhưng hầu hết carbohydrate đều đến từ thực phẩm thực vật.
Nội dung Giới thiệu 1. Các thành phần chính của sữa 2. Phương pháp phân tích axit amin 1. Phương pháp phân tích sắc ký 2. Phương pháp phân tích quang phổ 3. Phương pháp phân tích chuẩn độ 4. Phương pháp phân tích điện hóa 3. Phương pháp xác định thành phần axit amin 1. Xác định định lượng axit amin bằng sắc ký lớp mỏng 3.2. Xác định axit amin bằng phương pháp quang phổ 4. Tổng hợp các tạp chí trừu tượng Danh sách tài liệu đã sử dụng Giới thiệu Vấn đề dinh dưỡng là một trong những vấn đề xã hội quan trọng nhất.
Cuộc sống, sức khỏe và công việc của con người không thể thiếu được thực phẩm bổ dưỡng. Theo lý thuyết về dinh dưỡng cân bằng, chế độ ăn uống của một người không chỉ chứa protein, chất béo và carbohydrate với số lượng cần thiết mà còn các chất như axit amin thiết yếu, vitamin và khoáng chất theo tỷ lệ nhất định có lợi cho con người.
Trong việc tổ chức dinh dưỡng hợp lý, các sản phẩm từ sữa đóng vai trò chính. Điều này hoàn toàn áp dụng cho sữa, giá trị dinh dưỡng của nó là do hàm lượng protein và chất béo trong sữa cao, sự hiện diện của các axit amin thiết yếu, muối canxi và phốt pho rất cần thiết cho sự phát triển bình thường của cơ thể con người. Dễ tiêu hóa là một trong những đặc tính quan trọng nhất của sữa như một sản phẩm thực phẩm. Hơn nữa, sữa còn kích thích hấp thu dưỡng chất từ các thực phẩm khác.
Sữa bổ sung thêm sự đa dạng cho chế độ ăn uống, cải thiện hương vị của các sản phẩm khác và có đặc tính chữa bệnh và phòng bệnh. Sữa chứa hơn 120 thành phần khác nhau, trong đó có 20 axit amin, 64 axit béo, 40 khoáng chất, 15 vitamin, hàng chục enzym, v.v. Giá trị năng lượng của 1 lít sữa nguyên liệu là 2797 kJ. Một lít sữa đáp ứng nhu cầu hàng ngày của một người trưởng thành về chất béo, canxi, phốt pho, 53% protein, 35% vitamin A, C và thiamine và 26% năng lượng. Mục tiêu chính của khóa học này là xác định thành phần axit amin của sữa. 1.
Thành phần chính của sữa
Từ quan điểm hóa lý, sữa là một chất đa phân tán phức tạp... 5.1). Trọng lượng riêng lớn nhất trong sữa là nước (hơn 85%, còn lại... Cặn khô bao gồm tất cả các chất dinh dưỡng có trong sữa. Nó quyết định đến năng suất thành phẩm trong quá trình sản xuất các sản phẩm từ sữa...
Phương pháp phân tích sắc ký
Một trong những phương pháp hứa hẹn nhất là phương pháp có hiệu quả cao... Nhưng ưu điểm của phương pháp này nhiều hơn đáng kể so với nhược điểm của nó. Ngoài ra, nó có thể được sử dụng để hoàn thành phân tích hóa học.... Trên các cột mao quản sắc ký khí hiện đại trong một... Phương pháp này được đặc trưng bởi độ nhạy cao và cho phép định lượng...
Phương pháp phân tích chuẩn độ
Phương pháp phân tích chuẩn độ. Trong số các phương pháp chuẩn độ để xác định định lượng, rộng nhất... Chuẩn độ có thể được thực hiện bằng chất chỉ thị (tím pha lê... Tuy nhiên, phương pháp này có một số nhược điểm đáng kể: việc sử dụng... Để phân tích định lượng từng amino axit, gặp...
Phương pháp phân tích điện hóa
Trong những thập kỷ gần đây, phương pháp điện hóa ngày càng trở nên phổ biến... 3.. trong những điều kiện tối ưu, chúng chỉ có thể xác định được từng cá thể... Vì vậy, một phương pháp đã được phát triển để xác định cực đồ của tryptophan, một phương pháp cơ bản... Phương pháp phân tích điện hóa.
Phương pháp xác định thành phần axit amin
Phương pháp xác định thành phần axit amin 3.1.
Xác định axit amin bằng sắc ký lớp mỏng
84 g axit citric monohydrat hòa tan trong 1 lít nước cất... 3.2.. Sau 10 phút, màng được đặt vào buồng CG có dung dịch đệm nitrat (dung dịch đệm... Phương pháp: 2 (10) µl p dịch thủy phân được đưa vào vạch xuất phát của đĩa... Giọt mẫu và axit amin chuẩn được đưa vào vạch xuất phát trên...
Xác định axit amin bằng phương pháp đo quang phổ
Axit amin, amin bậc một, polypeptide và pepton khi đun nóng với... dung dịch ninhydrin 0,2 - 3% được điều chế trong các dung môi khác nhau (isobu... 2007. tập 2. Tsvetkova N.D.
Chúng ta sẽ làm gì với tài liệu nhận được:
Nếu tài liệu này hữu ích với bạn, bạn có thể lưu nó vào trang của mình trên mạng xã hội:
| Tweet |
Xem thêm các bài tóm tắt, bài tập và luận văn về chủ đề này:
Định nghĩa entropy. Xác định tổn thất thông tin khi truyền tin nhắn qua kênh liên lạc có nhiễu
Định nghĩa bản chất của hệ thống quản lý tài chính: chủ đề và phương pháp. Chúng ta có thể đưa ra một định nghĩa sơ bộ về mục đích của quản lý: cung cấp thông tin hữu ích cho việc quản lý tổ chức
Bửu là một phần của hệ thống thông tin doanh nghiệp, một mặt, là một hoạt động có mục tiêu là cung cấp thông tin cho quản lý.. người ta có thể đưa ra một định nghĩa sơ bộ về mục tiêu của yu, việc cung cấp thông tin.. bản chất của yu nằm ở bản chất phân tích của thông tin, nó được thu thập, nhóm lại, xác định và nghiên cứu..
Những hướng dẫn này nhằm giúp sinh viên thực hiện công việc trong phòng thí nghiệm về mô tả và nhận dạng khoáng sản và đá.. những hướng dẫn này trình bày các thuật ngữ và kỹ thuật mô tả cần thiết.. hướng dẫn cung cấp các tùy chọn nhiệm vụ và ví dụ để thực hiện công việc tính toán và xây dựng đồ họa..
Tài sản của doanh nghiệp: thành phần, mục đích. Xác định nhu cầu vốn cố định và vốn lưu động
Vốn của doanh nghiệp có thể được xem xét dưới nhiều góc độ; trước hết nên phân biệt giữa vốn.
Tội phạm cho phép chúng ta phân biệt cái này với cái kia... để giải quyết tội phạm, trước tiên chúng ta phải xem xét căn cứ của tội phạm... đầu tiên chúng ta cần hiểu căn cứ của tội phạm là gì và sau đó chúng ta sẽ thấy điều đó cơ sở duy nhất là...
Định nghĩa entropy. Xác định tổn thất thông tin khi truyền tin nhắn qua các kênh liên lạc có nhiễu. Tùy chọn để hoàn thành nhiệm vụ
Nhiệm vụ là xác định entropy.. một tin nhắn gồm n ký tự, có m loại ký tự, số chữ cái.. nhiệm vụ là xác định tổn thất thông tin khi truyền tin nhắn qua các kênh liên lạc có nhiễu..
Bài tập thực hành nhiệm vụ kế toán 1. Căn cứ vào thành phần tài sản của Công ty cổ phần Rostov, phân loại tài sản kinh tế của tài sản theo loại và thành phần
Khoa Kế toán và Kinh tế.. Khakhonova N.. bài tập thực hành..
Các nhóm chính của hợp chất vô cơ. Xác định khối lượng mol của đương lượng kẽm. Xác định nhiệt của phản ứng trung hòa. Tốc độ của một phản ứng hóa học. Xúc tác
Giới thiệu.. Khi nghiên cứu hóa học, công việc thực hành trong phòng thí nghiệm có tầm quan trọng rất lớn.
Môi trường tích hợp và thành phần của ngôn ngữ Pascal đối tượng. Thành phần của ngôn ngữ
Nội dung.. Bài giảng Môi trường tích hợp và Thành phần của Ngôn ngữ Pascal đối tượng.. Làm việc với Windows Editing trong Object Pascal..
Giới thiệu về hệ điều hành. Định nghĩa, mục đích, thành phần và chức năng của hệ điều hành
Cơ quan giáo dục nhà nước về giáo dục chuyên nghiệp cao hơn.. Đại học dịch vụ bang Togliatti..
Các giai đoạn sau đây có thể được phân biệt trong việc làm sáng tỏ cấu trúc chính của protein và peptide:
1. Tách protein ở dạng nguyên chất và xác định trọng lượng phân tử
2. Xác định thành phần axit amin
3. Xác định axit amin đầu N
4. Xác định axit amin đầu C
5. Xác định trình tự axit amin
Tách protein ở dạng nguyên chất. Thông thường, nguyên liệu ban đầu chứa nhiều loại protein khác nhau. Về vấn đề này, vấn đề nảy sinh là tách protein quan tâm ở dạng nguyên chất khỏi hỗn hợp này. Khi tinh chế protein, các phương pháp được sử dụng dựa trên sự khác biệt:
1. Điện tích bề mặt của protein
2. Kích thước phân tử của protein (tùy thuộc vào trọng lượng phân tử của chúng)
3. Hoạt tính sinh học do liên kết với cơ chất hoặc chất ức chế
Tách protein dựa trên sự khác biệt về điện tích bề mặt. Tổng điện tích bề mặt của protein ở một giá trị pH nhất định có thể âm, trung tính hoặc dương. Để tách các protein có điện tích khác nhau, như trường hợp của axit amin, có thể sử dụng phương pháp sắc ký trao đổi ion (xem ở trên). Nồng độ protein trong ống nghiệm với dịch rửa giải được xác định bằng máy quang phổ dựa trên cường độ hấp thụ tia cực tím và đồ thị phụ thuộc được vẽ trên thể tích chất lỏng chảy ra khỏi cột sắc ký.
Tách protein theo trọng lượng phân tử. Nếu bạn tưởng tượng các phân tử protein ở dạng quả bóng có kích thước khác nhau, kích thước của chúng phụ thuộc vào trọng lượng phân tử của chúng, thì hóa ra những quả bóng lớn hơn sẽ có khối lượng phân tử hoặc kích thước phân tử lớn hơn. Điều này có nghĩa là protein có thể được tách ra giống như các hạt trong sàng - một sàng phân tử được hình thành bởi gel. Phương pháp này thường được gọi lọc gel hoặc sắc ký loại trừ kích thước. Dưới đây là hình minh họa cách lọc gel có thể tách hỗn hợp protein có kích thước khác nhau (Hình 1.12).
Cột sắc ký chứa đầy gel trương nở. Các hạt gel được làm từ vật liệu polysacarit liên kết ngang và chứa một số lượng lớn micropores. Kích thước của các vi lỗ được chọn sao cho các phân tử nhỏ hơn được tách ra sẽ thâm nhập vào chúng, trong khi các phân tử lớn hơn không thể làm được điều này. Hỗn hợp protein cần tách được đưa lên đỉnh cột và rửa giải bằng dung dịch đệm. Các phân tử lớn bị dòng chất lỏng đi xuống mang đi, không thể xuyên qua các lỗ của hạt gel sẽ di chuyển nhanh hơn. Các phân tử nhỏ hơn thâm nhập vào lỗ chân lông và ở lại đó. Nếu bạn thu thập dung dịch chảy từ cột thành các phần bằng nhau vào các ống nghiệm, thì kết quả là các phần trước của chất lỏng chảy sẽ chứa các protein có kích thước lớn và các phần sau sẽ chứa các protein có kích thước nhỏ hơn. Bằng cách chọn kích thước lỗ xốp, có thể đạt được sự phân tách của nhiều loại hỗn hợp protein.
Hình.1.12. Sơ đồ minh họa quá trình tách protein bằng phương pháp lọc gel
Nếu chúng ta tính đến việc kích thước của một phân tử phụ thuộc vào trọng lượng phân tử, thì hóa ra bằng cách tách protein bằng phương pháp lọc gel, người ta có thể đồng thời xác định được trọng lượng phân tử của nó.
Hình 1.13. Biểu đồ thể hiện sự phụ thuộc của trọng lượng phân tử của protein vào thể tích đầu ra của chúng từ cột sắc ký trong quá trình lọc gel
Thể tích dịch rửa giải chảy ra khỏi cột tỷ lệ nghịch với logarit khối lượng phân tử của protein. Vì vậy, chỉ cần biết thể tích chất lỏng trong đó protein quan tâm thoát ra khỏi cột là đủ để bằng cách sử dụng biểu đồ tương tự, người ta có thể xác định trọng lượng phân tử của nó (Hình 1.13).
Một phương pháp khác cho phép bạn tách protein tùy thuộc vào trọng lượng phân tử của chúng là điện di gel(xem ở trên).
Siêu ly tâm. Nếu bạn lắc một chiếc bình chứa đầy cát và nước rồi đặt nó lên một mặt phẳng, cát sẽ nhanh chóng lắng xuống đáy do lực hấp dẫn. Điều này sẽ không xảy ra với các chất có phân tử cao trong dung dịch, vì chuyển động nhiệt (chuyển động Brown) duy trì sự phân bố đồng đều của chúng trong dung dịch. Sự lắng đọng của các đại phân tử, giống như hạt cát, sẽ chỉ xảy ra nếu chúng chịu một gia tốc đáng kể.
Để xác định các axit amin tạo nên protein, người ta sử dụng phương pháp thủy phân axit (HC1), kiềm (Ba(OH)2) và enzyme. Khi protein tinh khiết, không lẫn tạp chất, bị thủy phân sẽ giải phóng ra 20 loại axit amin khác nhau.
Axit amin, thành phần của protein là
axit amin. Tất cả chúng đều thuộc dãy L, độ lớn và dấu của độ quay quang học phụ thuộc vào bản chất của các gốc axit amin và giá trị pH của dung dịch. Axit D-amino không được tìm thấy trong protein của con người, nhưng chúng được tìm thấy trong thành tế bào của vi khuẩn, như một phần của một số loại kháng sinh (actinomycin).
Các axit amin khác nhau về bản chất hóa học của gốc R, không tham gia vào quá trình hình thành liên kết peptide.
Sự phân loại hợp lý hiện đại của các axit amin dựa trên tính phân cực của các gốc tự do:
Không phân cực (kỵ nước)
 |  |
|
 |  |  |
Cực (ưa nước)
tích điện âm
Tìm thấy trong một số protein dẫn xuất axit amin. Collagen protein mô liên kết có chứa hydroxyproline và oxylysine. Diiodotyrosine là cơ sở cấu trúc của hormone tuyến giáp.
Axit amin có tính chất chung là lưỡng tính(từ tiếng Hy Lạp amphoteros - hai mặt). Trong khoảng pH 4,0-9,0, hầu hết tất cả các axit amin đều tồn tại ở dạng ion lưỡng cực (zwitterion). Nghĩa Điểm đẳng điện của axit amin (IEP, pI)được tính theo công thức:
.
Đối với axit monoaminodicarboxylic, pI được tính bằng một nửa tổng giá trị pK (Bảng 1) của nhóm a- và w-carboxylic, đối với axit diaminomonocarboxylic - bằng một nửa tổng giá trị pK của a- và w-amino các nhóm.
Có những axit amin không thiết yếu (có thể được tổng hợp trong cơ thể con người) và những axit amin thiết yếu không được hình thành trong cơ thể và phải được cung cấp qua thức ăn.
Axit amin thiết yếu: valine, leucine, isoleucine, lysine, methionine, threonine, tryptophan, phenylalanine.
Axit amin có thể thay thế: glycine, alanine, asparagine, aspartate, glutamine, glutamate, proline, serine.
Có điều kiện có thể thay thế(có thể tổng hợp trong cơ thể từ các axit amin khác): arginine (từ citrulline), tyrosine (từ phenylalanine), cysteine (từ serine), histidine (có sự tham gia của glutamine).
Để khám phá và định lượng axit amin trong các đối tượng sinh học, phản ứng với ninhydrin được sử dụng.
Bảng 1. Hằng số phân ly axit amin
| Axit amin | pK 1 | pK 2 | pK 3 |
| Alanya | 2,34 | 9,69 | |
| Arginin | 2,18 | 9,09 | 13,2 |
| Măng tây | 2,02 | 8,80 | |
| Axit aspartic | 1,88 | 3,65 | 9,60 |
| giá trị | 2,32 | 9,62 | |
| Histidin | 1,78 | 5,97 | 8,97 |
| Glycin | 2,34 | 9,60 | |
| Glutamine | 2,17 | 9,13 | |
| Axit glutamic | 2,19 | 4,25 | 9,67 |
| Isoleucine | 2,26 | 9,62 | |
| Leucine | 2,36 | 9,60 | |
| Lysine | 2,20 | 8,90 | 10,28 |
| Methionin | 2,28 | 9,21 | |
| Proline | 1,99 | 10,60 | |
| Loạt | 2,21 | 9,15 | |
| Tyrosine | 2,20 | 9,11 | 10,07 |
| Threonine | 2,15 | 9,12 | |
| Tryptophan | 2,38 | 9,39 | |
| Phenylalanin | 1,83 | 9,13 | |
| Cysteine | 1,71 | 8,33 | 10,78 |
SỔ TAY GIÁO DỤC
ĐỂ CHUẨN BỊ ĐỘC LẬP
ĐẾN LỚP
TRONG HÓA SINH HỌC
dành cho sinh viên đang theo học chuyên ngành
Nhi khoa
Phần I
Hội đồng phương pháp trung ương
Học viện Y khoa bang Smolensk
Smolensk
UDC: 612.015.
Người phản biện: Tiến sĩ Khoa học Y tế, Giáo sư A.S. Solovyov
Tiến sĩ Khoa học Y tế, Giáo sư O.V. Molotkov
Cẩm nang giáo dục và phương pháp tự chuẩn bị các lớp hóa sinh cho sinh viên chuyên ngành Nhi khoa.
Phần I/T.G. Makarenko, K.A. Magenenkova
Smolensk SGMA. 2012. - 92 tr.
Sách hướng dẫn bao gồm một bản tóm tắt ngắn gọn về tài liệu lý thuyết của chương trình hóa sinh không có trong giáo trình giảng dạy, các bài kiểm tra kiểm tra kiến thức, các bài toán tình huống và các câu hỏi thi. Cuốn sách còn bao gồm các câu hỏi chuyên ngành về đặc điểm trao đổi chất ở trẻ em. Cuốn sách gồm 2 phần theo đúng chương trình học kỳ III và IV. Sách hướng dẫn dành cho sinh viên đang theo học chuyên ngành Nhi khoa.
Hội đồng Cơ quan Giáo dục Ngân sách Nhà nước về Giáo dục Chuyên nghiệp Đại học SGMA Roszdrav của Liên bang Nga
Các chủ đề khóa học môn Hóa sinh (43 giờ)
1. Giới thiệu về hóa sinh.
2. Tổ chức cấu trúc của protein.
3. Tính chất lý hóa của protein.
4. Cấu trúc, cơ chế hoạt động của enzyme.
5. Tính chất của enzyme.
6. Quá trình oxy hóa nội bào. Trao đổi năng lượng.
7. Quá trình oxy hóa ngoài ty thể.
8. Con đường dị hóa chung.
9. Quá trình oxy hóa kỵ khí của carbohydrate.
10. Quá trình oxy hóa hiếu khí của carbohydrate. Tân tạo glucose.
11. Con đường Pentoso - photphat.
12. Chuyển hóa triacylglycerol và glycerophospholipids
13. Chuyển hóa cholesterol, spakenolipids.
14. Mối quan hệ giữa chuyển hóa chất béo và carbohydrate. Thể ketone.
15. Con đường chung của quá trình chuyển hóa axit amin trong mô.
16. Cách trung hòa amoniac trong mô.
17. Trao đổi phenylalanine và tyrosine.
18. Trao đổi nucleotide purine và pyrimidine.
19. Hóa sinh của hormone.
20. Sinh hóa hồng cầu. Trao đổi hemoprotein.
21. Tính chất lý hóa của máu. Chức năng hô hấp của máu.
22. Hệ thống đông máu và chống đông máu.
23. Trao đổi nước-muối.
Tài liệu cho hoạt động độc lập của sinh viên
(72 giờ học ngoại khóa)
Cuốn sổ tay này nhằm mục đích phục vụ công việc độc lập ngoại khóa về hóa sinh học cho sinh viên khoa Nhi.
Cuốn sách hướng dẫn này bao gồm một bản tóm tắt tài liệu từ chương trình giảng dạy hóa học sinh học dành cho sinh viên y khoa mà không có trong khóa học giảng dạy trên lớp. Đối với sinh viên theo học chuyên ngành Nhi khoa, được cung cấp thêm thông tin về đặc điểm trao đổi chất ở trẻ em. Bài kiểm tra cho các chủ đề của lớp được sử dụng để kiểm tra kiến thức trung cấp và cuối cùng. Việc thảo luận các vấn đề tình huống dự kiến sẽ được thực hiện trên lớp với sự tham gia của giáo viên. Về vấn đề này, các nhận xét về các nhiệm vụ tình huống không được cung cấp trong sách hướng dẫn. Sách hướng dẫn có chứa danh sách các câu hỏi thi môn hóa sinh.
Chủ đề bài học số 1
THÀNH PHẦN ACID AMIN CỦA PROTEIN. THỦY PHÂN PROTEIN ĐƠN GIẢN. PHÂN TÍCH SẮC KÍCH CỦA AXIT AMIN
2. Mục tiêu làm việc độc lập: mở rộng ý tưởng về tổ chức cấu trúc của protein
Tìm hiểu chức năng sinh học của protein
Thông tin đầy đủ về cấu trúc bậc một, bậc hai, bậc ba, bậc bốn của protein,
Để làm quen với đặc điểm thành phần protein của các mô trong cơ thể trẻ em,
Phát triển kỹ năng sử dụng kiến thức đã học.
4. Danh sách câu hỏi và nhiệm vụ làm việc độc lập
Protein là chất hữu cơ cao phân tử chứa N, bao gồm các axit amin được nối với nhau bằng liên kết peptide và có tổ chức cấu trúc phức tạp.
Thuật ngữ “protein” là do khả năng của các hợp chất này tạo ra kết tủa màu trắng. Tên “protein” xuất phát từ protos (tiếng Hy Lạp) – đầu tiên, quan trọng và phản ánh vai trò trung tâm của loại chất này trong cơ thể.
Hàm lượng protein trong cơ thể con người cao hơn hàm lượng lipid và carbohydrate. Nó chiếm 18–20% tổng khối lượng mô (khối lượng ướt). Sự vượt trội của protein trong mô so với các chất khác được bộc lộ khi tính hàm lượng protein trên khối lượng mô khô - 40 - 45%. Hàm lượng protein trong các mô khác nhau dao động trong một phạm vi nhất định. Hàm lượng protein cao nhất là ở cơ xương (18–23% trọng lượng ướt hoặc 80% trọng lượng mô khô). Mô mỡ có hàm lượng protein thấp (6% trọng lượng ướt hoặc 4% trọng lượng mô khô).
Thời thơ ấu tổng lượng protein trong cơ thể và thành phần của chúng khác với ở người lớn. Trong cơ thể thai nhi, tổng hàm lượng protein không vượt quá 10%. Ở trẻ sơ sinh, nó chiếm 10–12% trọng lượng cơ thể. Trong thời kỳ sơ sinh, có sự gia tăng các quá trình phân hủy protein để lấy năng lượng. Vì điều này, hàm lượng protein tạm thời bị giảm đi. Trong thời thơ ấu, các protein cấu trúc hòa tan chưa trưởng thành chiếm ưu thế. Theo tuổi tác, sự biệt hóa của chúng thành các protein chức năng trưởng thành tăng lên.
Chức năng sinh học của proteinđa dạng. Chúng có liên quan đến tính đặc hiệu protein cao và khả năng tương tác với các phối tử, thụ thể và cấu trúc tế bào khác nhau.
· Chức năng (cấu trúc) dẻo - protein là một phần của mọi cấu trúc tế bào cùng với axit nucleic, lipid, carbohydrate.
Năng lượng - 1 g protein cung cấp khoảng 4 kcal
Chức năng điều tiết:
a) enzyme - hơn 2.000 protein là chất xúc tác sinh học, điều chỉnh tốc độ phản ứng hóa học trong cơ thể
b) nội tiết tố - một số hormone điều chỉnh các quá trình sinh hóa và sinh lý trong cơ thể là protein
c) Protein histone trong chất nhiễm sắc điều hòa hoạt động của gen DNA
d) protein nội bào peaceodulin điều hòa hoạt động của các enzym khác nhau
· Chức năng bảo vệ (miễn dịch). Một số protein (immunoglobulin, interferon, lysozyme) có khả năng liên kết các chất lạ với cơ thể.
· Chức năng cụ thể:
a) co bóp (protein cơ actin và myosin)
b) cơ quan cảm quang (protein rhodopsin của võng mạc)
c) đông máu (yếu tố đông máu fibrinogen)
d) thụ thể - protein là một phần của thụ thể tế bào
Thành phần hóa học của protein
Thành phần cơ bản của protein khá đa dạng. Chúng chứa nhiều hóa chất. Tuy nhiên, các nguyên tố hóa học bắt buộc là carbon (51 - 55%), oxy (21 - 23%), nitơ (16% - giá trị không đổi nhất), hydro (6-7%) và lưu huỳnh (0,5 - 2%)
Thành phần axit amin của protein. Protein tự nhiên chứa các axit amin α, khác nhau về cấu trúc của gốc ở nguyên tử α-carbon.
Kiểm tra
1. Thành phần của protein tự nhiên bao gồm các nguyên tố hóa học: Canxi. Cacbon. Clo. Hydro. Natri. Nitơ. Kali . Ôxy. lưu huỳnh .
Cacbon. Hydro. Nitơ. Ôxy. Lưu huỳnh.
3. Việc thay thế axit amin dẫn đến những thay đổi đáng kể về đặc tính sinh học của protein:
Glutamate thành aspartate. Glutamate thành valine. Valine thành leucine. Glycine thành aspartat. Phenylalanin thành tryptophan. Serine thành threonine. Glycine thành alanine.
4. Việc hoàn thành quá trình thủy phân protein có thể được đánh giá bằng:
Bằng cách hòa tan trầm tích của protein bị biến tính. Do sự biến mất độ đục của dịch thủy phân. Dựa trên phản ứng biuret dương tính. Dựa trên phản ứng ninhydrin dương tính. Dựa trên phản ứng ninhydrin âm tính. Theo phản ứng tích cực của Adamkiewicz. Dựa trên phản ứng biuret âm tính Dựa trên kết quả chuẩn độ formol.
5. Cấu trúc bậc ba của protein được ổn định bằng liên kết:
kỵ nước. Peptit. Disulfua. ion .Hydro.
6. Cấu trúc bậc hai của protein được ổn định bằng liên kết:
Disulfua. Peptit. ion. Kỵ nước. Hydro.
7. Các nhóm chức năng phân cực của protein là:
cacboxyl. Metyl. Phenolic . Amin. Cacbonyl. Indolic.
8. Các nhóm chức năng của axit amin tham gia hình thành liên kết peptit:
Epsilon-amin. Alpha-amin. Beta-cacboxyl. Gamma-cacboxyl. Alpha-cacboxyl. Thiol.
9. Cấu trúc cơ bản, tức là xác định mức độ tổ chức cấu trúc protein cao hơn là:
Sơ đẳng. Sơ trung. Đại học. Đệ tứ.
10. Tính đặc hiệu loài rõ rệt của các protein có cùng đặc tính sinh học tự nhiên là do:
Sự khác biệt cơ bản về thành phần axit amin. Sự khác biệt đáng kể về trọng lượng phân tử. Đặc điểm cấu trúc không gian của phân tử. Khi các cấu trúc bậc một giống nhau, sẽ có sự thay thế axit amin tương đương riêng lẻ. Khi các cấu trúc bậc một giống nhau, sẽ có sự thay thế axit amin không đồng đều. Sự khác biệt trong thành phần của các thành phần phi protein.
11. Hầu hết các axit amin nằm trên bề mặt phân tử protein:
Axit amin không phân cực. Axit amin phân cực. Cả hai nhóm axit amin. Không có nhóm nào trong số này
12. Axit amin chủ yếu nằm sâu trong phân tử protein:
Axit amin không phân cực. Axit amin phân cực. Không có nhóm nào trong số này. Cả hai nhóm axit amin
13. Sự hình thành cấu trúc protein thứ 3 bao gồm:
Axit amin không phân cực. Axit amin phân cực. Cả hai nhóm axit amin . Không có nhóm nào trong số này
14. Nguyên nhân làm thay đổi ái lực của hemoglobin với oxy là:
Những thay đổi trong cấu trúc bậc ba của proton. Sự thay đổi vị trí tương đối của proton. Những thay đổi hợp tác trong hình dạng protoner
15. Câu nói này có đúng không?
Epsilon - nhóm amino của lysine tham gia vào quá trình hình thành liên kết peptide
Đúng. KHÔNG. Không có câu trả lời đúng
16. Câu nói này có đúng không?
Các gốc serine và valine có tính chất ưa nước
Đúng. KHÔNG. Không có câu trả lời đúng
17. Người đi kèm chủ yếu tham gia vào việc hình thành và duy trì:
Cấu trúc bậc một của protein . Cấu trúc bậc ba của protein . Cấu trúc bậc hai của axit nucleic
20%. 10-12%. 5%
Nhiệm vụ tình huống
1. Trên đoạn peptide: Tyr - Cis - Leu - Val - Asp - Ala
Kể tên các gốc axit amin có thể tham gia hình thành liên kết:
Kỵ nước. ion. Disulfua
2. Trên đoạn peptide: Tyr – Cis – Leu – Val – Asp – Ala
chỉ ra trong quá trình hình thành các cấp độ tổ chức cấu trúc của protein mà các liên kết được hình thành bởi các gốc của các axit amin này tham gia
3. Các tế bào hồng cầu có hình lưỡi liềm được tìm thấy trong máu của một sinh viên châu Phi nhập viện với biểu hiện khó thở, chóng mặt, tim đập nhanh và đau chân tay.
Giải thích nguyên nhân hình thành căn bệnh này.
4. Hemoglobin là một protein huyết sắc tố oligomeric phức tạp. Những thay đổi sau dịch mã nào dẫn đến sự hình thành protein có hoạt tính chức năng?
Chủ yếu
Hóa sinh. Ed. E.S. Severina. 2003. trang 9-28, 31-56.
Hóa sinh. Một khóa học ngắn với các bài tập và nhiệm vụ. 2001. Trang 7-25.
A.Ya. Nikolaev Hóa sinh học. 2004. trang 16-35,38-43.
OD Kushmanova. Hướng dẫn làm bài tập thí nghiệm môn Hóa sinh. 1983. trang 15-19, 19-24.
Tài liệu bài giảng
Thêm vào
T.T. Berezov, B.F. Korovkin. Hóa sinh học. 1990. trang 10-41, 49-59.
R. Murray và cộng sự “Hóa sinh con người.” M. "Hòa bình". 1993. tr. 21-51(1)
Makarenko T.G., Stunzhas N.M. Cẩm nang giáo dục và phương pháp “Đặc điểm sinh hóa của cơ thể trẻ em”. Smolensk 2001. 2007.
Makarenko T.G., Stunzhas N.M. Sách giáo khoa được cơ sở giáo dục giáo dục “Đặc điểm trao đổi chất ở trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ” giới thiệu. Smolensk 2012.
A.E. Medvedev “Axit amin được mã hóa di truyền thứ 22 đã được phát hiện” // Vopr. Mật ong. hoá học. 2002. Số 5 -. Với. 432
Chủ đề bài học số 2
PHẢN ỨNG TÌM KIẾM ĐỐI VỚI PROTEIN.
PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỊNH LƯỢNG ĐẠM
2 . Mục tiêu làm việc độc lập: mở rộng kiến thức về các đặc tính hóa lý cơ bản của protein và ý nghĩa ứng dụng y học của chúng, về các phương pháp được sử dụng trong thực hành phòng thí nghiệm để xác định định lượng protein trong chất lỏng sinh học
3. Nhiệm vụ làm việc độc lập:
Có thể đánh giá ý nghĩa y sinh của các tính chất hóa lý cơ bản của dung dịch protein,
Làm quen với hàm lượng protein bình thường trong huyết thanh, với những sai lệch có thể xảy ra và diễn giải sinh hóa của chúng,
Để phát triển kỹ năng làm việc với thông tin mới, phân tích, trình bày logic,
Trong thực hành phòng thí nghiệm
Các phương pháp quang học, đo màu và đo độ azo được sử dụng để định lượng protein.
Phương pháp quang học dựa trên tính chất quang học của protein.
Chúng bao gồm:
- phương pháp đo quang phổ, ước tính cường độ hấp thụ tia UV của protein trong khoảng bước sóng khoảng 200 nm và 260 nm. Mức độ hấp thụ UVL tỷ lệ thuận với nồng độ protein;
- phương pháp đo khúc xạ dựa trên khả năng khúc xạ ánh sáng của dung dịch protein tỷ lệ với nồng độ của chúng;
- phương pháp nephelometric dựa trên khả năng tán xạ ánh sáng của dung dịch protein tỷ lệ với nồng độ của chúng;
- phương pháp phân cực dựa trên khả năng của các dung dịch protein làm quay mặt phẳng ánh sáng phân cực tỷ lệ với nồng độ của chúng.
Phương pháp đo màu dựa trên phản ứng màu của protein - phản ứng biuret, phương pháp Lowry, phương pháp hấp thụ một số thuốc nhuộm bằng protein. Cường độ của màu được xác định bởi nồng độ của dung dịch protein.
Phương pháp đo nitơ dựa trên việc xác định hàm lượng nitơ và chuyển đổi thành nồng độ protein (protein chứa 16% nitơ).
Kiểm tra
1. Phương pháp so màu bao gồm:
Nitơ. Đo quang phổ . Sự hấp phụ của thuốc nhuộm. Phương pháp Lowry. Phương pháp Biuret Đo khúc xạ.
2. Các phương pháp phân tích dựa trên khả năng thu được điện tích của protein:
Phân tích nhiễu xạ tia X. Điện di. Sắc ký trao đổi ion. Đo khúc xạ. Siêu ly tâm. Lọc gel bằng cột.
3. Tác dụng của việc loại bỏ protein khỏi dung dịch có liên quan đến:
Với sự phá vỡ các cấu trúc cấp hai và cấp ba. Với sự phá vỡ liên kết peptit. Với sự mất điện tích của protein. Với sự mất nước của các phân tử của họ. Với sự hình thành cấu trúc bậc bốn.
4. Để chiết xuất protein hoàn chỉnh nhất từ các mô có nguồn gốc động vật, bạn có thể sử dụng các chất lỏng sau:
Hỗn hợp rượu-nước. Aceton. Dung dịch amoni sunfat 10%. Nước cất. Dung dịch NaCl 10%, dung dịch KCl 10%.
5. Bạn có thể loại bỏ các chất có phân tử thấp đi kèm trong quá trình chiết xuất protein mà không làm mất đi đặc tính tự nhiên của protein bằng các phương pháp sau:
Điện di. Lọc cột gel. Kết tủa protein bằng axit trichloroacetic.
6. Các protein có trọng lượng phân tử khác nhau có thể được phân tách bằng kỹ thuật phân tích vật lý và hóa học:
Chạy thận. Điện di. Muối ra. Chuẩn độ điện thế. Lọc gel bằng cột.
7. Ở giá trị pH sinh lý, một axit amin có thể tăng hoặc giảm điện tích:
Cysteine. Arginine. Tyrosine. Serin. Histidin. Threonine.
8. Sự có mặt của globulin trong dung dịch có thể được chứng minh:
Điện di. Lọc gel bằng cột. Muối hóa ở độ bão hòa 50% bằng amoni sunfat. Muối hóa ở độ bão hòa 100% bằng amoni sunfat. Biến tính bằng urê.
9. Hiệu ứng biến tính được đặc trưng bởi các dấu hiệu sau:
Sự hình thành trầm tích nhanh chóng. Mất hoạt động sinh học. Bảo quản các đặc tính sinh học. Vi phạm cấu trúc bậc một của protein. Sự hình thành trầm tích chậm. Vi phạm cấu trúc bậc hai và bậc ba (hình dạng). Duy trì cấu hình.
10. Hiệu ứng muối hóa được đặc trưng bởi các triệu chứng sau:
Khả năng đảo ngược của hiệu ứng. Mất đặc tính sinh học. Bảo quản các đặc tính sinh học. Sự xáo trộn về cấu trúc protein. Duy trì cấu hình protein. Sự hình thành trầm tích nhanh chóng.
11. Sự biến tính protein là do:
Natri clorua. Axit sunfuric. Chì axetat. Amoni sunfat. Bạc nitrat. Axit sunfosalicylic. Urê. Glucose.
Từ độ dốc tiềm năng. Từ trọng lượng phân tử của protein. Từ độ pH của môi trường. Từ hình dạng của các phân tử protein. Từ đặc điểm thành phần axit amin của protein. Từ sự hiện diện của các nhóm giả trong protein.
13. Sử dụng phương pháp muối từ hỗn hợp protein, bạn có thể tách:
Albumin trứng. Gamma globulin. Albumin huyết thanh.
14. Khả năng hòa tan của protein trong nước được đảm bảo bởi các nhóm chức năng của chuỗi polypeptide:
cacboxyl. Metyl. Phenolic. Amin. Cacbonyl. Indolic. Hydroxyl. Thiol. Miễn nhiễm.
15. Số liệu khách quan nhất về trọng lượng phân tử của protein được cung cấp bằng phương pháp hóa lý:
Nội soi. Soi bóng nước. Phân tích cấu trúc tia X. Kính hiển vi điện tử.
16. Để xác định chính xác hàm lượng protein trong dung dịch, bạn có thể sử dụng hiệu ứng quang học:
Sự khúc xạ của tia sáng. Hiệu ứng tán xạ ánh sáng. Hoạt động quang học. Sự hấp thụ các tia trong phần UV của quang phổ.
17. Khi thực hiện lọc gel protein, những điều sau đây được sử dụng:
Sự khác biệt về cường độ điện tích. Sự khác biệt về trọng lượng phân tử . Sự khác biệt về tính chất quang học
18. Trong điện di protein, các chất sau được sử dụng:
Sự khác biệt về kích thước phí . Sự khác biệt về trọng lượng phân tử . Sự khác biệt về tính chất quang học
19. Hỗn hợp protein ceruloplasmin (khối lượng phân tử 151.000, điểm đẳng điện 4,4) và γ - globulin (trọng lượng mol 150.000, điểm đẳng điện 6.3) có thể được tách bằng các phương pháp sau:
Điện di. Gel - lọc. Sắc ký trao đổi ion
20. Phương pháp đo khúc xạ để xác định định lượng protein dựa trên ảnh hưởng của:
Sự tán xạ ánh sáng. Hấp thụ ánh sáng. Khúc xạ ánh sáng . Sự quay của mặt phẳng ánh sáng phân cực
21. Phương pháp đo quang phổ để xác định định lượng protein dựa trên ảnh hưởng của:
Sự tán xạ ánh sáng. Sự hấp thụ ánh sáng ở một bước sóng nhất định. Khúc xạ ánh sáng. Sự quay của mặt phẳng ánh sáng phân cực
22. Tại điểm đẳng điện, phân tử protein:
Họ không phân ly. E trung hòa về điện . Di chuyển về phía anode. Phân hủy thành polypeptide
23. Protein có thể tạo thành dung dịch nước ổn định do có:
Chuyển động Brown Sự hiện diện của các gốc kỵ nước. Sự hiện diện của vỏ điện tích và hydrat hóa trong các phân tử protein. Tất cả các yếu tố trên
Nhiệm vụ tình huống
1. Cho biết hướng chuyển động (đến cực dương, đến cực âm hoặc giữ nguyên vị trí bắt đầu) của peptide tiếp theo
Liz - Gli - Ala - Gli
2. Cho biết hướng chuyển động (đến cực dương, đến cực âm hoặc giữ nguyên vị trí bắt đầu) của peptide tiếp theo
Liz – Glu – Ala – Gli
3. Cho biết hướng chuyển động (đến cực dương, đến cực âm hoặc giữ nguyên vị trí bắt đầu) của peptide tiếp theo
Glu - Gli - Ala - Gli
4. Rút ra kết luận về đặc điểm thành phần axit amin của protein có điểm đẳng điện = 4,7
5. Protein có điểm đẳng điện = 4,7 sẽ thu được điện tích nào trong môi trường trung tính?
Giải thích câu trả lời của bạn.
6. Sau khi muối protein bằng amoni sunfat, thu được kết tủa chứa protein đang nghiên cứu với hỗn hợp muối. Làm thế nào bạn có thể tách protein khỏi muối?
7. Tài liệu cơ bản và bổ sung về chủ đề này
Chủ yếu
Hóa sinh. Ed. E.S. Severina. 2003. trang 67-74
Hóa sinh. Một khóa học ngắn với các bài tập và nhiệm vụ. 2001. trang 29-31
A.Ya. Nikolaev Hóa sinh học. 2004. trang 43-60
OD Kushmanova. Hướng dẫn làm bài tập thí nghiệm môn Hóa sinh. 1983. trang 7-15, 28-29.
Tài liệu bài giảng
Thêm vào
T.T. Berezov, B.F. Korovkin. Hóa sinh học. 1990. trang 37-41.
R. Murray và cộng sự “Hóa sinh con người.” M. "Hòa bình". 1993. trang 43-51 (1)
Yu.E. Veltishchev, M.V. Ermolaev, A.A. Ananenko, Yu.A. Knyazev. “Sự trao đổi chất ở trẻ em.” M.: Thuốc. 1983. 462 tr.
R.M. Kohn, K.S. Miệng. Chẩn đoán sớm các bệnh chuyển hóa. M. "Y học" - 1986.
Makarenko T.G., Stunzhas N.M. Cẩm nang giáo dục và phương pháp “Đặc điểm sinh hóa của cơ thể trẻ em”. Smolensk 2001. 2007
Makarenko T.G., Stunzhas N.M. Cẩm nang giáo dục và phương pháp “Đặc điểm của quá trình trao đổi chất ở trẻ sơ sinh và trẻ nhỏ” (Được UMO khuyến nghị). Smolensk 2012.
Titov V.N. Các khía cạnh phương pháp xác định hàm lượng protein tổng số trong huyết thanh // Klin. phòng thí nghiệm. chẩn đoán, 1995, - .№ 2.S. 15-18
Chủ đề bài học số 3
PHÂN LOẠI PROTEIN.
PROTEIN ĐƠN GIẢN VÀ PHỨC TẠP
2. Mục tiêu làm việc độc lập: củng cố kiến thức về nguyên tắc phân loại protein, tính chất và đặc điểm cấu tạo của các nhóm chính protein đơn giản và phức tạp
3. Nhiệm vụ làm việc độc lập:
Hãy xem xét các nguyên tắc phân loại protein,
Nghiên cứu đặc điểm tính chất, thành phần hóa học và chức năng sinh học của các nhóm protein đơn giản và phức tạp,
Để phát triển kỹ năng làm việc với thông tin mới, phân tích, trình bày logic,
Phát triển kỹ năng sử dụng kiến thức đã học vào hoạt động giáo dục và nghề nghiệp.
4. Danh sách câu hỏi làm việc độc lập
Phân loại protein
Số lượng lớn protein trong cơ thể, tính đa dạng về tính chất và chức năng sinh học của chúng quyết định mức độ phức tạp của phân loại chúng.
Việc phân loại protein theo nguyên tắc cấu trúc và chức năng được đề xuất.
“Ngày nay, người ta biết quá nhiều về protein để có thể hài lòng với cách phân loại cũ và quá ít để tạo ra cách phân loại tốt hơn” - định nghĩa này về tình trạng vấn đề phân loại protein vẫn còn phù hợp cho đến ngày nay.
Về mặt thực tế, việc phân loại protein khá thuận tiện, có tính đến đặc thù về thành phần hóa học và tính chất hóa lý của chúng.
Theo phân loại này, tất cả các protein được chia thành 2 nhóm: đơn giản (protein) và phức tạp (protein.
ĐẾN protein (protein đơn giản) bao gồm các protein chỉ bao gồm các axit amin.
Lần lượt, chúng được chia thành các nhóm tùy thuộc vào tính chất hóa lý và đặc điểm của thành phần axit amin. Các nhóm protein đơn giản sau đây được phân biệt:
· albumin,
· globulin,
· protamine,
· lịch sử,
· prolamin,
· glutelin,
· proteinoid.
Albumin – một nhóm protein phổ biến trong các mô của cơ thể con người. Chúng có trọng lượng phân tử tương đối thấp khoảng 50 – 70 nghìn dalton. Albumin trong phạm vi pH sinh lý có điện tích âm, do hàm lượng axit glutamic cao trong thành phần của chúng nên chúng ở trạng thái đẳng điện ở pH 4,7. Có trọng lượng phân tử thấp và điện tích rõ rệt, albumin di chuyển trong quá trình điện di với tốc độ khá cao. Thành phần axit amin của albumin rất đa dạng; chúng chứa toàn bộ các axit amin thiết yếu. Albumin là protein có tính ưa nước cao. Chúng hòa tan trong nước cất. Một lớp vỏ hydrat hóa mạnh mẽ được hình thành xung quanh phân tử albumin, do đó cần có nồng độ amoni sunfat cao 100% để muối chúng ra khỏi dung dịch. Albumin thực hiện chức năng cấu trúc và vận chuyển trong cơ thể và tham gia vào việc duy trì các hằng số vật lý và hóa học của máu.
Globulin– một nhóm protein phổ biến, thường đi kèm với albumin. Chúng có trọng lượng phân tử cao hơn albumin - khoảng 200 nghìn dalton, do đó chúng di chuyển chậm hơn trong quá trình điện di. Điểm đẳng điện của globulin là pH 6,3 – 7. Chúng được phân biệt bởi một tập hợp axit amin đa dạng. Globulin không tan trong nước cất; chúng tan trong dung dịch muối KCl và NaCl ở nồng độ 5–10%. Globulin ít hydrat hóa hơn albumin, do đó chúng được muối ra khỏi dung dịch đã bão hòa 50% với amoni sunfat. Globulin trong cơ thể thực hiện các chức năng cấu trúc, bảo vệ và vận chuyển.
Histones– có trọng lượng phân tử nhỏ 11-24 nghìn dalton. Chúng rất giàu axit amin kiềm lysine và arginine nên ở trạng thái đẳng điện trong môi trường kiềm mạnh ở pH 9,5 - 12. Trong điều kiện sinh lý, histone mang điện tích dương. Trong các loại histone khác nhau, hàm lượng arginine và lysine khác nhau và do đó chúng được chia thành 5 loại. Histones H1 và H2 rất giàu lysine, histone H3 rất giàu arginine. Các phân tử histone có tính phân cực, rất ưa nước và do đó khó tách muối ra khỏi dung dịch. Trong tế bào, histone tích điện dương thường liên kết với DNA tích điện âm trong chất nhiễm sắc. Histone trong chất nhiễm sắc tạo thành một giàn giáo trên đó phân tử DNA được quấn vào. Các chức năng chính của histone là cấu trúc và điều tiết.
Protamine- Protein có tính kiềm phân tử thấp. Trọng lượng phân tử của chúng là 4 - 12 nghìn dalton. Protamine chứa tới 80% arginine và lysine. Chúng có trong nucleoprotein của cá sữa - klupein (cá trích), cá thu (cá thu).
Prolamin, glutelin – protein thực vật giàu axit glutamic (lên tới 43%) và axit amin kỵ nước, đặc biệt là proline (lên tới 10 - 15%). Do đặc thù của thành phần axit amin, prolamin và glutelin không hòa tan trong nước và dung dịch muối, nhưng hòa tan trong rượu etylic 70%. Prolamin và glutelin là protein thực phẩm của ngũ cốc, tạo nên cái gọi là protein gluten. Protein gluten bao gồm secalin (lúa mạch đen), gliadin (lúa mì), hordein (lúa mạch), avenin (yến mạch). Ở thời thơ ấu, có thể không dung nạp được protein gluten, loại protein được tạo ra trong tế bào bạch huyết ruột. Bệnh lý ruột Celiac phát triển và hoạt động của các enzym đường ruột giảm. Về vấn đề này, nên cho trẻ uống thuốc sắc ngũ cốc sau 4 tháng tuổi. Gạo và ngô không chứa protein gluten.
Proteinoid(giống như protein) - protein dạng sợi không tan trong nước. Chúng là một phần của các mô hỗ trợ (xương, sụn, gân, dây chằng). Chúng được đại diện bởi collagen, Elastin, Keratin, Fibrein.
Colagen ( keo sinh ) – Là một loại protein được phân bố rộng rãi trong cơ thể, nó chiếm khoảng một phần ba tổng số protein trong cơ thể. Nó là một phần của xương, sụn, răng, gân và các mô khác.
Đặc điểm của thành phần axit amin của collagen trước hết bao gồm hàm lượng glycine cao (1/3 tổng số axit amin), proline (1/4 tổng số axit amin) và leucine. Collagen chứa các axit amin quý hiếm hydroxyproline và hydroxylysine nhưng thiếu axit amin tuần hoàn.
Chuỗi polypeptide của collagen chứa khoảng 1000 axit amin. Có một số loại collagen tùy thuộc vào sự kết hợp của các loại chuỗi polypeptide khác nhau trong đó. Các loại collagen hình thành sợi bao gồm collagen loại I (chiếm ưu thế ở da), collagen loại II (chiếm ưu thế trong sụn) và collagen loại III (chiếm ưu thế trong mạch máu). Ở trẻ sơ sinh, phần lớn collagen thuộc loại III, ở người lớn - loại II và I.
Cấu trúc thứ cấp của collagen là một chuỗi xoắn alpha “bị gãy”, vòng xoắn này chứa 3,3 axit amin. Bước xoắn ốc là 0,29 nm.
Ba chuỗi polypeptide của collagen được sắp xếp dưới dạng sợi dây xoắn ba, cố định bằng liên kết hydro và tạo thành đơn vị cấu trúc của sợi collagen - tropocollagen. Các cấu trúc Tropocollagen xếp thành hàng song song, lệch nhau theo chiều dọc, cố định bằng liên kết cộng hóa trị và tạo thành sợi collagen. Trong khoảng trống giữa tropocollagen, canxi được lắng đọng trong mô xương. Sợi collagen chứa carbohydrate giúp ổn định các bó collagen.
Keratin - protein của tóc, móng. Chúng không hòa tan trong dung dịch muối, axit và kiềm. Keratin chứa một phần chứa một lượng lớn axit amin chứa lưu huỳnh (lên tới 7–12%), tạo thành cầu nối disulfide mang lại độ bền cao cho các protein này. Trọng lượng phân tử của keratin rất cao, đạt tới 2.000.000 dalton. Keratin có thể có cấu trúc alpha và beta. Trong alpha keratin, ba chuỗi xoắn alpha kết hợp thành một siêu xoắn để tạo thành protofibrils. Protofibrils hợp nhất thành profibrils, sau đó thành macrofibrils. Một ví dụ về beta keratin là sợi tơ.
Đàn hồi – protein của sợi đàn hồi, dây chằng, gân. Elastin không hòa tan trong nước và không thể trương nở. Elastin chứa tỷ lệ glycine, valine và leucine cao (lên tới 25–30%). Elastin có thể co giãn dưới tải và khôi phục kích thước của nó sau khi dỡ bỏ tải. Độ đàn hồi có liên quan đến sự hiện diện của một số lượng lớn các liên kết ngang giữa các chuỗi trong đàn hồi với sự tham gia của axit amin lysine. Hai chuỗi protein tạo thành liên kết lysyl-norleucine. Bốn chuỗi protein tạo thành một liên kết gọi là desmosine.
ĐẾN protein phức tạp (protein) bao gồm các protein, ngoài phần protein còn chứa các chất không phải protein (nhóm giả).
Các protein phức tạp được phân loại theo thành phần hóa học của nhóm chân giả của chúng. Các nhóm protein phức tạp sau đây được phân biệt:
· nhiễm sắc thể,
· lipoprotein,
· glycoprotein,
· photphoprotein,
· metallicoprotein.
Nhiễm sắc thể chứa các hợp chất phi protein có màu như một nhóm giả. Nhóm chromoprotein bao gồm hemoprotein và flavoprotein.
Ở bệnh hemoporotheids Nhóm chân tay giả là heme - một chất hữu cơ chứa sắt tạo nên màu đỏ cho protein. Heme kết hợp với protein globin thông qua sự phối hợp và liên kết kỵ nước. Ví dụ về hemoprotein là protein hồng cầu hemoglobin, protein cơ myoglobin, protein mô cytochrome, enzyme catalase, peroxidase. Hemoprotein tham gia vào quá trình vận chuyển oxy và oxy hóa trong các mô.
Trong flavoprotein chứa một nhóm giả màu vàng. Các nucleotide FAD và FMN có thể được biểu diễn dưới dạng nhóm giả. Flavoprotein bao gồm enzyme succinate dehydrogenase. Một số flavoprotein có chứa kim loại - metallicoflavoprotein. Flavoprotein tham gia vào quá trình oxy hóa trong cơ thể.
Nucleoprotein bao gồm một phần protein và axit nucleic: DNA hoặc RNA. Deoxyribonucleoprotein được định vị trong nhân và ribonucleoprotein được định vị trong cytosol. Protein trong nucleoprotein của nhân được đại diện chủ yếu bởi histone. Các phần protein và phi protein của nucleoprotein được nối với nhau bằng liên kết ion và kỵ nước. Với sự thủy phân hoàn toàn các nucleoprotein, các axit amin, axit photphoric, carbohydrate và bazơ nitơ purine hoặc pyrimidine được hình thành. Nucleoprotein có liên quan đến việc lưu trữ và tái tạo thông tin di truyền.
Lipoprotein Chúng chứa nhiều chất béo khác nhau như một nhóm giả (triacylglycerol, phospholipid, cholesterol, v.v.). Liên kết kỵ nước và ion được hình thành giữa protein và lipid. Lipoprotein thường được chia thành cấu trúc, là một phần của màng tế bào và vận chuyển, vận chuyển chất béo trong máu. Lipoprotein vận chuyển là các hạt hình cầu chứa chất béo kỵ nước bên trong và protein ưa nước trên bề mặt. Một ví dụ về lipoprotein là yếu tố đông máu Thromboplastin.
Phosphoprotein chứa trong thành phần của chúng các gốc axit photphoric nối với serine của phần protein bằng liên kết este. Việc bổ sung axit photphoric vào protein có thể đảo ngược và kèm theo sự hình thành hoặc phá vỡ liên kết ion giữa axit photphoric và các nhóm tích điện của protein, làm thay đổi hoạt động sinh học của phosphoprotein. Phosphoprotein bao gồm các protein cấu trúc của mô xương, caseinogen sữa, ovotelin lòng trắng trứng, một số enzyme (phosphorylase, glycogen synthetase, TAG lipase)
Glycoprotein thường chứa , dư lượng carbohydrate (monosacarit, oligosacarit) được gắn chặt bằng liên kết glycosid. Glycoprotein thường có cấu trúc khảm trong đó các đoạn carbohydrate và protein xen kẽ nhau. Phần carbohydrate mang lại tính đặc hiệu cho glycoprotein và xác định khả năng kháng enzyme của chúng. Glycoprotein được đại diện rộng rãi trong cơ thể con người. Chúng được tìm thấy cả trong mô và chất lỏng sinh học. Chất nhầy nước bọt chứa tới 15% mannose và galactose. Glycoprotein là một số