DVSMU
జనరల్, ఫిజికల్ మరియు కొల్లాయిడ్ కెమిస్ట్రీ విభాగం
వియుక్త
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ. ఫార్మసీలో అప్లికేషన్
పూర్తి చేసినవారు: సమూహం 201-F విద్యార్థి
డానిలోవ్ D. I.
తనిఖీ చేసినవారు: నెమోవ్ V. A.
ఖబరోవ్స్క్, 2005
ప్రణాళిక:
పరిచయం
TLC యొక్క భౌతిక రసాయన ఆధారం
కాగితంపై విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ
థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ బేసిక్స్
- సోర్బెంట్స్
- ద్రావకాలు
- ప్లేట్ తయారీ
- పరీక్ష పరిష్కారాలను వర్తించే సాంకేతికత
క్రోమాటోగ్రఫీ
ప్లేట్లు ఎండబెట్టడం.
వేరు చేయబడిన పదార్థాల గుర్తింపు
ఫార్మసీలో TLC పద్ధతి యొక్క అప్లికేషన్
- స్కానింగ్ డెన్సిటోమెట్రీని ఉపయోగించి HPTLC ద్వారా ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్ల పరిమాణాత్మక నిర్ణయం
- చిన్ (లాథైరస్.) జాతికి చెందిన కొన్ని జాతుల నమూనాల లిపిడ్ మరియు ఫ్లేవనాయిడ్ కూర్పుపై అధ్యయనం
తీర్మానం
సాహిత్యం
పరిచయం
థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ (TLC, TLC) అనేది క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణలో ఎక్కువగా ఉపయోగించే పద్ధతుల్లో ఒకటి, కానీ తక్కువ ప్రజాదరణ పొందింది.
ఇటీవలి వరకు ఉన్న ముఖ్యమైన లోపాలు ఉన్నప్పటికీ, మిశ్రమాల గుణాత్మక విశ్లేషణ కోసం ఇది విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతుంది, ప్రధానంగా దాని తక్కువ ధర మరియు ఫలితాలను పొందే వేగం కారణంగా. థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ (TLC) నిజానికి లిపిడ్ల విభజన కోసం అభివృద్ధి చేయబడింది. కాగితపు క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కంటే వేగవంతమైనది అయినప్పటికీ, దాని ప్రతికూలత ఏమిటంటే, కాగితాన్ని సెల్యులోజ్-ఆధారిత పదార్థాల నుండి మాత్రమే తయారు చేయవచ్చు, ఇది ధ్రువ రహిత పదార్థాల విభజనకు అనుకూలం కాదు. థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క అన్ని ప్రయోజనాలను కలిగి ఉంటుంది, అయితే మెత్తగా మెత్తగా మరియు సజాతీయ పొరను ఏర్పరచగల ఏదైనా పదార్థాన్ని ఉపయోగించడానికి అనుమతిస్తుంది. ఇవి సిలికా జెల్, అల్యూమినా, డయాటోమాసియస్ ఎర్త్ మరియు మెగ్నీషియం సిలికేట్ వంటి అకర్బన పదార్థాలు, అలాగే సెల్యులోజ్, పాలిమైడ్లు మరియు పాలిథిలిన్ పౌడర్ వంటి సేంద్రీయ పదార్థాలు కావచ్చు.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ఫిజికోకెమికల్ పునాదులు.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ఆధారం అధిశోషణ పద్ధతి, అయినప్పటికీ విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ కూడా ఉపయోగించబడుతుంది.
శోషణ పద్ధతి నిశ్చల దశలో వేరు చేయబడిన భాగాల యొక్క సోర్ప్షన్-డెసోర్ప్షన్ డిగ్రీలో వ్యత్యాసంపై ఆధారపడి ఉంటుంది. శోషణం భౌతిక శోషణ, పాలీమోలిక్యులర్ (యాడ్సోర్బెంట్ యొక్క ఉపరితలంపై శోషణం యొక్క అనేక పొరల ఏర్పాటు) మరియు కెమిసోర్ప్షన్ (యాడ్సోర్బెంట్ మరియు యాడ్సోర్బేట్ యొక్క రసాయన పరస్పర చర్య) ఆధారంగా ఉండే వాన్ డెర్ వాల్స్ శక్తుల కారణంగా జరుగుతుంది.
ప్రభావవంతమైన సోర్ప్షన్-నిర్జలీకరణ ప్రక్రియలకు పెద్ద ప్రాంతం అవసరం, ఇది యాడ్సోర్బెంట్‌పై కొన్ని డిమాండ్లను ఉంచుతుంది. దశల విభజన యొక్క పెద్ద ఉపరితల వైశాల్యంతో, మిశ్రమం భాగాల దశల మధ్య సమతుల్యత త్వరగా ఏర్పడుతుంది మరియు ప్రభావవంతమైన విభజన జరుగుతుంది.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతిలో ఉపయోగించే మరొక రకం విభజన ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ.
విభజన క్రోమాటోగ్రఫీలో, రెండు దశలు - మొబైల్ మరియు స్థిరమైనవి - ఒకదానితో ఒకటి కలపని ద్రవాలు. పదార్ధాల విభజన ఈ దశల మధ్య వాటి పంపిణీ గుణకాలలో వ్యత్యాసంపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
మొట్టమొదటిసారిగా, సన్నని-పొర క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతి "పేపర్ థిన్-లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ"గా ప్రకటించింది, ఇది భాగాల విభజన యొక్క పంపిణీ పద్ధతిపై ఆధారపడింది.
కాగితంపై విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ.
ఈ పద్ధతిలో ఉపయోగించే క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాగితం (ఫిల్టర్ పేపర్ యొక్క ప్రత్యేక గ్రేడ్‌లు) రంధ్రాలలో నీరు (20-22%) కలిగి ఉన్నందున, సేంద్రీయ ద్రావకాలు మరొక దశగా ఉపయోగించబడతాయి.
కాగితంపై క్రోమాటోగ్రఫీని ఉపయోగించడం వల్ల అనేక ముఖ్యమైన ప్రతికూలతలు ఉన్నాయి: కాగితం కూర్పు మరియు లక్షణాలపై విభజన ప్రక్రియ యొక్క ఆధారపడటం, నిల్వ పరిస్థితులు మారినప్పుడు కాగితం రంధ్రాలలో నీటి కంటెంట్‌లో మార్పులు, చాలా తక్కువ క్రోమాటోగ్రఫీ వేగం ( చాలా రోజుల వరకు), మరియు ఫలితాల తక్కువ పునరుత్పత్తి. ఈ లోపాలు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పద్ధతిగా పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీ వ్యాప్తిని తీవ్రంగా ప్రభావితం చేస్తాయి.
అందువల్ల, సోర్బెంట్ యొక్క పలుచని పొరలో క్రోమాటోగ్రఫీ కనిపించడం - సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ - సహజంగా పరిగణించబడుతుంది.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రాథమిక అంశాలు.
TLC పద్ధతిలో, పదార్ధాల క్రోమాటోగ్రఫీ ఘన ఫ్లాట్ సబ్‌స్ట్రేట్‌పై జమ చేసిన సోర్బెంట్ యొక్క పలుచని పొరలో జరుగుతుంది. ఈ పద్ధతిలో విభజన ప్రధానంగా సోర్ప్షన్-డెసార్ప్షన్ మీద ఆధారపడి ఉంటుంది.
వివిధ సోర్బెంట్ల ఉపయోగం ఈ పద్ధతిని గణనీయంగా విస్తరించడం మరియు మెరుగుపరచడం సాధ్యం చేసింది.
పద్ధతి ప్రారంభంలో, ప్లేట్లు స్వతంత్రంగా తయారు చేయాలి. కానీ నేడు, ఎక్కువగా ఫ్యాక్టరీ-నిర్మిత ప్లేట్లు ఉపయోగించబడుతున్నాయి, ఇవి చాలా విస్తృత పరిమాణాలు, మీడియా మరియు ఉపరితలాలను కలిగి ఉంటాయి.
ఆధునిక క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్ గాజు, అల్యూమినియం లేదా పాలిమర్‌తో తయారు చేయబడింది (ఉదాహరణకు పాలిటెరెఫ్తాలేట్). గ్లాస్ బేస్ తక్కువ జనాదరణ పొందుతున్నందున (ఇది తరచుగా విరిగిపోతుంది, సోర్బెంట్ పొరను దెబ్బతీయకుండా ప్లేట్‌ను అనేక భాగాలుగా విభజించడం అసాధ్యం, బరువు ఎక్కువగా ఉంటుంది), అల్యూమినియం ఫాయిల్‌ను ఉపయోగించే ప్లేట్లు ఎక్కువగా ఉపయోగించబడతాయి. లేదా పాలిమర్‌లు స్థావరాలుగా ఉంటాయి.
సోర్బెంట్‌ను పరిష్కరించడానికి, జిప్సం, స్టార్చ్, సిలికా సోల్ మొదలైనవి ఉపయోగించబడతాయి, ఇవి ఉపరితలంపై సోర్బెంట్ ధాన్యాలను కలిగి ఉంటాయి. పొర యొక్క మందం భిన్నంగా ఉండవచ్చు (100 లేదా అంతకంటే ఎక్కువ మైక్రాన్లు), కానీ అతి ముఖ్యమైన ప్రమాణం ఏమిటంటే, పొర క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్లో ఎక్కడైనా మందంతో ఏకరీతిగా ఉండాలి.
సోర్బెంట్స్
అత్యంత సాధారణ సోర్బెంట్ సిలికా జెల్.
సిలికా జెల్ అనేది హైడ్రేటెడ్ సిలిసిక్ యాసిడ్, సోడియం సిలికేట్‌పై ఖనిజ ఆమ్లాల చర్య ద్వారా ఏర్పడిన సోల్ను ఎండబెట్టడం ద్వారా ఏర్పడుతుంది. సోల్ను గ్రౌండింగ్ చేసిన తర్వాత, ఒక నిర్దిష్ట ధాన్యం పరిమాణంలో ఒక భాగం ఉపయోగించబడుతుంది (ప్లేట్లో సూచించబడుతుంది, సాధారణంగా 5-20 మైక్రాన్లు).
సిలికా జెల్ అనేది ధ్రువ సోర్బెంట్, దీనిలో -OH సమూహాలు క్రియాశీల కేంద్రాలుగా పనిచేస్తాయి. ఇది ఉపరితలంపై నీటిని సులభంగా శోషిస్తుంది మరియు హైడ్రోజన్ బంధాలను ఏర్పరుస్తుంది.
అల్యూమినా. అల్యూమినియం ఆక్సైడ్ బలహీనమైన ప్రాథమిక యాడ్సోర్బెంట్ మరియు బలహీనమైన ప్రాథమిక మరియు తటస్థ సమ్మేళనాలను వేరు చేయడానికి ప్రధానంగా ఉపయోగించబడుతుంది. అల్యూమినియం ఆక్సైడ్ ప్లేట్ల యొక్క ప్రతికూలత ఏమిటంటే, అధిక ఉష్ణోగ్రతల వద్ద (100-150 0 C) ఓవెన్లో ఉపయోగించే ముందు ఉపరితలం యొక్క తప్పనిసరి క్రియాశీలత మరియు సిలికా జెల్‌తో పోలిస్తే పొర యొక్క తక్కువ శోషణ సామర్థ్యం.
డయాటోమాసియస్ ఎర్త్ అనేది సహజ ఖనిజాల నుండి పొందిన యాడ్సోర్బెంట్: డయాటోమాసియస్ ఎర్త్స్. సోర్బెంట్ హైడ్రోఫిలిక్ లక్షణాలను కలిగి ఉంటుంది, అయితే సిలికా జెల్‌తో పోలిస్తే పొర యొక్క తక్కువ శోషణ సామర్థ్యం.
మెగ్నీషియం సిలికేట్ సిలికా జెల్ కంటే తక్కువ ధ్రువంగా ఉంటుంది మరియు సాధారణంగా ఎక్కువ ధ్రువ యాడ్సోర్బెంట్లు ప్రభావవంతమైన విభజనను అందించని సందర్భాల్లో ఉపయోగిస్తారు.
సెల్యులోజ్ - సెల్యులోజ్‌తో పూసిన పలుచని పొర పలకలు సంక్లిష్ట సేంద్రీయ అణువులను వేరు చేయడంలో చాలా ప్రభావవంతంగా ఉంటాయి. యాడ్సోర్బెంట్ ప్రధానంగా 50 మైక్రాన్ల వరకు వ్యాసం కలిగిన సెల్యులోజ్ పూసలను కలిగి ఉంటుంది, స్టార్చ్‌తో క్యారియర్‌కు స్థిరంగా ఉంటుంది. కానీ పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీలో వలె, ద్రావకం ముందు భాగం యొక్క పెరుగుదల చాలా నెమ్మదిగా జరుగుతుంది.
అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్‌లలో, క్వాటర్నరీ అమ్మోనియం లేదా అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్‌లో పాల్గొన్న క్రియాశీల సల్ఫో గ్రూపులను కలిగి ఉన్న అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్ రెసిన్లు యాడ్సోర్బెంట్‌గా ఉపయోగించబడతాయి. ఈ రకమైన ప్లేట్‌లతో సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ బలమైన ఆమ్లాలు లేదా ఆల్కాలిస్‌ను కలిగి ఉన్న మొబైల్ దశలతో నిర్వహించబడుతుంది. ఈ ప్లేట్లు అధిక పరమాణు బరువు మరియు యాంఫోటెరిక్ సమ్మేళనాలను వేరు చేయడానికి ప్రభావవంతంగా ఉంటాయి.
పైన పేర్కొన్న సోర్బెంట్‌లు సర్వసాధారణం, అయితే వీటితో పాటు, సోర్బెంట్‌లుగా ఉపయోగించే అనేక పదార్థాలు ఉన్నాయి. ఇవి టాల్క్, కాల్షియం సల్ఫేట్, స్టార్చ్ మొదలైనవి.
అదే సమయంలో, ఇప్పటికే పేర్కొన్న sorbents కూడా వాటిని కొత్త sorption లక్షణాలు ఇవ్వాలని సవరించవచ్చు (రియాజెంట్లతో sorbents ఇంప్రెగ్నేషన్, ఉదాహరణకు AgNO 3, రివర్స్డ్ ఫేజ్తో ప్లేట్లను సృష్టించడం). తక్కువ ఖర్చుతో సాధ్యమయ్యే ఈ వివిధ దశలు, భారీ సంఖ్యలో పదార్థాల క్రోమాటోగ్రఫీ కోసం TLCని ఉపయోగించడం సాధ్యపడుతుంది.
ద్రావకాలు
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీలో, స్వచ్ఛమైన పదార్థాలు (ఇథైల్ అసిటేట్, బెంజీన్ మొదలైనవి) లేదా నిర్దిష్ట నిష్పత్తిలో పదార్థాల (వ్యవస్థలు) మిశ్రమాలు మొబైల్ దశగా ఉపయోగించబడతాయి.
మొబైల్ దశ (సిస్టమ్) ఎంపిక క్రింది నియమాల ప్రకారం నిర్వహించబడుతుంది:
· వేరు చేయబడిన భాగాలు తక్కువ ద్రావణీయతను కలిగి ఉండే వ్యవస్థను ఎంచుకోండి (పదార్థం యొక్క ద్రావణీయత ఎక్కువగా ఉంటే, అప్పుడు పదార్థాలు ముందు భాగంలో కదులుతాయి, ద్రావణీయత తక్కువగా ఉంటే, అవి ప్రారంభంలోనే ఉంటాయి). విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ లేదా రివర్స్ ఫేజ్‌లను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, స్థిరమైన దశ కంటే మొబైల్ దశలో పదార్థాల ద్రావణీయత ఎక్కువగా ఉండాలి.
· వ్యవస్థ యొక్క కూర్పు స్థిరంగా మరియు సులభంగా పునరుత్పత్తి చేయబడాలి.
· ద్రావకం లేదా సిస్టమ్ భాగాలు విషపూరితం లేదా లోపం ఉండకూడదు.
· సిస్టమ్ సారూప్య నిర్మాణం యొక్క పదార్ధాలను పూర్తిగా వేరు చేయాలి మరియు Rfలో తేడాలు కనీసం 0.05 ఉండాలి.
· వ్యవస్థ వేరు చేయబడిన భాగాలలో రసాయన మార్పులకు కారణం కాకూడదు.
· ఎంచుకున్న సిస్టమ్‌లో, విశ్లేషణలు తప్పనిసరిగా వేర్వేరు Rf విలువలను కలిగి ఉండాలి మరియు క్రోమాటోగ్రామ్ మొత్తం పొడవుతో పంపిణీ చేయబడాలి. Rf విలువలు 0.05-0.85 పరిధిలో ఉండటం మంచిది.
· వ్యవస్థను ఎంచుకున్నప్పుడు, వేరు చేయబడిన పదార్ధాల స్వభావాన్ని పరిగణనలోకి తీసుకోవడం కూడా అవసరం. అందువలన, ప్రాథమిక లక్షణాలతో పదార్ధాల క్రోమాటోగ్రఫీ చేసినప్పుడు, సిస్టమ్ ఆమ్ల లక్షణాలను కలిగి ఉండకూడదు మరియు వైస్ వెర్సా.
ప్లేట్లు తయారీ
కొనుగోలు చేసిన ప్లేట్లను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, వారు మొదట క్రోమాటోగ్రఫీ కోసం సిద్ధం చేయాలి. నిల్వ సమయంలో ప్లేట్ యాడ్సోర్బెంట్లు తేమను మాత్రమే కాకుండా, గాలిలో ఉన్న ఇతర పదార్ధాలను కూడా గ్రహిస్తాయి అనే వాస్తవం దీనికి కారణం. క్రోమాటోగ్రఫీ ప్రక్రియలో తయారుకాని ప్లేట్లను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, "ధూళి" ముందు కనిపిస్తుంది, ఇది పెద్ద Rf విలువలతో పదార్థాల నిర్ణయానికి ఆటంకం కలిగిస్తుంది మరియు నీరు వంటి కొన్ని పదార్థాలు మొబైల్ దశ యొక్క కూర్పును మార్చగలవు, తద్వారా పొందిన వాటిని మార్చవచ్చు. Rf విలువలు.
ప్లేట్ల యొక్క ప్రిలిమినరీ తయారీలో ప్లేట్ యొక్క మొత్తం ఎత్తు (మిథనాల్, బెంజీన్, డైథైల్ ఈథర్) వరకు స్వచ్ఛమైన ద్రావకంతో ప్లేట్లను వ్యాప్తి చేయడం, తరువాత ప్లేట్‌ను 110-120 0C ఉష్ణోగ్రత వద్ద 0.5-1 వరకు ఓవెన్లో ఎండబెట్టడం. గంట. ఈ విధంగా, అనేక ప్లేట్లు ఒకేసారి తయారు చేయబడతాయి మరియు పొడి, మూసివున్న ప్రదేశంలో నిల్వ చేయబడినప్పుడు, అనేక నెలలు వాటి లక్షణాలను కలిగి ఉంటాయి.
అధ్యయనంలో ఉన్న పరిష్కారాలను వర్తించే సాంకేతికత.
ఇది ముగిసినట్లుగా, పరీక్ష పదార్థాన్ని వర్తింపజేయడం అంత సంక్లిష్టమైన ఆపరేషన్ కాదు, కానీ అదే సమయంలో, ఇది పొందిన క్రోమాటోగ్రఫీ ఫలితాలను బాగా ప్రభావితం చేస్తుంది.
తరచుగా, ద్రవ విశ్లేషణలు లేదా ఘన పదార్ధాల పరిష్కారాలు ఎటువంటి ప్రాథమిక నమూనా తయారీ లేకుండానే అధ్యయనం చేయబడతాయి.
అందువల్ల, విభజన ఫలితాలను తీవ్రంగా ప్రభావితం చేసే అనేక పాయింట్లను గుర్తుంచుకోవడం ఎల్లప్పుడూ అవసరం.
అత్యంత ముఖ్యమైనది వర్తించే పదార్థాల ఏకాగ్రత. TLCలో సుమారు 1% ద్రావణ సాంద్రతలను వర్తింపజేయడం ఆచారం. కానీ మరోవైపు, పద్ధతి యొక్క సున్నితత్వం చాలా తక్కువ సాంద్రతలతో పదార్థాలను గుర్తించడానికి అనుమతిస్తుంది.
పరీక్షా పదార్ధంలోని భాగాల మొత్తం ఏకాగ్రత తెలియకపోతే, లేదా ఏకాగ్రత తెలిసినప్పటికీ, ఈ రకమైన పదార్ధం ఇంకా క్రోమాటోగ్రాఫ్ చేయబడకపోతే, అధిక-నాణ్యత క్రోమాటోగ్రఫీకి ఎంత పరీక్ష పరిష్కారం సరిపోతుందో నిర్ణయించడం అవసరం. దీన్ని నిర్ణయించడానికి అనేక పద్ధతులు ఉన్నాయి.
మొదట, మీరు క్రోమాటోగ్రాఫ్డ్ సొల్యూషన్స్ యొక్క అనేక మచ్చలను వర్తింపజేయాలి, పరిమాణంలో సమానంగా ఉంటుంది, కానీ వేర్వేరు మొత్తాలతో (ఉదాహరణకు, 1, 2, 5 μl) మరియు క్రోమాటోగ్రఫీ తర్వాత, వేరు చేయబడిన మచ్చల ఆకారం మరియు పరిమాణాన్ని అధ్యయనం చేయండి.
కాబట్టి, సరైన ఏకాగ్రతతో, వేరు చేయబడిన పదార్ధాల ఆకారం ప్రారంభ రేఖపై వర్తించే ఆకారం వలె ఉంటుంది. వేరు చేయబడిన మచ్చలు ప్రారంభ స్థానం కంటే పెద్దగా ఉంటే, అప్పుడు దరఖాస్తు ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంటుంది. ప్లేట్లో "తోకలు" మరియు వేరు చేయబడిన మచ్చల యొక్క క్రమరహిత ఆకృతి కూడా అధిక సాంద్రతను సూచిస్తాయి, కానీ తప్పుగా ఎంపిక చేయబడిన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్ లేదా వేరు చేయబడిన భాగాల యొక్క రసాయన పరస్పర చర్య వలన సంభవించవచ్చు.
అనువర్తిత పదార్ధం మరియు ద్రావణి వ్యవస్థ మొత్తాన్ని ఎంచుకోవడం ద్వారా, ఒక ప్లేట్లో అధ్యయనంలో ఉన్న పదార్ధాలలో పది భాగాల వరకు పూర్తి విభజనను సాధించడం సాధ్యపడుతుంది.
స్టెన్సిల్స్ మరియు తాపనతో ప్రత్యేక పట్టికలో నమూనాలను వర్తింపజేయడం సౌకర్యంగా ఉంటుంది. ప్లేట్ యొక్క దిగువ అంచు నుండి "ప్రారంభ రేఖ" 1-2 సెం.మీ.లో మచ్చలు వర్తించబడతాయి. ప్లేట్ వ్యవస్థలోకి తగ్గించబడినప్పుడు, నమూనాలు దానిలో కరిగిపోవు మరియు మొత్తం దరఖాస్తు పదార్ధం క్రోమాటోగ్రఫీకి లోబడి ఉండటానికి ఇది అవసరం.
పరిష్కారాల అప్లికేషన్ మైక్రోసిరంజితో లేదా గ్రాడ్యుయేట్ కేశనాళికలతో నిర్వహించబడుతుంది. దరఖాస్తు చేసిన ప్రదేశం యొక్క పరిమాణం 4 మిమీ కంటే ఎక్కువ ఉండకూడదు. పెద్ద స్పాట్ పరిమాణంతో, భౌతిక శక్తుల ప్రభావంతో ఆకారంలో మార్పు సంభవిస్తుంది మరియు వేరు చేయబడిన భాగాల సరిహద్దులు అతివ్యాప్తి చెందుతాయి.
ప్లేట్‌లకు పరీక్షా పదార్ధాల దరఖాస్తు సోర్బెంట్ యొక్క విధ్వంసంతో పాటు ఉండకూడదు (ఇది వేరు చేసే నాణ్యతను బాగా ప్రభావితం చేస్తుంది), కాబట్టి డ్రాప్‌ను సోర్బెంట్ పొరకు సూది లేదా కేశనాళికను తాకడం ద్వారా వర్తింపజేయాలి మరియు నొక్కడం ద్వారా కాదు. ఫలిత ప్రదేశం యొక్క పరిమాణం వర్తించే ద్రావణం యొక్క పరిమాణంతో మాత్రమే కాకుండా, ద్రావకం యొక్క ధ్రువణత మరియు దాని మరిగే స్థానం ద్వారా కూడా ప్రభావితమవుతుంది. కాబట్టి, ఒకే పదార్థాన్ని వేర్వేరు ద్రావకాలలో వర్తింపజేసినప్పుడు, మిథనాల్‌ను ద్రావకం వలె ఉపయోగించిన స్టెయిన్ క్లోరోఫామ్ ద్రావణం నుండి వచ్చే మరక కంటే పెద్దదిగా ఉంటుంది. మరోవైపు, ఉపరితలం వేడి చేయబడినప్పుడు, ద్రావకాల యొక్క బాష్పీభవనం మరింత తీవ్రంగా ఉంటుంది మరియు స్పాట్ పరిమాణం కూడా తగ్గుతుంది.
వాస్తవానికి, దరఖాస్తు చేసేటప్పుడు మరకలను ఆరబెట్టడానికి హెయిర్ డ్రయ్యర్‌ను ఉపయోగించడం సులభం, అయితే దరఖాస్తు చేసిన పదార్థాలు వేడి గాలి ప్రభావంతో ఆక్సీకరణం చెందవని పూర్తి విశ్వాసం ఉంటే మాత్రమే.
కొన్నిసార్లు పలకలపై క్రోమాటోగ్రఫీ సమయంలో అంచు ప్రభావం గమనించబడుతుంది, దీని ఫలితంగా మచ్చలు ఒకే రేఖలో ఉండవు కానీ గుర్రపుడెక్క లేదా వికర్ణంగా ఉంటాయి. ఈ ప్రభావాన్ని తొలగించడానికి, ప్రతి స్పాట్ దాని స్వంత ట్రాక్‌తో "సన్నద్ధమవుతుంది", సోర్బెంట్ లైన్‌ను తొలగించడం ద్వారా దరఖాస్తు చేసిన నమూనాను ఇతరుల నుండి వేరు చేస్తుంది. ఇది ఒక పదునైన వస్తువుతో (స్కాల్పెల్ వంటిది) పాలకుడి క్రింద ఉత్తమంగా చేయబడుతుంది, అయితే ఎక్కువ సోర్బెంట్‌ను తొలగించకుండా జాగ్రత్త వహించండి.
పరీక్షా పదార్ధాలను ప్లేట్కు వర్తింపజేసిన తర్వాత, ద్రావణాల యొక్క పూర్తి తొలగింపును నిర్ధారించడం అవసరం, ఎందుకంటే పరీక్ష పదార్ధంలో ఒక చిన్న ద్రావణి కంటెంట్ కూడా విభజనను ప్రభావితం చేస్తుంది మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థ యొక్క కూర్పును కూడా మార్చవచ్చు.
ద్రావకాల తొలగింపు సాధారణంగా 5-10 నిమిషాలు ప్లేట్లను సహజంగా ఎండబెట్టడం ద్వారా లేదా హెయిర్ డ్రయ్యర్తో లేదా ఓవెన్లో వేడి చేయడం ద్వారా నిర్వహించబడుతుంది.
క్రోమాటోగ్రఫీ
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ అనేక పద్ధతులను కలిగి ఉంది, ప్రధానంగా ద్రావకాల కదలిక రకానికి సంబంధించినది.
ఆరోహణ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
అవరోహణ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
క్షితిజ సమాంతర సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
· రేడియల్ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ.
ఆరోహణ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
ఈ రకమైన క్రోమాటోగ్రఫీ అత్యంత సాధారణమైనది మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థ యొక్క ముందు భాగం కేశనాళిక శక్తుల చర్యలో ప్లేట్ వెంట పెరుగుతుంది, అనగా. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్ యొక్క ముందు భాగం క్రింది నుండి పైకి కదులుతుంది. ఈ పద్ధతి కోసం, సరళమైన పరికరాలు ఉపయోగించబడతాయి, ఎందుకంటే ఫ్లాట్ బాటమ్ మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్ స్వేచ్ఛగా సరిపోయేలా బిగుతుగా ఉండే మూత ఉన్న ఏదైనా కంటైనర్‌ను క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఛాంబర్‌గా ఉపయోగించవచ్చు.
ఆరోహణ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతి అనేక ప్రతికూలతలను కలిగి ఉంది. ఉదాహరణకు, ప్లేట్ వెంట ముందు భాగం పెరిగే రేటు అసమానంగా జరుగుతుంది, అనగా. దిగువ భాగంలో ఇది అత్యధికంగా ఉంటుంది మరియు ముందు భాగం పెరిగేకొద్దీ తగ్గుతుంది. గది ఎగువ భాగంలో ద్రావణి ఆవిరి యొక్క సంతృప్తత తక్కువగా ఉండటం దీనికి కారణం, కాబట్టి క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్ నుండి ద్రావకం మరింత తీవ్రంగా ఆవిరైపోతుంది, కాబట్టి దాని ఏకాగ్రత తగ్గుతుంది మరియు కదలిక వేగం తగ్గుతుంది. ఈ లోపాన్ని తొలగించడానికి, ఫిల్టర్ పేపర్ యొక్క స్ట్రిప్స్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఛాంబర్ యొక్క గోడలకు జోడించబడతాయి, దానితో పాటు పెరుగుతున్న క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్ దాని మొత్తం వాల్యూమ్‌లో ఆవిరితో గదిని నింపుతుంది.
కొన్ని క్రోమాటోగ్రఫీ గదులు దిగువన రెండు ట్రేలుగా విభజించబడ్డాయి. ఈ మెరుగుదల క్రోమాటోగ్రాఫ్ సిస్టమ్ యొక్క వినియోగాన్ని తగ్గించడానికి మాత్రమే అనుమతిస్తుంది (క్రోమాటోగ్రాఫ్ సిస్టమ్ యొక్క అవసరమైన ఎత్తును పొందేందుకు ఒక చిన్న వాల్యూమ్ అవసరం) కానీ గదిలో సంతృప్త ఆవిరి పీడనాన్ని పెంచే ద్రావకం కోసం అదనపు క్యూవెట్‌ను ఉపయోగించడానికి కూడా అనుమతిస్తుంది.
మరొక ప్రతికూలత ఏమిటంటే, ద్రావకం ముందు భాగాన్ని పర్యవేక్షించాల్సిన అవసరం ఉంది, ఎందుకంటే ద్రావకం ముందు లైన్ ఎగువ అంచుకు "పారిపోతుంది". ఈ సందర్భంలో, Rf యొక్క వాస్తవ విలువను గుర్తించడం ఇకపై సాధ్యం కాదు.
అవరోహణ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
ఈ క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతి ప్రధానంగా గురుత్వాకర్షణ ప్రభావంతో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్ యొక్క ముందు భాగం ప్లేట్ వెంట దిగుతుంది, అనగా. మొబైల్ ఫేజ్ ముందు భాగం పై నుండి క్రిందికి కదులుతుంది.
ఈ పద్ధతి కోసం, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఛాంబర్ యొక్క ఎగువ భాగానికి క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్‌తో కూడిన క్యూవెట్ జతచేయబడుతుంది, దీని నుండి విక్ ఉపయోగించి క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్కు ద్రావకం సరఫరా చేయబడుతుంది, ఇది క్రిందికి ప్రవహిస్తుంది మరియు పరీక్ష నమూనా క్రోమాటోగ్రాఫ్ చేయబడుతుంది.
ఈ పద్ధతి యొక్క ప్రతికూలతలు పరికరాల సంక్లిష్టతను కలిగి ఉంటాయి. ఈ పద్ధతి ప్రధానంగా పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీలో ఉపయోగించబడుతుంది.
క్షితిజ సమాంతర సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ
ఈ పద్ధతి హార్డ్వేర్ పరంగా అత్యంత సంక్లిష్టమైనది కానీ అత్యంత అనుకూలమైనది. అందువలన, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఛాంబర్‌లో ప్లేట్ అడ్డంగా ఉంచబడుతుంది మరియు సిస్టమ్ విక్ ఉపయోగించి ప్లేట్ యొక్క ఒక అంచుకు సరఫరా చేయబడుతుంది. ద్రావకం ముందు భాగం వ్యతిరేక దిశలో కదులుతుంది.
కెమెరాను చాలా సులభతరం చేయడానికి మిమ్మల్ని అనుమతించే మరో ట్రిక్ ఉంది. దీన్ని చేయడానికి, అల్యూమినియం బేస్‌పై క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్ కొద్దిగా వంగి, గదిలో ఉంచబడుతుంది. ఈ సందర్భంలో, సిస్టమ్ రెండు వైపుల నుండి ఒకేసారి ఇన్‌పుట్‌ను అందుకుంటుంది. ఈ ప్రయోజనం కోసం అల్యూమినియం బ్యాకింగ్ ఉన్న ప్లేట్లు మాత్రమే సరిపోతాయి, ఎందుకంటే ప్లాస్టిక్ మరియు గాజు బేస్ "అన్‌బెండింగ్", అనగా. దాని ఆకారాన్ని నిలుపుకోదు.
ఈ పద్ధతి యొక్క ప్రయోజనాలు సమాంతర cuvette లో, వ్యవస్థ చాలా వేగంగా ఆవిరితో సంతృప్తమవుతుంది, ముందు వేగం స్థిరంగా ఉంటుంది. మరియు క్రోమాటోగ్రఫీని రెండు వైపులా ప్రదర్శించినప్పుడు, ముందు భాగం "పారిపోదు"
రేడియల్ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ.
రేడియల్ థిన్-లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ అనేది ప్లేట్ మధ్యలో టెస్ట్ పదార్థాన్ని వర్తింపజేయడం మరియు ప్లేట్ మధ్యలో నుండి అంచు వరకు కదిలే వ్యవస్థను జోడించడం.
ప్లేట్లు ఎండబెట్టడం.
అధ్యయనంలో ఉన్న పదార్ధాలను వేరుచేసే ప్రక్రియ తర్వాత, ప్లేట్లు ఎండబెట్టబడతాయి. ఇది కూడా ఒక ముఖ్యమైన ప్రక్రియ, ఎందుకంటే ప్లేట్లో ద్రావకం యొక్క జాడలు ఉన్నప్పటికీ, తప్పు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఫలితాలను పొందడం సాధ్యమవుతుంది.
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్ తక్కువ-మరిగే భాగాలను మాత్రమే కలిగి ఉంటే, అప్పుడు 3-5 నిమిషాలు సహజంగా ఎండబెట్టడం సరిపోతుంది. వ్యవస్థలో అధిక-మరుగుతున్న ద్రవాలు (ఆల్కహాల్, నీరు, సేంద్రీయ ఆమ్లాలు మొదలైనవి) ఉన్నట్లయితే, ప్లేట్లను కనీసం 10 నిమిషాలు ఎండబెట్టాలి లేదా ప్లేట్‌ను ఎండబెట్టడం క్యాబినెట్‌లో ఉంచాలి.
వేరు చేయబడిన పదార్థాల గుర్తింపు.
ఎండిన ప్లేట్ అనేది అధ్యయనంలో ఉన్న పదార్థాల క్రోమాటోగ్రామ్. పదార్థాలు రంగులో ఉంటే, వేరు చేయబడిన పదార్థాల రంగును నిర్ణయించడం ద్వారా గుర్తింపు ప్రారంభమవుతుంది.
కానీ చాలా సందర్భాలలో, వేరు చేయబడిన పదార్థాలు రంగులేనివి మరియు సాధారణ దృశ్య పోలిక అసాధ్యం.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ కోసం, వేరు చేయబడిన పదార్థాల యొక్క అనేక రకాల గుణాత్మక విశ్లేషణ (గుర్తింపు) ఉన్నాయి:
· విజువల్ పద్ధతులు మరియు వేరు చేయబడిన పదార్థాల Rf యొక్క నిర్ణయం.
· రంగు ప్రతిచర్యలు.
· సాక్షులతో పోలిక.
· భౌతిక-రసాయన గుర్తింపు పద్ధతులు.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీలో ప్రతి రకమైన గుణాత్మక విశ్లేషణను నిశితంగా పరిశీలిద్దాం.
భౌతిక పద్ధతులు
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్లో వేరు చేయబడిన పదార్ధాల మచ్చల స్థానాన్ని గుర్తించడానికి దృశ్య పద్ధతులు ప్రధానంగా ఉపయోగించబడతాయి. దీన్ని చేయడానికి, ప్లేట్ కనిపించే కాంతిలో మరియు అతినీలలోహిత కాంతి (ప్రధానంగా 366 మరియు 254 nm తరంగదైర్ఘ్యం కలిగిన కాంతి) ఉపయోగించి రెండింటినీ పరిశీలించబడుతుంది.
ఇది గుర్తింపు యొక్క మొదటి దశ, దీనిలో ఎంచుకున్న పరిస్థితుల నాణ్యత మరియు పొందిన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఫలితాలు నిర్ణయించబడతాయి.
అందువల్ల, క్రోమాటోగ్రఫీ నాణ్యతను నిర్ణయించడం (వేరు చేయబడిన పదార్ధాల "తోకలు" లేకపోవడం లేదా వాటి మచ్చల అతివ్యాప్తి, సరైన ఆకారం మరియు పరిమాణం, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ట్రాక్‌ల విలీనం లేకపోవడం మొదలైనవి) మరియు వేరు చేయడం గుర్తించబడింది తదుపరి పరిశోధనకు అనుకూలంగా, గుర్తించబడిన మచ్చల Rf నిర్ణయించబడుతుంది.
Rf విలువ.
TLCలోని ప్రధాన సూచికలలో ఒకటి Rf సూచిక. ఈ పరామితి నిలుపుదల సమయం యొక్క సారూప్యత మరియు వేరు చేయబడిన పదార్ధాల లక్షణాలు, మొబైల్ దశ మరియు సోర్బెంట్ యొక్క కూర్పు మరియు భౌతిక పారామితులపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
Rf విలువ అనేది పదార్ధం ద్వారా పంపబడిన దూరం మరియు ద్రావకం ముందు ద్వారా పంపబడిన దూరానికి నిష్పత్తిగా నిర్ణయించబడుతుంది
Rf విలువ పరిమాణం లేని పరిమాణం మరియు 0 నుండి 1 వరకు విలువను కలిగి ఉంటుంది. అయితే, సాహిత్యంలో, hRf, Rf×100 వంటి సూచికలు తరచుగా కనుగొనబడతాయి, ఇవి ఒకే Rf, కానీ ఆపరేట్ చేయకుండా ఉండటానికి 100తో గుణించబడతాయి. దశాంశ విలువలతో.
Rf యొక్క విలువ సాల్వెంట్ ఫ్రంట్ ద్వారా ప్రయాణించే దూరం ద్వారా ప్రభావితం కాదు, అయితే, అనేక పద్ధతులు 10 సెంటీమీటర్ల దూరంలో ఉన్న ముందు భాగాన్ని వివరిస్తాయి, ఇది Rf గణనలను సులభతరం చేయడానికి మాత్రమే ఉపయోగించబడుతుంది.
ఆచరణలో, ప్రారంభంలో, ద్రావకం ముందరి ద్వారా దాటిన దూరం నిర్ణయించబడుతుంది: ప్రారంభ రేఖ నుండి (మరియు ప్లేట్ యొక్క అంచు నుండి కాదు) క్రోమాటోగ్రఫీ చివరిలో ముందు ఉన్న ప్రదేశానికి. అప్పుడు ప్రారంభ రేఖ నుండి వేరు చేయబడిన పదార్ధం యొక్క ప్రదేశానికి దూరం నిర్ణయించబడుతుంది. ఇక్కడే స్పాట్ పరిమాణం పాత్ర పోషిస్తుంది! అన్నింటికంటే, స్పాట్ రౌండ్ ఆకారం మరియు చిన్న పరిమాణంలో ఉంటే, ఫలితంగా Rf స్పష్టమైన విలువను కలిగి ఉంటుంది. మరియు ఫలితంగా స్పాట్ పెద్దది లేదా ఆకారంలో సక్రమంగా ఉంటే, అటువంటి స్పాట్ యొక్క Rf ని నిర్ణయించేటప్పుడు, లోపం 0.1 కి చేరుకుంటుంది!
విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ విషయంలో, ఒక పదార్ధం యొక్క పంపిణీ గుణకం మరియు దాని Rf సంబంధం ద్వారా సంబంధం కలిగి ఉంటుంది:
ఎక్కడ Spమరియు SN- మొబైల్ మరియు స్థిర దశల క్రాస్ సెక్షనల్ ప్రాంతాలు.
మేము చూస్తున్నట్లుగా, పంపిణీ గుణకం, స్థిరమైన నిష్పత్తితో Sp/Snఅనేది Rfపై దామాషా ప్రకారం ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు దాని ద్వారా నిర్ణయించవచ్చు.
రంగు ప్రతిచర్యలు.
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీలో రంగు ప్రతిచర్యలు చాలా విస్తృతంగా ఉపయోగించబడతాయి. అవి వేరు చేయబడిన భాగాల స్థానాన్ని (సల్ఫ్యూరిక్ యాసిడ్, అయోడిన్ ఆవిరితో చికిత్స) గుర్తించడానికి మాత్రమే కాకుండా, పదార్ధాల తరగతి మరియు గుర్తింపు (వ్యక్తిగత ప్రతిచర్యల సమక్షంలో) రెండింటినీ నిర్ణయించడానికి కూడా ఉపయోగపడతాయి.
మేము ఈ భారీ రకాల రంగు గుణాత్మక ప్రతిచర్యలను ఇక్కడ పరిగణించము; అన్ని గుణాత్మక ప్రతిచర్యలు ఏకీభవించినట్లయితే మరియు పదార్ధం యొక్క పొందిన Rf విలువలు సాహిత్య డేటాతో మూడు వేర్వేరు వ్యవస్థలలో ఏకీభవిస్తే, పదార్ధం గుర్తించబడుతుంది. అయినప్పటికీ, నా అభిప్రాయం ప్రకారం, మరొక భౌతిక మరియు రసాయన పద్ధతిని ఉపయోగించి పరిశోధన ద్వారా అదనపు నిర్ధారణ అవసరం.
సాక్షితో పోలిక.
ఆశించిన కూర్పుతో పదార్థాల అధ్యయనాలను నిర్వహిస్తున్నప్పుడు, క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతి సాక్షి- తెలిసిన పదార్థం. క్రోమాటోగ్రఫీ పరిస్థితులను తట్టుకోవడం కష్టంగా ఉన్నప్పుడు ఈ పద్ధతి ఉపయోగించబడుతుంది, ఈ సిస్టమ్ లేదా యాడ్సోర్బెంట్, గ్రేడియంట్ పద్ధతిని ఉపయోగించడం మొదలైన వాటి కోసం Rfపై సాహిత్య డేటా లేదు. మరియు రంగు ప్రతిచర్యలను నిర్వహిస్తున్నప్పుడు, మీరు రంగులను మాత్రమే కాకుండా, అధ్యయనం మరియు సాక్షుల క్రింద ఉన్న పదార్థాల షేడ్స్‌ను కూడా పోల్చవచ్చు, ఇది కూడా ముఖ్యమైనది.
మరోవైపు, ఈ పద్ధతికి సాక్షుల కోసం అదనపు ఖర్చులు అవసరం.
పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ పద్ధతులు
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీలో పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ అనేక రకాలను కలిగి ఉంటుంది, ఇది పద్ధతి యొక్క అభివృద్ధి యొక్క ప్రతి దశను వర్గీకరిస్తుంది. కొన్ని పద్ధతులు సెమీ-క్వాంటిటేటివ్‌గా మాత్రమే ఉపయోగించబడుతున్నప్పటికీ, అవి ఇప్పటికీ ఆచరణలో ఉపయోగించబడుతున్నాయి.
దృశ్య పోలిక పద్ధతి.పైన చెప్పినట్లుగా, స్పాట్ యొక్క రంగు తీవ్రత మరియు దాని పరిమాణం క్రోమాటోగ్రాఫ్డ్ పదార్ధం మొత్తం మీద ఆధారపడి ఉంటుంది. అందువల్ల, దృశ్యమాన పరిమాణం అనేక పద్ధతులపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
పలుచన పద్ధతి. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పద్ధతి ద్వారా పదార్థాన్ని నిర్ణయించలేని ప్రతి పదార్ధానికి పరిమిత ఏకాగ్రతను నిర్ణయించడంలో ఈ పద్ధతి ఉంటుంది. క్రోమాటోగ్రఫీ చేసినప్పుడు, పరీక్ష పదార్థం ప్లేట్లో కనిపించకుండా పోయే వరకు పలుచన చేయబడుతుంది.
ఈ పద్ధతి ద్వారా నిర్ణయించబడిన పదార్ధం C యొక్క కంటెంట్ సూత్రం ద్వారా కనుగొనబడుతుంది:
ఎక్కడ n- పలుచన, ఎ- క్రోమాటోగ్రఫీ సమయంలో అది కనిపించని పదార్ధం యొక్క ఏకాగ్రత.
స్పాట్ ప్రాంతాన్ని నిర్ణయించే పద్ధతి.పరీక్ష పదార్థాలు మరియు సాక్షుల సమాన వాల్యూమ్‌లను వర్తింపజేస్తే, క్రోమాటోగ్రఫీ తర్వాత వచ్చే స్పాట్ ప్రాంతాలు పదార్ధం యొక్క గాఢత యొక్క లాగరిథమ్‌కు అనులోమానుపాతంలో ఉంటాయి. S= a ln c+b
ఇక్కడ a మరియు b అనుభావిక గుణకాలు ప్రయోగాత్మకంగా నిర్ణయించబడతాయి.
వేరు చేయబడిన పదార్ధం యొక్క స్పాట్ పదునైన సరిహద్దులను కలిగి ఉంటే, అప్పుడు స్పాట్ యొక్క వైశాల్యాన్ని ప్లానిమీటర్‌తో కొలవబడిన గ్రావిమెట్రిక్ పద్ధతి (స్పాట్‌ను కత్తిరించి బరువు పెట్టండి) ద్వారా నిర్ణయించవచ్చు. ఈ పద్ధతి 10-15% వరకు లోపాన్ని ఇస్తుంది.
అయితే, ఇది అనేక ముఖ్యమైన ప్రతికూలతలను కలిగి ఉంది. మొదటి మరియు అత్యంత ముఖ్యమైన విషయం ఏమిటంటే, ఈ విధంగా UV ప్రాంతంలో (254, 366 nm) రంగు లేదా ఫ్లోరోసెన్స్ కలిగి ఉన్న పదార్థాల సాంద్రతను నిర్ణయించడం సాధ్యమవుతుంది. సోర్బెంట్‌కు వివిధ ఫాస్ఫర్‌లను జోడించడం ద్వారా ఈ లోపం తొలగించబడుతుంది, ఇది నిర్ధారణ లోపాన్ని పెంచుతుంది.
అభివృద్ధి చెందుతున్న పదార్ధాలతో (రియాజెంట్స్) ప్లేట్ల చికిత్సను కూడా ఉపయోగించవచ్చు (ఉదాహరణకు, అభివృద్ధి చెందుతున్న రియాజెంట్‌లో నానబెట్టిన ఫిల్టర్ పేపర్‌ను ఉపయోగించడం, తరువాత క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్‌తో పరిచయం మరియు దానిపై అభివృద్ధి చెందిన పదార్ధం యొక్క వైశాల్యాన్ని మరింత నిర్ణయించడం) , కానీ నిర్ధారణ లోపం కూడా ఎక్కువగా ఉంటుంది.
మరింత విశ్వసనీయమైన పరిమాణాత్మక ఫలితం యొక్క అవసరం వాయిద్య పద్ధతుల వినియోగానికి దారితీసింది.
ఎలుషన్ పద్ధతి. ఈ పద్ధతిలో వేరు చేయబడిన పదార్ధం సోర్బెంట్ నుండి ద్రావకంతో కొట్టుకుపోతుంది మరియు దాని ఏకాగ్రత ఇతర పద్ధతుల ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది - ఫోటోమెట్రిక్, పోలారోగ్రాఫిక్, మొదలైనవి. ఇది చాలా ఖచ్చితమైన పద్ధతి, కానీ వేరు చేయబడిన పదార్ధం పరిమాణాత్మకంగా వేరుచేయబడితే మాత్రమే. అధిక శ్రమ తీవ్రత కారణంగా, ఈ పద్ధతి చాలా అరుదుగా ఉపయోగించబడుతుంది మరియు పెద్ద సంఖ్యలో నమూనాలను అధ్యయనం చేస్తున్నప్పుడు ఇది ఆమోదయోగ్యం కాదు.
ఫోటోగ్రాఫిక్ పద్ధతిడిటర్మినేషన్ అనేది వేరు చేయబడిన పదార్ధంతో ప్లేట్లను ఫోటో తీయడం మరియు డెసిన్‌మీటర్‌లను ఉపయోగించి నల్లబడటం స్థాయిని మరింతగా నిర్ణయించడం.
రేడియోగ్రాఫిక్ పద్ధతిఫోటోమెట్రిక్ మాదిరిగానే, వేరు చేయబడిన పదార్ధం యొక్క రేడియేషన్ వల్ల ప్లేట్ యొక్క నల్లబడటం మాత్రమే నిర్ణయించబడుతుంది. లేబుల్ చేయబడిన అణువులతో పదార్థాలను నిర్ణయించేటప్పుడు మాత్రమే ఈ పద్ధతి ఉపయోగించబడుతుంది.
ఫోటోడెసింటోమెట్రిక్ పద్ధతిప్లేట్ నుండి పదార్థాన్ని వేరుచేయకుండా ఉపయోగించవచ్చు మరియు స్పాట్ యొక్క వైశాల్యాన్ని మాత్రమే కాకుండా, దాని తీవ్రతను కూడా నిర్ణయించడంపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
పదార్థాల ఏకాగ్రతను నిర్ణయించడానికి ఇది అత్యంత ఖచ్చితమైన పద్ధతి, ఎందుకంటే ఇది అమరిక గ్రాఫ్‌లను ఉపయోగించి, అన్ని వేరు చేయబడిన పదార్థాల (2-10% వరకు) యొక్క ఖచ్చితమైన పరిమాణాత్మక నిర్ణయాలను తక్కువ వ్యవధిలో నేరుగా ప్లేట్‌పై నిర్వహించడానికి అనుమతిస్తుంది. .
సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ అభివృద్ధితో, డెసింతోమీటర్ల ఉపయోగం పెరుగుతుంది, సున్నితత్వం మరియు తత్ఫలితంగా, వేరు చేయబడిన పదార్థాల సాంద్రతను నిర్ణయించే ఖచ్చితత్వం పెరుగుతుంది మరియు అధిక-పనితీరు గల లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ఖచ్చితత్వాన్ని చేరుకోవడంలో ఆశ్చర్యం లేదు.
అన్నం. 1. సన్నని పొరతో క్రోమాటోగ్రఫీ ప్లేట్‌ను అభివృద్ధి చేయడానికి సాధారణ గది
- మూత
- గాజు గది
- TLC ప్లేట్
- సోర్బెంట్
- నమూనా అప్లికేషన్ సైట్
- ద్రావకం
కొవ్వు ఆమ్లం మిథైల్ ఈస్టర్ల యొక్క సాధారణ TLC క్రోమాటోగ్రామ్.
క్రోమాటోగ్రామ్‌లో ఫేమ్= కొవ్వు ఆమ్లాలు మిథైల్ ఈస్టర్లు = కొవ్వు ఆమ్లాల మిథైల్ ఈస్టర్లు. ప్రారంభించండి= వేరు చేయవలసిన మిశ్రమాల దరఖాస్తు పాయింట్.
క్రోమాటోగ్రామ్ సోర్బ్‌ఫిల్ ప్లేట్లో ప్రదర్శించబడింది. వ్యవస్థ - బెంజీన్. అభివ్యక్తి - సల్ఫ్యూరిక్ యాసిడ్తో చల్లిన తర్వాత కాల్చడం.
చుక్క 1 - కొవ్వు ఆమ్లాల మిథైల్ ఈస్టర్లు. చుక్క 2 - సాధారణ లిపిడ్ల మిథైలేషన్ ఉత్పత్తులు.
బాణంద్రావణి ముందు (సిస్టమ్) యొక్క కదలిక దిశ చూపబడింది. క్రోమాటోగ్రఫీ సమయంలో, ద్రావకం ముందు భాగం ప్లేట్ ఎగువ అంచుకు తరలించబడింది.
ఫార్మసీలో TLC పద్ధతి యొక్క అప్లికేషన్
ఫార్మసీ కోసం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పద్ధతుల యొక్క గొప్ప ప్రాముఖ్యత ఔషధాల ఉత్పత్తిలో, అనేక సందర్భాల్లో, సహజ లేదా సింథటిక్ ఉత్పత్తులను వాటి స్వచ్ఛమైన రూపంలో ప్రాథమికంగా వేరుచేయడం అవసరం. విశ్లేషణలు తరచుగా మిశ్రమాలను భాగాలుగా విభజించడంపై ఆధారపడి ఉంటాయి. TLC పద్ధతి యొక్క ఉపయోగం యొక్క రెండు ఉదాహరణలను చూద్దాం, ఔషధ పదార్ధాల విశ్లేషణ మరియు ఉత్పత్తిలో దాని ప్రాముఖ్యతను రుజువు చేస్తుంది.
స్కానింగ్ డెన్సిటోమెట్రీని ఉపయోగించి HPTLC ద్వారా ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్స్ యొక్క పరిమాణాత్మక నిర్ధారణ
ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్స్ (గ్లైకోసైడ్లు) అనేక ఔషధాలలో క్రియాశీల పదార్థాలు.
ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్ల పరిమాణాత్మక నిర్ధారణకు ప్రస్తుతం ఉపయోగించే చాలా పద్ధతులు యాసిడ్ జలవిశ్లేషణపై ఆధారపడి ఉంటాయి, ఇవి అగ్లైకోన్ యొక్క తదుపరి నిర్ణయంతో ఉంటాయి, చాలా తరచుగా టైట్రిమెట్రిక్ ద్వారా, తక్కువ తరచుగా స్పెక్ట్రల్ విశ్లేషణ పద్ధతుల ద్వారా.
ఇటువంటి పద్ధతులు, సపోనిన్ అణువుల నాశనం ఆధారంగా, అనేక ప్రతికూలతలు ఉన్నాయి. అవి దీర్ఘకాలం ఉంటాయి మరియు మొత్తం సపోనిన్-కలిగిన సన్నాహాల్లో వ్యక్తిగత సాపోనిన్ల నిష్పత్తిని పరిమాణాత్మకంగా అంచనా వేయడానికి అనుమతించవు.
చాలా సందర్భాలలో, రచయితలు తమను తాము ఒక నియమం వలె, TLC పద్ధతిని ఉపయోగించి గుణాత్మక అంచనాకు పరిమితం చేస్తారు, ఇది అత్యంత ప్రాప్యత మరియు సరళమైన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ పద్ధతి. స్కానింగ్ డెన్సిటోమీటర్‌లు లేకపోవడం వల్ల కాంపోనెంట్‌ల పరిమాణాత్మక కంటెంట్‌ని నిర్ణయించడానికి TLCని ఉపయోగించడంలో ఆటంకం ఏర్పడింది.
ఈ పని కొన్ని ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్లు, ఒలియానోలిక్ యాసిడ్ యొక్క ఉత్పన్నాలు, ఔషధాలలో మరియు మొక్కల పదార్థాల నుండి సేకరించిన వాటి యొక్క పరిమాణాత్మక TLC నిర్ధారణ ఫలితాలను అందిస్తుంది.
మేము మంచూరియన్ అరాలియా (అరాలోసైడ్స్) నుండి ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్‌లను అధ్యయన వస్తువులుగా ఎంచుకున్నాము. వివిధ వస్తువులలో గుణాత్మక నిర్ణయం, అలాగే చక్కెర దుంప యొక్క ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్లు - ముందుగా స్థాపించబడిన ఫార్మకోలాజికల్ కార్యకలాపాలతో కూడిన పదార్థాలు. రెండూ తక్కువ (నాలుగు కంటే ఎక్కువ) చక్కెర అవశేషాలతో ఒలియానోలిక్ ఆమ్లం యొక్క ఉత్పన్నాలు, ఇది సోర్బెంట్ యొక్క పలుచని పొరలో వాటి సారూప్య ప్రవర్తనను సూచిస్తుంది.
సపరల్ మాత్రల నుండి వేరుచేయబడిన అరలోసైడ్‌ల మొత్తం మరియు తాజాగా పండించిన రైజోమ్‌ల నుండి వేరుచేయబడిన షుగర్ బీట్ సపోనిన్ల మొత్తం ప్రమాణాలుగా ఉపయోగించబడ్డాయి. ప్లేట్కు దరఖాస్తు కోసం, 0.4 - 2.0 mg / ml కలిగిన సపోనిన్ల యొక్క సజల-ఆల్కహాలిక్ (80% ఇథనాల్) పరిష్కారాలు తయారు చేయబడ్డాయి. TLC ప్లేట్లు "Silufol" (చెక్ రిపబ్లిక్) 15 x 15 cm, HPTLC (అర్మేనియా) కోసం "Armsorb" 6 x 10 cm మరియు "Sorbfil" (రష్యా) 10 x 10 cm ఉపయోగించి క్రోమాటోగ్రఫీ నిర్వహించబడింది. పూర్తి విభజనకు సరిపోయే ముందు ఎత్తు యొక్క ఎత్తు వరుసగా 10.6 మరియు 6 సెం.మీ. 40 °Cకి వేడిచేసిన ప్లేట్‌పై MSh-10 మైక్రోసిరంజిని (రష్యా) ఉపయోగించి నమూనాలు వర్తింపజేయబడ్డాయి, దీని వలన ప్రారంభ స్థానం యొక్క వ్యాసం అనేక దశల్లో నిర్వహించబడుతుంది 2 మిమీ కంటే ఎక్కువ కాదు.
క్రోమాటోగ్రఫీ 20 - 25 °C ఉష్ణోగ్రత వద్ద నిర్వహించబడింది. ఎల్యూషన్ పూర్తయిన తర్వాత, ప్లేట్లను గాలిలో ఎండబెట్టి, ప్రయోగశాల గ్లాస్ స్ప్రే బాటిల్‌ని ఉపయోగించి డిటెక్షన్ రియాజెంట్‌తో చికిత్స చేస్తారు. షిమాడ్జు CS-9000 స్కానింగ్ డెన్సిటోమీటర్ (జపాన్) ఉపయోగించి జోన్ స్కానింగ్ నిర్వహించబడింది, సాధారణంగా సిఫార్సు చేయబడిన మూడు ఎల్యూషన్ సిస్టమ్‌లలో క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా పొందిన జోన్ల నాణ్యత పోల్చబడింది: I. క్లోరోఫామ్ - మిథనాల్ - వాటర్ (30:17:3): II. n-butanol - అమ్మోనియా (7:2:5) - ఎసిటిక్ ఆమ్లం (4:5:1) సాపోనిన్లు).
ఫాస్ఫోటంగ్స్టిక్ యాసిడ్ యొక్క 25% ఆల్కహాల్ ద్రావణం (తెలుపు నేపథ్యంలో సాపోనిన్ల కోరిందకాయ మచ్చలు) గుర్తింపు కారకాలుగా ఉపయోగించబడింది. చాలా తరచుగా ఇటువంటి సమ్మేళనాల పరిమాణాత్మక TLC నిర్ణయాలకు మరియు 10% ఆల్కహాల్ ద్రావణంలో ఫాస్ఫోమోలిబ్డిక్ ఆమ్లం, ట్రైటెర్పెనోయిడ్ జోన్ల అభివృద్ధికి సిఫార్సు చేయబడింది (సపోనిన్ జోన్లు పసుపు నేపథ్యంలో ముదురు నీలం రంగులో ఉంటాయి). తరువాతి సందర్భంలో, అమ్మోనియా ఆవిరితో ప్లేట్లను చికిత్స చేయడం వలన నేపథ్యం రంగు మారడం మరియు మచ్చల విరుద్ధంగా పెరుగుతుంది.
పరిశోధన ఫలితంగా, డెన్సిటోమెట్రిక్ నిర్ణయం కోసం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియకు సరైన పరిస్థితులు ఎంపిక చేయబడ్డాయి. HPTLC కోసం ఆర్మ్‌సోర్బ్ మూడు రకాల ప్లేట్‌లలో ఉత్తమమైనదిగా గుర్తించబడింది. ప్రక్రియ యొక్క అధిక సామర్థ్యం ఒక సన్నని (II0 µm) మరియు సిలికా జెల్ యొక్క పాక్షిక కూర్పు (5-10 µm) పొరలో ఏకరీతిగా ఉంటుంది, ఇది ద్రావకం ముందు భాగం 6 సెం.మీ పెరిగినప్పటికీ జోన్ల యొక్క మంచి విభజన మరియు కనిష్ట కోతను నిర్ధారిస్తుంది. సోర్బ్‌ఫిల్ ప్లేట్లు వేరు చేసే సామర్థ్యంలో దాదాపుగా బాగుంటాయి, కానీ వాటి కోసం ఎలుషన్ సమయం దాదాపు రెండు రెట్లు ఎక్కువ. సిలుఫోల్ ప్లేట్లు, తగినంత అధిక ఎల్యూషన్ రేటుతో, పొడవైన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ మార్గంలో భాగాలను వేరు చేయడానికి అనుమతిస్తాయి, ఇది జోన్ల యొక్క కొంత అస్పష్టతకు దారితీస్తుంది, అయితే వాటి ఉపయోగం కూడా సాధ్యమే.
మొదటి మూడు ఎలుషన్ సిస్టమ్‌లలో దేనిలోనైనా ఎలుషన్ చాలా సమర్థవంతంగా నిర్వహించబడుతుంది. నేను సమయానికి లాభాన్ని ఇస్తాను, IV మొదటి మూడు కంటే చక్కెర దుంప సపోనిన్‌లను బాగా వేరు చేయడానికి అనుమతిస్తుంది.
రెండు డిటెక్షన్ రియాజెంట్‌లు అభివృద్ధి చెందిన క్షణం నుండి 1 - 2 గంటలలోపు స్కాన్ చేసేటప్పుడు జోన్‌లకు చాలా స్థిరమైన రంగును ఇస్తాయి. ఈ కాలం తర్వాత, ఫాస్ఫోనోటంగ్స్టిక్ యాసిడ్తో చికిత్స చేయబడిన ప్లేట్లపై సపోనిన్ జోన్లు క్రిమ్సన్ నుండి వైలెట్ రంగును మారుస్తాయి, ఇది స్కానింగ్ సమయంలో పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ ఫలితాల వక్రీకరణకు దారితీస్తుంది. ఈ సందర్భంలో ఫాస్ఫోమోలిబ్డిక్ యాసిడ్తో చికిత్స చేయడం ఉత్తమం. కాంతి నుండి రక్షించబడిన ప్రదేశంలో నిల్వ చేయబడినప్పుడు, ఈ రియాజెంట్‌తో అభివృద్ధి చేయబడిన జోన్‌లతో కూడిన ప్లేట్లు అభివృద్ధి క్షణం నుండి చాలా నెలల తర్వాత పూర్తిగా పునరుత్పాదక ఫలితాలను ఇచ్చాయి.
ఫాస్ఫోటంగ్స్టిక్ యాసిడ్తో అభివృద్ధి చేసినప్పుడు నమూనాలో సపోనిన్ల గుర్తింపు పరిమితి 5 μg మరియు ఫాస్ఫోమోలిబ్డిక్ ఆమ్లంతో అభివృద్ధి చేసినప్పుడు నమూనాలో 0.5 μg. అమ్మోనియా ఆవిరితో చికిత్స రెండవ సందర్భంలో సపోనిన్ల గుర్తింపు పరిమితిని నమూనాలో 0.2 μgకి తగ్గించడం సాధ్యం చేసింది.
స్కానింగ్ డెన్సిటోమెట్రీని ఉపయోగించి TLC ద్వారా సపోనిన్ల పరిమాణాత్మక నిర్ధారణ ఆర్మ్‌సోర్బ్ ప్లేట్లపై నిర్వహించబడింది (ఈ సందర్భంలో క్రోమాటోగ్రఫీ వేగం 2 రెట్లు ఎక్కువ) లేదా "Sorbfil", II మరియు III ఎలుషన్ సిస్టమ్‌లలో (తక్కువ విషపూరిత భాగాలను కలిగి ఉంటుంది). ఫాస్ఫోమోలిబ్డిక్ యాసిడ్ యొక్క 10% ద్రావణంతో జోన్ డిటెక్షన్ జరిగింది. అనువర్తిత నమూనా యొక్క వాల్యూమ్ 5 µl కంటే ఎక్కువ కాదు, ఎలుయెంట్ ఫ్రంట్ యొక్క ఎత్తు 6 సెం.మీ., ఎలుషన్ సమయం 30 - 60 నిమిషాలు. స్కానింగ్ తరంగదైర్ఘ్యం λ = 675 nm. ప్లేట్లను ప్రాసెస్ చేసిన తర్వాత, అరాలియా మరియు షుగర్ బీట్ యొక్క సపోనిన్లు వేర్వేరు తీవ్రత యొక్క మూడు జోన్ల రూపంలో కనిపిస్తాయి.
స్కానింగ్ సమయంలో పొందిన డెన్సిటోగ్రామ్‌ల యొక్క సాధారణ వీక్షణ అంజీర్లో ప్రదర్శించబడింది. 1.
మాత్రలు "సపరల్" (Fig. 1, a) మరియు "Tincture of Aralia" (Fig. 1,6) వివిధ నిష్పత్తులను గమనించడానికి అనుమతిస్తుంది 44
ఈ మోతాదు రూపాల్లో భాగమైన అరలోసైడ్‌లు A, B మరియు C. మొక్క యొక్క పెరుగుతున్న పరిస్థితులపై ఆధారపడి ముడి పదార్థాలలో వ్యక్తిగత సాపోనిన్ల నిష్పత్తిలో ఇలాంటి అసమానత ముందుగా గుర్తించబడింది. పూర్తి మోతాదు రూపాలలో సపోనిన్ల నిష్పత్తిని పొందిన డెన్సిటోగ్రామ్‌లను ఉపయోగించి సులభంగా అంచనా వేయవచ్చు. క్రోమాటోగ్రామ్ సపోనిన్‌లకు సంబంధించిన 3 జోన్‌లను చూపుతుంది మరియు డెన్సిటోగ్రామ్ వరుసగా మూడు శిఖరాలను కలిగి ఉంటుంది కాబట్టి, క్రమాంకనం ఆధారపడటాన్ని నిర్మించేటప్పుడు అన్ని శిఖరాల ప్రాంతాలు సంగ్రహించబడ్డాయి. ఈ సందర్భంలో లోపం వారి నిష్పత్తి (Fig. 2) యొక్క వైవిధ్యాన్ని పరిగణనలోకి తీసుకుని, భాగాలలో ఒకదాని యొక్క శిఖరం యొక్క పారామితుల ఆధారంగా గణనలను నిర్వహించేటప్పుడు కంటే తక్కువగా ఉంటుంది.
అన్నం. I. TLC ప్లేట్లను స్కాన్ చేయడం ద్వారా పొందిన డెన్సిటోగ్రామ్‌లు: ఎ- అరాలియా సపోనిన్లు "సపరల్" మాత్రల నుండి వేరుచేయబడ్డాయి; 6 - అరాలియా టింక్చర్ నుండి సాపోనిన్లు; వి- చక్కెర దుంప సపోనిన్లు. నమూనాలోని సపోనిన్ల మొత్తం కంటెంట్ 5 μg. ఎ, బి, సి- సపోనిన్ల శిఖరాలు; 0 - ప్రారంభ పంక్తి; f- ముందు వరుస.
అన్నం. 2. నమూనాలోని వాటి కంటెంట్‌పై క్రోమాటోగ్రామ్‌లోని పికాన్ సపోనిన్ల ప్రాంతాల మొత్తానికి అమరిక ఆధారపడటం. / - అరాలియా సపోనిన్స్; 2 - చక్కెర దుంప సపోనిన్లు. అబ్సిస్సా అక్షం అనేది నమూనాలోని సపోనిన్ల కంటెంట్ (mcg), ఆర్డినేట్ అక్షం అనేది గరిష్ట ప్రాంతాల మొత్తం (సెం. 2).
నమూనాలోని పదార్థ కంటెంట్‌పై డెన్సిటోగ్రామ్‌పై గరిష్ట ప్రాంతాల మొత్తం యొక్క అమరిక ఆధారపడటం తెలిసిన సపోనిన్ కంటెంట్‌తో ప్రామాణిక పరిష్కారాల శ్రేణి యొక్క క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా పొందబడింది. 80% ఇథనాల్‌లో సపోనిన్ల యొక్క ఖచ్చితంగా బరువున్న భాగాన్ని కరిగించి, స్థిరమైన బరువుకు ఎండబెట్టడం ద్వారా ప్రారంభ పరిష్కారం తయారు చేయబడింది. ప్రారంభ ద్రావణాన్ని 80% ఇథనాల్తో వరుస పలచన చేయడం ద్వారా పని పరిష్కారాల శ్రేణిని తయారు చేశారు. వాటిలో సపోనిన్ల కంటెంట్ 0.04 - 2.0 mg/ml (5 μl యొక్క నమూనా వాల్యూమ్‌తో ఒక నమూనాలో 0.2 - 10 μg). ఈ ఏకాగ్రత పరిధిని స్కానింగ్ కోసం సరైనదిగా పరిగణించవచ్చు. ఈ పద్ధతి ద్వారా నిర్ణయించబడిన కనీస సపోనిన్ కంటెంట్ 0.2 μg/నమూనా. ఈ సందర్భంలో సంబంధిత ప్రామాణిక విచలనం 0.03 మించదు.
ఫలితంగా క్రమాంకనం డిపెండెన్సీలు నాన్‌లీనియర్‌గా ఉంటాయి, ఇది కుబెల్కా-మంక్ సిద్ధాంతానికి పూర్తిగా అనుగుణంగా ఉంటుంది, ఇది సోర్బెంట్ ద్వారా కాంతిని శోషణ మరియు వికీర్ణాన్ని పరిగణనలోకి తీసుకుంటుంది. తక్కువ సాంద్రతల యొక్క ఇరుకైన పరిధిలో, ఆధారపడటం సరళంగా పరిగణించబడుతుంది (0.2 - 2.0 μg/నమూనా). నమూనాలోని పదార్ధం మొత్తాన్ని మరియు గరిష్ట ప్రాంతాన్ని పరస్పర విలువలుగా మార్చడం ద్వారా వక్రరేఖల యొక్క నాన్‌లీనియర్ భాగాన్ని సరళీకరించవచ్చు మరియు అంజీర్లో చూపిన రూపాన్ని తీసుకుంటుంది. 3.
అన్నం. 3. క్రోమాటోగ్రామ్‌లో (1/S 10 -1) సపోనిన్ల గరిష్ట ప్రాంతాల మొత్తం యొక్క పరస్పర విలువ నమూనాలోని వాటి కంటెంట్ యొక్క పరస్పర విలువపై ఆధారపడటం (1/m - 10 -1). 1
-అరాలియా సపోనిన్స్; 2
- చక్కెర దుంప సపోనిన్లు.
ఫలితంగా అమరిక సంబంధాన్ని ఉపయోగించి, అరాలియా టింక్చర్‌లోని సపోనిన్ల కంటెంట్ నిర్ణయించబడింది. 25 ml వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్లో 5 ml టింక్చర్ 70% ఇథనాల్తో కరిగించబడుతుంది. ఫలితంగా పరిష్కారం యొక్క 5 μl 1 mg/ml (నమూనాలో 5 μg) యొక్క ప్రామాణిక ద్రావణం యొక్క 5 μl ప్రక్కనే ఉన్న బిందువుకు వర్తించబడుతుంది పైన వివరించిన విధంగా ప్రాసెస్ చేయబడింది.
పొందిన ఫలితాలు మరియు FS 42-1647-93 (5.3 mg/ml)ని ఉపయోగించి నిర్ణయించిన ఫలితాల మధ్య వ్యత్యాసం 6 - 7% అతిగా అంచనా వేసే దిశలో ఉంది, ఇది బహుళ-దశల పూర్వ సమయంలో సపోనిన్ల నష్టం ద్వారా వివరించబడుతుంది. FS (టేబుల్) ఉపయోగించి నమూనా తయారీ.
పైన వివరించిన పద్ధతి సపరల్ మాత్రలలో మరియు మొక్కల ముడి పదార్థాలలో (మంచూరియన్ అరాలియా మూలాలు మరియు షుగర్ బీట్ రైజోమ్‌లు) సపోనిన్‌లను గుర్తించడానికి ఉపయోగించబడింది, ముడి పదార్థాల నుండి మాత్రల నుండి సపోనిన్ల ప్రాథమిక సమగ్ర వెలికితీతతో - 80% వేడి ఇథనాల్. మాత్రలు (0.040 గ్రా) కోసం FS 42-1755 - 81 ప్రకారం నిర్ణయం యొక్క ఫలితాల నుండి వ్యత్యాసాలు టింక్చర్ (టేబుల్) కోసం అదే పరిమితుల్లో ఉంటాయి.
అందువల్ల, స్కానింగ్ డెన్సిటోమెట్రీని ఉపయోగించి ఫలితంగా వచ్చే జోన్ల తదుపరి పరిమాణాత్మక అంచనాతో HPTLC పద్ధతిని ఉపయోగించి కొన్ని ట్రైటెర్పెన్ సపోనిన్లు, ఔషధాలలో ఒలియానోలిక్ యాసిడ్ డెరివేటివ్‌లు మరియు మొక్కల ముడి పదార్థాలను వేగంగా పరిమాణాత్మకంగా నిర్ణయించే అవకాశం ప్రదర్శించబడింది.
నిర్ణయం యొక్క ఫలితాలు FS ద్వారా నిర్ణయించిన ఫలితాలతో బాగా సంబంధం కలిగి ఉంటాయి. TLC (FS ద్వారా) ద్వారా ఔషధాల యొక్క ప్రామాణికత యొక్క నిర్ణయాన్ని ప్లేట్లలోని భాగాల జోన్ల తదుపరి స్కానింగ్ మరియు వాటి పరిమాణాత్మక అంచనాతో కలపడానికి సాంకేతికత మిమ్మల్ని అనుమతిస్తుంది. స్కానింగ్ ద్వారా పొందిన క్రోమాటోగ్రామ్‌లు విశ్లేషించబడిన వస్తువులలో వ్యక్తిగత సాపోనిన్ల నిష్పత్తిని గుర్తించడం కూడా సాధ్యపడుతుంది.
అరలోజ్డ్స్ యొక్క పరిమాణాత్మక నిర్ణయం యొక్క ఫలితాలుCTofik-అరాలియా నుండి (I) మరియు టాబ్లెట్‌లు "సపరల్" (2) THC ద్వారా స్కానింగ్ dsnsptoietrnn /" = 0.95, మరియు - 5,/=2,78,/=4
జాతికి చెందిన కొన్ని జాతుల నమూనాల లిపిడ్ మరియు ఫ్లేవనాయిడ్ మిశ్రమాన్ని అధ్యయనం చేయడం (
లాథైరస్
.)
లెగ్యూమ్ కుటుంబానికి చెందిన అనేక మంది ప్రతినిధుల నుండి, అల్ఫాల్ఫా, లూపిన్ క్లోవర్, వెట్చ్, ఫ్లేవనాయిడ్లు వేరుచేయబడ్డాయి, ఇవి విస్తృతమైన చర్యను కలిగి ఉంటాయి: యాంటీ ఇన్ఫ్లమేటరీ, గాయం నయం, వాస్కులర్ బలోపేతం మొదలైనవి. ఐసోఫ్లేవోన్లు రెడ్ క్లోవర్ నుండి వేరుచేయబడ్డాయి: బయోచానిన్ A - 0.8% మరియు ఫార్మోనోనెటిన్ - 0.78%, ఇవి ఈస్ట్రోజెనిక్ చర్యను కలిగి ఉంటాయి.
మేము జాతికి చెందిన కొన్ని జాతులలో ఫ్లేవనాయిడ్ కూర్పును అధ్యయనం చేసాము: Chlugovaya (II), Ch.
ఆహార సంకలనాలు మరియు ఔషధాలలో లిపిడ్ కాంప్లెక్స్ యొక్క సాధ్యమైన ఉపయోగం కోసం, మేము చెట్టు యొక్క గడ్డి మరియు విత్తనాలలో లిపిడ్ల యొక్క పూర్తి పాక్షిక కూర్పును కూడా అధ్యయనం చేసాము.
మెటీరియల్స్ మరియు పద్ధతులు
పొడి ముడి పదార్థాల నుండి లిపిడ్ భిన్నాన్ని వేరుచేయడం బ్లైగ్ మరియు డయ్యర్ పద్ధతి ప్రకారం నిర్వహించబడింది.
1.6 ml స్వేదనజలం ఒక నమూనా (0.2 గ్రా) పొడి మొక్కల పదార్థానికి జోడించబడింది మరియు 24 గంటలు చలిలో ఉంచబడుతుంది. అప్పుడు క్లోరోఫామ్ - మిథనాల్ (1: 2) మిశ్రమం యొక్క 6 ml జోడించబడింది మరియు 3 రోజులు వదిలివేయబడింది, తర్వాత అది 15 నిమిషాలకు 8 వేల rpm వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడింది. 2 ml నీరు మరియు 2 ml క్లోరోఫామ్ క్లియర్ సూపర్నాటెంట్కు జోడించబడ్డాయి. ఫలితంగా 2-దశల వ్యవస్థ వేరు చేసే గరాటులో వేరు చేయబడింది. క్లోరోఫామ్ పొరను మిథనాల్‌తో రెండుసార్లు కడుగుతారు మరియు రోటరీ ఆవిరిపోరేటర్‌పై పొడిగా ఆవిరైపోయింది. అవశేషాలను వాక్యూమ్ డెసికేటర్‌లో ఎండబెట్టి, ఆపై క్లోరోఫామ్‌తో 10 mg/ml సాంద్రతకు కరిగించబడుతుంది మరియు పరిష్కారం + 4 ° C వద్ద స్థిరీకరించబడిన క్లోరోఫామ్‌లో నిల్వ చేయబడుతుంది.
లిపిడ్ భిన్నం యొక్క గుణాత్మక విశ్లేషణ క్రింది ద్రావణి వ్యవస్థలలో కీసెల్‌గెల్ 60 (254) ప్లేట్లపై TLC పద్ధతిని ఉపయోగించి నిర్వహించబడింది:
A. తటస్థ లిపిడ్లకు: 1) హెక్సేన్ - బెంజీన్ (9:1); 2) హెక్సేన్ - ఈథర్ - ఎసిటిక్ యాసిడ్ (90:10:1).
B. ధ్రువ లిపిడ్లకు (ఫాస్ఫోలిపిడ్లు): 1) క్లోరోఫామ్ - అసిటోన్ - మిథనాల్ - ఎసిటిక్ యాసిడ్ - నీరు (6:8:2:2:1), ఆమ్ల; 2) క్లోరోఫామ్ - మెటా-
nol - 26% అమ్మోనియా (65:25:5), ప్రాథమిక; 3) క్లోరోఫామ్ - మిథనాల్ - నీరు (65:25:4), తటస్థ.
ఫాస్ఫోలిపిడ్ల గుణాత్మక కూర్పును నిర్ణయించేటప్పుడు, వారి గుర్తింపు వివిధ డెవలపర్‌లను (అయోడిన్ ఆవిరి, నిన్‌హైడ్రిన్, డ్రాగెన్‌డార్ఫ్ రియాజెంట్, సల్ఫ్యూరిక్ యాసిడ్) మరియు సహాయంతో నిర్వహించబడింది. Rfప్రమాణాలు.
పైన పేర్కొన్న వ్యవస్థలు మరియు కారకాలు చైనీస్ నమూనాల నుండి వేరుచేయబడిన లిపిడ్ భిన్నాల యొక్క సమగ్ర విశ్లేషణకు అనుమతించబడ్డాయి.
ఫ్లేవనాయిడ్ కూర్పును అధ్యయనం చేయడానికి, పెరుగుతున్న సీజన్ దశలను పరిగణనలోకి తీసుకుని, కింది నమూనాలు ఎంపిక చేయబడ్డాయి: I (పుష్పించే దశ); IV (పుష్పించే దశ); III (కంపానియన్) చిగురించే దశ; II (పుష్పించే దశ); II (ఫల దశ); II (పుష్పించే ముందు వృక్ష దశ).
పొడి ముడి పదార్థాల నుండి ఫ్లేవనాయిడ్లను వేరుచేయడం వారి సమగ్ర వెలికితీతను నిర్ధారించే పద్ధతిని ఉపయోగించి నిర్వహించబడింది.
ఈ ప్రయోజనం కోసం, పిండిచేసిన హెర్బ్ యొక్క 1 గ్రా రిఫ్లక్స్తో ఒక ఫ్లాస్క్లో ఉంచబడింది, 20 ml 70% ఇథనాల్తో పోస్తారు మరియు నీటి స్నానంలో 20 నిమిషాలు ఉడకబెట్టాలి. సారం చల్లబడి, గ్లాస్ షాట్ ఫిల్టర్ ద్వారా ఫిల్టర్ చేయబడింది మరియు రోటరీ ఆవిరిపోరేటర్‌లో పొడిగా ఆవిరైపోయింది. అవశేషాలు ఇథైల్ ఆల్కహాల్‌లో 10 mg/ml తుది సాంద్రతకు కరిగించబడ్డాయి. రుటిన్‌ను ప్రమాణంగా ఉపయోగించి మొత్తం ఫ్లేవనాయిడ్ కంటెంట్‌ని నిర్ణయించడం జరిగింది. ఈ అధ్యయనం యొక్క ఫలితాలు పట్టికలో చూపబడ్డాయి. 3.
ఫ్లేవనాయిడ్స్ యొక్క గుణాత్మక కూర్పు యొక్క నిర్ధారణను TLC ద్వారా మెర్క్ నుండి Kieselgel 60(254) ప్లేట్లు, n-బ్యూటానాల్ - ఎసిటిక్ యాసిడ్ - వాటర్ (6:1:2) యొక్క ద్రావణి వ్యవస్థలో నిర్వహించబడింది. డిటెక్టర్ - UV (254 nm) కింద సల్ఫ్యూరిక్ యాసిడ్ - ఆకుపచ్చ నేపథ్యంలో లిలక్ ఫ్లేవనాయిడ్ల మచ్చలు.
పట్టిక 1
వివిధ రకాల గడ్డి యొక్క ముడి పదార్థాలలో (గడ్డి) ఫ్లేవనాయిడ్ల మొత్తం కంటెంట్ (% లో, ఖచ్చితంగా పొడి బరువు ఆధారంగా)
అన్నం. 1. చైనా జాతికి చెందిన వ్యక్తిగత జాతుల ఫ్లేవనాయిడ్ కూర్పు యొక్క TLC. సి - ఫ్లేవనాయిడ్ సాక్షుల మొత్తం: ఒనిన్ - Rf 0.28; సాధారణ - ఆర్.0.48; లుటియోలిన్ గ్లూకోసైడ్ - Rf 0.58; ఫార్మోనోనెటిన్ - Rf 0.64; క్వెర్సెటిన్ - Rf0,79: లుటియోలిన్ - Rf 0.82; బయోచానిన్ A - Rf 0.85; అపిజెనిన్ - Rf 0,92.
అన్నం. 2. పెరుగుతున్న సీజన్ యొక్క వివిధ దశలలో MEADOW గడ్డి ఫ్లేవనాయిడ్ల TLC. IIa - పుష్పించే దశ; IIb - ఫలాలు కాస్తాయి దశ: IIc - పుష్పించే ముందు వృక్ష దశ. సి - ఫ్లేవనాయిడ్ సాక్షుల మొత్తం: ఒనిన్ - Rf f 0.28; సాధారణ - Rf 0.48; లుటియోలిన్ గ్లూకోసైడ్ - Rf
0.58; ఫార్మోనోనెటిన్ - Rf
0.64; క్వెర్సెటిన్ - Rf
0.79; లుటియోలిన్ - ఆర్ (
0.82; బయోచానిన్ A - Rf
0.85; అపిజెనిన్ - Rf
0,92.
పెరుగుతున్న సీజన్ యొక్క వివిధ దశలలో II యొక్క ఫ్లేవనాయిడ్ కూర్పును అధ్యయనం చేసినప్పుడు, రుటిన్ మరియు క్వెర్సెటిన్‌లతో పాటు, ఒనోనిన్ మరియు ఫార్మోనోటిన్ సారంలో గుర్తించదగిన మొత్తంలో ఉన్నాయని గుర్తించబడింది. మిగిలిన ఫ్లేవనాయిడ్లు ట్రేస్ మొత్తాలలో కనిపిస్తాయి.
అందువల్ల, వివిధ రకాలైన గడ్డంలలో, పెరుగుతున్న కాలంలోని వివిధ దశలలో, అవి గ్లైకోసైడ్లు మరియు అగ్లైకోన్లు రెండింటినీ కలిగి ఉన్నాయని చూపబడింది - ఒనోనిన్, రూటిన్, లుటియోలిన్ గ్లూకోసైడ్ మరియు వాటి అగ్లైకోన్లు: ఫార్మోనోటిన్, క్వెర్సెటిన్ మరియు లుటియోలిన్ మరియు వాటి కూర్పుపై ఆధారపడి ఉంటుంది. మొక్క రకం, మరియు ఒక మొక్కలో (గడ్డి మైదానం గడ్డం) పెరుగుతున్న సీజన్ దశపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
పట్టిక 2
జాతికి చెందిన వ్యక్తిగత ప్రతినిధులలో ప్రధాన ఫ్లేవనాయిడ్ల పరిమాణాత్మక కంటెంట్ (ఇన్ %, పూర్తిగా పొడి బరువు పరంగా)
II లో, ఒనోనిన్ మరియు ఫార్మోనోనెటిన్ రెండూ ఏపుగా ఉండే కాలంలో కనుగొనబడ్డాయి. పుష్పించే మరియు ఫలాలు కాస్తాయి కాలంలో, ఒనోనిన్ పరిమాణం గణనీయంగా తగ్గుతుంది మరియు ఫార్మోనోనెటిన్ మొత్తం పెరుగుతుంది.
అధ్యయనం చేసిన నమూనాలలోని ప్రధాన ఫ్లేవనాయిడ్ల యొక్క పరిమాణాత్మక కంటెంట్ అదే పరిస్థితులలో పరిమాణాత్మక TLC ఉపయోగించి నిర్ణయించబడుతుంది. ఈ అధ్యయనం యొక్క ఫలితాలు పట్టికలో చూపబడ్డాయి. 2.
పట్టికలోని డేటా నుండి క్రింది విధంగా. 2, వివిధ రకాలైన గడ్డం బ్లాఫ్లావనాయిడ్స్ యొక్క గొప్ప మూలం, ఈ మొక్కలు జీవసంబంధ కార్యకలాపాల రకాల్లో ఒకదానిని ప్రదర్శిస్తాయి.
ముగింపు:
ఆధునిక కెమిస్ట్రీ యొక్క ముఖ్యమైన పనులలో ఒకటి సేంద్రీయ పదార్ధాల యొక్క విశ్వసనీయ మరియు ఖచ్చితమైన విశ్లేషణ, తరచుగా నిర్మాణం మరియు లక్షణాలలో సమానంగా ఉంటుంది. ఇది లేకుండా, పర్యావరణ విశ్లేషణ, ఫోరెన్సిక్ పరీక్ష, అలాగే రసాయన, చమురు, గ్యాస్, ఆహారం, వైద్య పరిశ్రమలు మరియు జాతీయ ఆర్థిక వ్యవస్థ యొక్క అనేక ఇతర రంగాల యొక్క రసాయన, జీవరసాయన మరియు వైద్య పరిశోధనలను నిర్వహించడం అసాధ్యం; ఇది. సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క పద్ధతులు మరియు సాంకేతికతలలో కొద్ది భాగం మాత్రమే ఇక్కడ ప్రదర్శించబడింది. కానీ మీరు ఈ చిన్న విషయం నుండి చూడగలిగినట్లుగా, సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ సౌలభ్యం మరియు సరళతతో కలిపి ముఖ్యమైన మరియు తీవ్రమైన సామర్థ్యాలను కలిగి ఉంటుంది.
అయినప్పటికీ, TLC యొక్క గ్యాస్ వెర్షన్ కూడా అమలు చేయబడింది. ఫైన్-గ్రెయిన్డ్ Al 2 O 3, మొదలైనవి గాజు, రేకు లేదా ప్లేట్‌లతో కప్పబడి ఉంటాయి; పొరను భద్రపరచడం, ఉపయోగించడం లేదా ఇతరాలు. పరిశ్రమ ఇప్పటికే జోడించిన పొరతో రెడీమేడ్ రికార్డులను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. ఎలుయెంట్లు సాధారణంగా org యొక్క మిశ్రమాలు. పరిష్కారాలు, నీటి పరిష్కారాలు, కాంప్లెక్సింగ్ ఏజెంట్లు మొదలైనవి. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ఎంపికపై ఆధారపడి ఉంటుంది
పదార్థం యొక్క విభజనలో వ్యవస్థలు (మొబైల్ మరియు స్థిర దశల కూర్పు). ప్రక్రియలు పాత్ర పోషిస్తాయి.
ఆచరణలో, అనేక తరచుగా ఏకకాలంలో అమలు చేయబడతాయి. విభజన విధానాలు.
ప్లేట్ యొక్క స్థానం మరియు ఎలుయెంట్ ప్రవాహం యొక్క దిశపై ఆధారపడి, ఆరోహణ, అవరోహణ మరియు క్షితిజ సమాంతర TLC వేరు చేయబడతాయి. ఆపరేటింగ్ టెక్నిక్ ప్రకారం, ఫ్రంటల్ విశ్లేషణ వేరు చేయబడుతుంది (విశ్లేషణ చేయబడిన మిశ్రమం మొబైల్ దశగా పనిచేసినప్పుడు) మరియు సాధారణంగా ఉపయోగించే ఎలుషన్ వెర్షన్. “వృత్తాకార” TLC (విశ్లేషణ చేయబడిన ద్రావణం మరియు ద్రావణాన్ని ప్లేట్ మధ్యలో వరుసగా అందించినప్పుడు) మరియు “వ్యతిరేక వృత్తాకార” TLC (విశ్లేషణ చేయబడిన ద్రావణాన్ని ఒక వృత్తంలో వర్తింపజేసినప్పుడు మరియు ఎలియుంట్ అంచు నుండి మధ్యలోకి వెళ్లినప్పుడు ప్లేట్), TLC కింద (పటిష్టంగా ఒత్తిడితో కప్పబడిన పొర గుండా వెళుతున్నప్పుడు -సాల్వెంట్ కింద), అలాగే TLC ఉష్ణోగ్రత, కూర్పు మొదలైన వాటి యొక్క ప్రవణత యొక్క పరిస్థితులలో. రెండు డైమెన్షనల్ TLC క్రోమాటోగ్రాఫిక్. ప్రక్రియ రెండు పరస్పరం లంబంగా వేర్వేరు దిశల్లో వరుసగా నిర్వహించబడుతుంది. ఎలుయెంట్స్, ఇది విభజన సామర్థ్యాన్ని పెంచుతుంది. అదే ప్రయోజనం కోసం, ఒక దిశలో బహుళ elutions ఉపయోగించబడతాయి.ఎల్యూషన్ వెర్షన్‌లో, విశ్లేషించబడిన ద్రావణం యొక్క చుక్కలు (1-5 µl వాల్యూమ్‌లో) పొరకు వర్తించబడతాయి మరియు ప్లేట్ యొక్క అంచు ఎలుయెంట్‌లో మునిగిపోతుంది, ఇది హెర్మెటిక్‌గా మూసివున్న గాజు చాంబర్ దిగువన ఉంది. కేశనాళిక మరియు గురుత్వాకర్షణ శక్తుల చర్యలో ఎలుయెంట్ పొర వెంట కదులుతుంది; విశ్లేషించబడిన మిశ్రమం అదే దిశలో కదులుతుంది. పునరావృత పునరావృతం ఫలితంగా మరియు గుణకం ప్రకారం. ఎంచుకున్న వాటిలో పంపిణీలు వేరు చేయబడతాయి మరియు ప్రత్యేక జోన్లలో ప్లేట్లో అమర్చబడతాయి.
ప్రక్రియ పూర్తయిన తర్వాత, ప్లేట్ చాంబర్ నుండి తీసివేయబడుతుంది, ఎండబెట్టి మరియు వేరు చేయబడిన మండలాలు వారి స్వంత ప్రకారం గుర్తించబడతాయి. పెయింటింగ్ లేదా రంగు లేదా ఫ్లోరోసెంట్ మచ్చలు ఏర్పడే పరిష్కారాలతో వాటిని చల్లడం తర్వాత
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్థానం
క్రోమాటోగ్రామ్‌లోని జోన్లు R f విలువతో వర్ణించబడతాయి - ప్రారంభ రేఖ నుండి i-వ భాగం యొక్క జోన్ మధ్యలో ప్రయాణించే మార్గం l నేను ఎలుయెంట్ ద్వారా ప్రయాణించే మార్గం l వరకు ప్రయాణించే నిష్పత్తి: R f = l i /l ;
R f 1. R f విలువ గుణకంపై ఆధారపడి ఉంటుంది. పంపిణీ () మరియు మొబైల్ మరియు స్థిర దశల వాల్యూమ్‌ల నిష్పత్తిపై.
TLCలో విభజన అనేక కారకాలచే ప్రభావితమవుతుంది - ఎలుయెంట్ యొక్క కూర్పు మరియు లక్షణాలు, పొర యొక్క స్వభావం, ఉష్ణోగ్రత, పరిమాణం మరియు మందం మరియు ఛాంబర్ యొక్క కొలతలు. అందువల్ల, పునరుత్పాదక ఫలితాలను పొందేందుకు, ప్రయోగాత్మక పరిస్థితులను జాగ్రత్తగా ప్రామాణీకరించడం అవసరం. ఈ అవసరానికి అనుగుణంగా మీరు R fని బంధువుతో సెట్ చేయడానికి అనుమతిస్తుంది. ప్రామాణిక విచలనం 0.03. ప్రామాణిక పరిస్థితులలో, ఇచ్చిన వస్తువుకు R f స్థిరంగా ఉంటుంది మరియు రెండో దానికి ఉపయోగించబడుతుంది.
క్రోమాటోగ్రాఫిక్‌లో భాగం యొక్క పరిమాణం
జోన్ యొక్క ప్రాంతం (సాధారణంగా దాని వ్యాసం 3 నుండి 10 మిమీ వరకు ఉంటుంది) లేదా దాని రంగు యొక్క తీవ్రత () ద్వారా నేరుగా పొరపై జోన్ నిర్ణయించబడుతుంది.వారు ఆటోమేటిక్‌ని కూడా ఉపయోగిస్తారు. కాంతి యొక్క శోషణ, ప్రసారం లేదా ప్రతిబింబం లేదా క్రోమాటోగ్రఫీని కొలిచే స్కానింగ్ సాధనాలు. మండలాలు వేరు చేయబడిన జోన్‌లను పొరతో పాటు ప్లేట్ నుండి స్క్రాప్ చేయవచ్చు, కాంపోనెంట్‌ను ద్రావణంలోకి సంగ్రహించవచ్చు మరియు సరైన పద్ధతిని ఉపయోగించి ద్రావణాన్ని విశ్లేషించవచ్చు (ప్రకాశం, పరమాణు శోషణ, అటామిక్ ఫ్లోరోసెన్స్, రేడియోమెట్రిక్ విశ్లేషణ మొదలైనవి). పరిమాణంలో లోపం సాధారణంగా 5-10%; జోన్లలోని పదార్ధాల గుర్తింపు పరిమితులు -10 -3 -10 -2 μg (రంగు ఉత్పన్నాలను ఉపయోగించి) మరియు 10 -10 -10 -9 μg (ఉపయోగించి).
అత్యంత సున్నితమైన పద్ధతుల్లో ఒకటి క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ, దీనిని మొదట 20వ శతాబ్దం ప్రారంభంలో రష్యన్ శాస్త్రవేత్త M.S. మరియు శతాబ్దం చివరి నాటికి, ఇది శక్తివంతమైన సాధనంగా మారింది, ఇది లేకుండా ఇతర రంగాలలో పనిచేసే సింథటిక్స్ మరియు రసాయన శాస్త్రవేత్తలు ఇద్దరూ ఇకపై చేయలేరు.
అంజీర్లో చూపిన కాలమ్‌లో రంగు విభజన జరిగింది. 1. పదార్ధాల మిశ్రమం A, B మరియు C - సహజ వర్ణద్రవ్యాలు ప్రారంభంలో జోన్లో ఉన్నాయి ఇ,- తగిన ద్రావకం D (ఎలుయెంట్)ని ప్రత్యేక జోన్‌లుగా జోడించడం ద్వారా విభజించబడింది.
ఎప్పటిలాగే, ఇవన్నీ ప్రారంభమయ్యాయి, ఏదైనా పాఠశాల పిల్లవాడు చేయగల సరళమైన విషయంతో ఇది కనిపిస్తుంది. మునుపటి సంవత్సరాల్లో, ఈ వ్యాసం రచయితతో సహా పాఠశాల పిల్లలు సిరాలో రాశారు. మరియు ఒక బ్లాటింగ్ ప్యాడ్ సిరా మరకపై పడితే, సిరా ద్రావణం దానిపై అనేక "ఫ్రంట్స్" గా విభజించబడిందని గమనించవచ్చు. క్రోమాటోగ్రఫీ అనేది రెండు మధ్య అనేక పదార్ధాలలో ఒకదాని పంపిణీపై ఆధారపడి ఉంటుంది, వారు చెప్పినట్లుగా, దశలు (ఉదాహరణకు, ఘన మరియు వాయువు మధ్య, రెండు ద్రవాల మధ్య మొదలైనవి), మరియు దశలలో ఒకటి నిరంతరం కదులుతుంది, అనగా, అది మొబైల్.
దీనర్థం అటువంటి దశ, ఉదాహరణకు ఒక వాయువు లేదా ద్రవం, సమతౌల్యాన్ని భంగపరుస్తూ నిరంతరం ముందుకు సాగుతుంది. అంతేకాకుండా, ఒక నిర్దిష్ట పదార్ధం ఎంత మెరుగ్గా శోషించబడుతుంది (శోషించబడుతుంది) లేదా నిశ్చల దశలో కరిగిపోతుంది, దాని కదలిక వేగం తక్కువగా ఉంటుంది మరియు దీనికి విరుద్ధంగా, తక్కువ సమ్మేళనం శోషించబడుతుంది, అనగా, ఇది స్థిర దశతో తక్కువ అనుబంధాన్ని కలిగి ఉంటుంది, ఎక్కువ కదలిక వేగం. ఫలితంగా, అంజీర్లో చూపిన విధంగా. 2, మొదట మనం సమ్మేళనాల మిశ్రమాన్ని కలిగి ఉంటే, క్రమంగా అవన్నీ, మొబైల్ దశ ద్వారా నెట్టివేయబడి, వేర్వేరు వేగంతో "ముగింపు" వైపు కదులుతాయి మరియు చివరికి విడిపోతాయి.
అన్నం. 2. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన యొక్క ప్రాథమిక సూత్రం: NF అనేది మొబైల్ ఫేజ్ (MP) ప్రవహించే కేశనాళిక ట్యూబ్ T యొక్క అంతర్గత ఉపరితలాన్ని కప్పి ఉంచే స్థిర దశ యొక్క పొర. వేరు చేయవలసిన మిశ్రమం యొక్క భాగం A 1 మొబైల్ దశకు అధిక అనుబంధాన్ని కలిగి ఉంటుంది మరియు స్థిరమైన దశకు భాగం A 2. A "1 మరియు A" 2 – బాణం సూచించిన దిశలో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన జరిగిన కొంత కాలం తర్వాత అదే భాగాల జోన్ల స్థానాలు
ఆచరణలో, పదార్ధాల మిశ్రమం యొక్క నమూనా పరిచయం చేయబడింది, ఉదాహరణకు, ఒక సిరంజితో స్థిరమైన దశ యొక్క పొరలోకి, ఆపై మిశ్రమంలో చేర్చబడిన వివిధ సమ్మేళనాలు, మొబైల్ దశ (ఎలుయెంట్)తో పాటు, పొర వెంట కదులుతాయి. , ఈ దశ ద్వారా నడపబడుతుంది. కదలిక వేగం స్థిర మరియు మొబైల్ దశలలోని భాగాల పరస్పర చర్య (అనుబంధం) పరిమాణంపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు ఫలితంగా, భాగాల విభజన సాధించబడుతుంది.
విభజన తర్వాత, అన్ని భాగాలను గుర్తించి, లెక్కించాలి. ఇది క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క సాధారణ పథకం.
ఈ ఆధునిక పద్ధతి ~10-8% అతితక్కువ, "ట్రేస్" పరిమాణాలలో కూడా పదుల మరియు వందల కొద్దీ విభిన్న సమ్మేళనాల కంటెంట్‌ను మిశ్రమంలో గుర్తించడం కొన్ని నిమిషాల్లోనే సాధ్యమవుతుందని గమనించాలి.
విశ్లేషణ యొక్క క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పద్ధతిని నిశితంగా పరిశీలిద్దాం. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థలను క్రింది సూత్రాల ప్రకారం విభజించవచ్చు:
- మొబైల్ మరియు స్థిర దశల సముదాయ స్థితి;
- వ్యవస్థ యొక్క రేఖాగణిత లక్షణాలు;
- వేరు చేయబడిన పదార్ధం మరియు దశల మధ్య పరస్పర చర్య యొక్క విధానం.
గ్యాస్ లేదా లిక్విడ్ మొబైల్ ఫేజ్‌గా ఉపయోగించబడుతుంది. ఘనపదార్థాలు లేదా ద్రవాలు స్థిరమైన లేదా స్థిరమైన దశలుగా ఉపయోగించబడతాయి.
దశల అమరిక ఆధారంగా, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థలు రెండు సమూహాలుగా విభజించబడ్డాయి: ప్లానర్ మరియు కాలమ్.
తరువాతి, క్రమంగా, విభజించబడింది:
- ప్యాక్ చేయబడి, గ్రాన్యులర్ సాలిడ్ మెటీరియల్ (చిన్న బంతులు)తో నింపబడి, విభజన మాధ్యమంగా లేదా స్థిరమైన ద్రవ దశ యొక్క క్యారియర్‌గా పనిచేస్తుంది;
- కేశనాళిక, దీని లోపలి గోడలు నిశ్చల ద్రవం లేదా ఘన యాడ్సోర్బెంట్ (శోషక) పొరతో కప్పబడి ఉంటాయి.
వేరు చేయబడిన పదార్ధం మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థ యొక్క దశల మధ్య పరస్పర చర్య దశ యొక్క ఉపరితలంపై లేదా పెద్ద మొత్తంలో సంభవించవచ్చు. మొదటి సందర్భంలో, క్రోమాటోగ్రఫీ అంటారు అధిశోషణం, రెండవదానిలో - పంపిణీ.
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వ్యవస్థలలో పరమాణు విభజన యొక్క యంత్రాంగాలు చాలా తరచుగా క్రింది వాటికి వస్తాయి:
- స్థిరమైన దశ వేరు చేయబడిన పదార్థాలను భౌతికంగా గ్రహిస్తుంది (సోర్బ్స్);
- స్థిరమైన దశ రసాయనికంగా వేరు చేయబడిన పదార్థాలతో సంకర్షణ చెందుతుంది;
- స్థిరమైన దశ ద్రావణం నుండి వేరు చేయవలసిన పదార్ధాలను కలపని ద్రావకంలో కరిగిస్తుంది;
- నిశ్చల దశ పోరస్ నిర్మాణాన్ని కలిగి ఉంటుంది, ఇది ఈ దశలో వేరు చేయబడిన పదార్థాల అణువుల వ్యాప్తిని అడ్డుకుంటుంది.
క్రోమాటోగ్రఫీ, ఒక ద్రావకంలో ముంచిన కాగితపు స్ట్రిప్ వంటి ఇంటిలో తయారు చేసిన పరికరాలతో ప్రారంభించబడింది, ఇప్పుడు ఆధునిక ఖచ్చితత్వం లేదా ఖచ్చితత్వం, సూత్రాల ఆధారంగా అత్యంత సంక్లిష్టమైన వాయిద్య వ్యవస్థలు మరియు కంప్యూటర్ సాఫ్ట్‌వేర్‌తో అమర్చబడి ఉంటాయి. అత్యుత్తమ కంప్యూటర్ కంపెనీలలో ఒకటైన హ్యూలెట్-ప్యాకర్డ్ కూడా ఆధునిక క్రోమాటోగ్రాఫ్‌లను ఉత్పత్తి చేస్తుందని చెప్పడం సరిపోతుంది.
క్రోమాటోగ్రఫీ ప్రక్రియ యొక్క ఫ్లోచార్ట్ తప్పనిసరిగా చాలా సులభం మరియు అంజీర్లో చూపబడింది. 3. తరువాత, ఈ క్రమంలో సుమారుగా, క్రోమాటోగ్రాఫ్ యొక్క ఆపరేషన్ సూత్రం పరిగణించబడుతుంది.
క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రధాన రకాలు
క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రధాన రకాలు అధిశోషణం, అయాన్ మార్పిడి, ద్రవ, కాగితం, సన్నని పొర, జెల్ వడపోత మరియు అనుబంధ క్రోమాటోగ్రఫీ.
అధిశోషణం క్రోమాటోగ్రఫీ. ఈ సందర్భంలో, స్థిరమైన దశలో పదార్థాల ఎంపిక (సెలెక్టివ్) శోషణ కారణంగా పదార్థాల విభజన జరుగుతుంది. ఘన యాడ్సోర్బెంట్ (స్థిర దశ) కోసం ఒక నిర్దిష్ట సమ్మేళనం యొక్క అనుబంధం కారణంగా ఇటువంటి ఎంపిక శోషణ జరుగుతుంది మరియు ఇది వాటి అణువుల ధ్రువ పరస్పర చర్యల ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది. అందువల్ల, ఈ రకమైన క్రోమాటోగ్రఫీ తరచుగా సమ్మేళనాల విశ్లేషణలో ఉపయోగించబడుతుంది, దీని లక్షణాలు ధ్రువ సమూహాల సంఖ్య మరియు రకం ద్వారా నిర్ణయించబడతాయి. అధిశోషణ క్రోమాటోగ్రఫీలో అయాన్ మార్పిడి, ద్రవ, కాగితం, పలుచని పొర మరియు వాయువు శోషణ క్రోమాటోగ్రఫీ ఉన్నాయి. "ఎలుయెంట్ అనాలిసిస్" విభాగంలో గ్యాస్ అధిశోషణం క్రోమాటోగ్రఫీ మరింత వివరంగా వివరించబడింది.
అయాన్ మార్పిడి క్రోమాటోగ్రఫీ.అయాన్ మార్పిడి రెసిన్లు నిలువు వరుసలలో మరియు ప్లేట్ లేదా కాగితంపై పలుచని పొర రూపంలో స్థిర దశ (Fig. 4) వలె ఉపయోగించబడతాయి. విభజనలు సాధారణంగా సజల మాధ్యమంలో నిర్వహించబడతాయి, కాబట్టి ఈ పద్ధతి ప్రధానంగా అకర్బన రసాయన శాస్త్రంలో ఉపయోగించబడుతుంది, అయినప్పటికీ మిశ్రమ ద్రావకాలు కూడా ఉపయోగించబడతాయి. ఈ సందర్భంలో వేరు చేయడానికి చోదక శక్తి అనేది స్థిరమైన దశలో వ్యతిరేక ధ్రువణత యొక్క అయాన్ మార్పిడి కేంద్రాలకు వేరు చేయబడిన ద్రావణ అయాన్ల యొక్క విభిన్న అనుబంధం.
లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ. ఈ సందర్భంలో, స్థిరమైన దశ ద్రవంగా ఉంటుంది. అత్యంత సాధారణ సందర్భం ద్రవ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క అధిశోషణం వెర్షన్. సహజ వర్ణద్రవ్యాల విభజన యొక్క ఉదాహరణ అంజీర్లో చూపబడింది. 5.
అన్నం. 5. సహజ వర్ణద్రవ్యాల క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన (ఫ్లేవోన్లు మరియు ఐసోఫ్లేవోన్లు)
పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీ. స్ట్రిప్స్ లేదా కాగితపు షీట్లను నిశ్చల దశగా ఉపయోగిస్తారు (Fig. 6). శోషణ మెకానిజం ద్వారా వేరుచేయడం జరుగుతుంది మరియు కొన్నిసార్లు ఇది రెండు లంబ దిశలలో నిర్వహించబడుతుంది.
థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ అనేది ఏదైనా వ్యవస్థ, దీనిలో స్థిరమైన దశ పలుచని పొరగా ఉంటుంది, ప్రత్యేకంగా అల్యూమినియం ఆక్సైడ్ (2 మి.మీ. మందం) పొరను పేస్ట్ రూపంలో, గాజు పలకకు వర్తించబడుతుంది. అటువంటి వ్యవస్థ యొక్క ఉదాహరణ మరియు విభజన ఫలితాలు అంజీర్లో చూపబడ్డాయి. 7.
జెల్ ఫిల్ట్రేషన్, లేదా మాలిక్యులర్ జల్లెడ, క్రోమాటోగ్రఫీ. అటువంటి వ్యవస్థలలో విభజన సూత్రం మునుపటి సందర్భాలలో కంటే కొంత భిన్నంగా ఉంటుంది. స్థిరమైన దశ పదార్థాలు, సాధారణంగా జెల్లు, ఖచ్చితంగా నియంత్రిత సచ్ఛిద్రతతో ఉంటాయి, దీని ఫలితంగా మిశ్రమం యొక్క కొన్ని భాగాలు, అణువుల పరిమాణం మరియు ఆకారానికి అనుగుణంగా, జెల్ కణాల మధ్య చొచ్చుకుపోగలవు, మరికొన్ని కాదు. ఈ రకమైన క్రోమాటోగ్రఫీ చాలా తరచుగా అధిక పరమాణు బరువు సమ్మేళనాలను వేరు చేయడానికి ఉపయోగిస్తారు. ఈ పద్ధతిని ఉపయోగించడం కోసం ఎంపికలలో ఒకటి వేరు చేయబడిన పదార్ధాల పరమాణు ద్రవ్యరాశిని గుర్తించడం, ఇది తరచుగా రసాయన అధ్యయనాలకు అవసరం (Fig. 8).
అనుబంధ క్రోమాటోగ్రఫీ. ఈ రకమైన క్రోమాటోగ్రఫీ ఒక పదార్ధం మధ్య పరస్పర చర్యపై ఆధారపడి ఉంటుంది, ఒక వైపు, వివిక్త సమ్మేళనంతో ప్రతిస్పందించగల సామర్థ్యం మరియు మరొక వైపు, స్థిరమైన దశ యొక్క ఘన క్యారియర్‌తో సంబంధం కలిగి ఉంటుంది. అటువంటి పదార్ధం వివిక్త సమ్మేళనంతో అనుబంధాన్ని కలిగి ఉంటుంది మరియు దీనిని అనుబంధ లిగాండ్ అంటారు.
ఈ పద్ధతి చాలా తరచుగా జీవరసాయన విశ్లేషణలో ఉపయోగించబడుతుంది. ఉదాహరణకు, సైనోజెన్ బ్రోమైడ్‌తో సక్రియం చేయబడిన సెల్యులోజ్ ద్వారా ప్రొటీన్‌లను కలిగి ఉన్న జీవసంబంధమైన యాంటిజెన్‌లు పంపబడినప్పుడు, పథకం 1లో చూపిన విధంగా వాటి నిర్దిష్ట నిలుపుదల జరుగుతుంది.
మరొక పద్ధతిలో, సెల్యులోజ్ యొక్క హైడ్రాక్సిల్ సమూహానికి ప్రోటీన్లను జోడించడానికి, రెండోది మొదట 2-అమినో-4,6-డైక్లోరో-తో చికిత్స చేయబడుతుంది. సిమ్-ట్రియాజైన్, ఆపై వారి పరస్పర చర్య యొక్క ఉత్పత్తి పథకం 2 ప్రకారం ప్రోటీన్ యొక్క అమైనో సమూహంతో ప్రతిస్పందిస్తుంది:
వాస్తవానికి, క్రోమాటోగ్రఫీ పద్ధతుల సంఖ్య పైన పేర్కొన్న వాటికి మాత్రమే పరిమితం కాదు. క్రోమాటోగ్రఫీ తరచుగా మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ వంటి ఇతర భౌతిక రసాయన పద్ధతులతో కలిపి ఉంటుంది, అయితే ఈ వ్యాసం పాఠకులకు క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క సాధారణ సూత్రాలను మాత్రమే పరిచయం చేయడం లక్ష్యంగా పెట్టుకుంది. కాబట్టి, తదుపరి మేము క్రోమాటోగ్రఫీ ఫలితాలను ప్రాసెస్ చేయడాన్ని పరిశీలిస్తాము.
క్రోమాటోగ్రామ్‌లను అభివృద్ధి చేసే పద్ధతులు
మానిఫెస్టేషన్ అనేది మొబైల్ దశ ద్వారా వేరు చేయబడిన పదార్థాల బదిలీ ప్రక్రియ. అభివృద్ధి మూడు ప్రధాన మార్గాల్లో నిర్వహించబడుతుంది: ఫ్రంటల్ విశ్లేషణ, స్థానభ్రంశం మరియు ఎలుషన్. అత్యంత విస్తృతంగా ఉపయోగించేది ఎలుషన్.
ఫ్రంటల్ విశ్లేషణ. ఇది సరళమైన సందర్భం, ఎందుకంటే ఇక్కడ నమూనా మొబైల్ దశగా పనిచేస్తుంది. ఇది సిస్టమ్‌కు నిరంతరం జోడించబడుతుంది, కాబట్టి పెద్ద నమూనా వాల్యూమ్‌లు అవసరం. ఫలితాలు అంజీర్లో చూపబడ్డాయి. 9.
నిశ్చల దశకు వేర్వేరు భాగాల యొక్క విభిన్న అనుబంధాల కారణంగా అనేక మండలాలు ఏర్పడతాయి. లీడింగ్ ఎడ్జ్‌ను ఫ్రంట్ అని పిలుస్తారు, అందుకే పేరు. మొదటి జోన్లో అతి తక్కువ నిలుపుకున్న పదార్ధం A మాత్రమే ఉంటుంది, ఇది వేగంగా కదులుతుంది. రెండవ జోన్లో A మరియు B పదార్థాలు ఉన్నాయి. మూడవ జోన్ A, B మరియు C పదార్ధాల మిశ్రమం. ఫ్రంటల్ విశ్లేషణలో, A భాగం మాత్రమే ద్రవ రూపంలో పొందబడుతుంది.
స్థానభ్రంశం విశ్లేషణ. ఈ సందర్భంలో, మొబైల్ దశ వేరు చేయబడిన పదార్ధం కంటే స్థిరమైన దశకు ఎక్కువ అనుబంధాన్ని కలిగి ఉంటుంది. ఒక చిన్న నమూనా నిశ్చల దశలోకి ఇంజెక్ట్ చేయబడుతుంది. కానీ దాని అధిక అనుబంధం కారణంగా, మొబైల్ దశ అన్ని భాగాలను స్థానభ్రంశం చేస్తుంది మరియు నెట్టివేస్తుంది. ఇది చాలా బలంగా సోర్బ్డ్ కాంపోనెంట్ Bని స్థానభ్రంశం చేస్తుంది, ఇది పదార్ధం Bని స్థానభ్రంశం చేస్తుంది, ఇది తక్కువ సోర్బ్డ్ కాంపోనెంట్ Aని స్థానభ్రంశం చేస్తుంది. ఫ్రంటల్ విశ్లేషణ వలె కాకుండా, ఈ పద్ధతిని ఉపయోగించి వ్యక్తిగత (ద్రవ) రూపంలో అన్ని ప్రధాన భాగాలను పొందడం సాధ్యమవుతుంది.
ఎలుయెంట్ విశ్లేషణ. ద్రావణాన్ని తరలించడానికి మొబైల్ దశ క్రోమాటోగ్రఫీ వ్యవస్థ ద్వారా పంపబడుతుంది. నిశ్చల దశ కోసం మిశ్రమం యొక్క భాగాల యొక్క విభిన్న అనుబంధాల కారణంగా విభజన జరుగుతుంది మరియు అందువల్ల, వారి కదలిక యొక్క వివిధ రేట్లు కారణంగా. నమూనా యొక్క చిన్న పరిమాణం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ సిస్టమ్‌లో ప్రవేశపెట్టబడింది. తత్ఫలితంగా, భాగాలతో కూడిన మండలాలు క్రమంగా స్వచ్ఛమైన ఎలియుంట్ ద్వారా వేరు చేయబడిన ప్రత్యేక ప్రాంతాలను ఏర్పరుస్తాయి. దాని అధిక విభజన సామర్థ్యం కారణంగా, పద్ధతి అత్యంత విస్తృతంగా ఉపయోగించబడింది మరియు ఎక్కువగా ఇతర విభజన ఎంపికలను భర్తీ చేసింది. అందువలన, తదుపరి మేము ఈ పద్ధతి యొక్క సిద్ధాంతం మరియు హార్డ్వేర్ రూపకల్పనను పరిశీలిస్తాము.
ఒక చిన్న సిద్ధాంతం. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియలను సంగ్రహణ ప్రక్రియల శ్రేణిగా భావించడం చాలా సౌకర్యవంతంగా ఉంటుంది మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియల సమయంలో వందల లేదా వేల సంఖ్యలో వెలికితీత చక్రాలు వేగంగా మరియు ఏకకాలంలో జరుగుతాయి కాబట్టి చాలా సారూప్య లక్షణాలతో కూడిన పదార్థాలు వేరు చేయబడతాయి.
స్వేదనం యొక్క సైద్ధాంతిక భావన ఆధారంగా క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియల సామర్థ్యాన్ని అంచనా వేయడానికి (స్వేదన స్తంభాలలో నూనెను వేరు చేయడంతో సారూప్యత ద్వారా, ఇక్కడ సిద్ధాంతపరమైన ప్లేట్ ఆవిరి మరియు ద్రవం సమతుల్యతలో ఉన్న స్వేదనం కాలమ్ యొక్క భాగానికి అనుగుణంగా ఉంటుంది), భావన "సైద్ధాంతిక పలకకు సమానమైన ఎత్తు"(VETT). క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ కాబట్టి ఊహాత్మక పొరల (ప్లేట్లు) సమితిగా పరిగణించబడుతుంది. HETT ద్వారా మనం సాధారణంగా మునుపటి పొర నుండి వచ్చే మిశ్రమం ఈ పొర యొక్క మొబైల్ దశలో ఉన్న పదార్ధం యొక్క సగటు సాంద్రతతో సమతౌల్యంలోకి రావడానికి అవసరమైన పొర మందాన్ని సూచిస్తాము. ఇది క్రింది సూత్రం ద్వారా వర్ణించవచ్చు:
BETT = ఎల్/ఎన్,
ఎక్కడ ఎల్- కాలమ్ పొడవు, ఎన్- సైద్ధాంతిక పలకల సంఖ్య.
HETT అనేది పదార్థాల విభజన యొక్క సారాంశ లక్షణం. అయితే, మిశ్రమం యొక్క భాగాలను వేరు చేయడం ముఖ్యం, కానీ సరిపోదు. ప్రతి భాగాన్ని గుర్తించడం మరియు నమూనాలో దాని పరిమాణాన్ని నిర్ణయించడం అవసరం. ఇది సాధారణంగా క్రోమాటోగ్రామ్‌లను ప్రాసెస్ చేయడం ద్వారా జరుగుతుంది - సిగ్నల్ తీవ్రత యొక్క ఆధారపడటం, పదార్థం యొక్క ఏకాగ్రతకు అనులోమానుపాతంలో, విభజన సమయంపై. క్రోమాటోగ్రామ్‌ల యొక్క కొన్ని ఉదాహరణలు అంజీర్లో చూపబడ్డాయి. 10, 11.
నిలువు వరుసలో నమూనా ప్రవేశపెట్టబడిన క్షణం నుండి గరిష్ట గరిష్ట స్థాయిని నమోదు చేసే వరకు సమయం అంటారు నిలుపుదల సమయం (tR) సరైన పరిస్థితులలో, ఇది ప్రవేశపెట్టిన నమూనా మొత్తంపై ఆధారపడి ఉండదు మరియు కాలమ్ యొక్క రేఖాగణిత పారామితులను పరిగణనలోకి తీసుకుంటే, ఒక నిర్దిష్ట సమ్మేళనం యొక్క నిర్మాణం ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది, అనగా, ఇది భాగాల యొక్క గుణాత్మక లక్షణం. ఒక భాగం యొక్క పరిమాణాత్మక కంటెంట్ శిఖరం యొక్క పరిమాణం లేదా దాని ప్రాంతం ద్వారా వర్గీకరించబడుతుంది. లెక్కించు శిఖరం ప్రాంతంసాధారణంగా నిలుపుదల సమయం మరియు పీక్ ఏరియా రెండింటినీ రికార్డ్ చేసే ఇంటిగ్రేటర్ సాధనాన్ని ఉపయోగించి స్వయంచాలకంగా ప్రదర్శించబడుతుంది. ఆధునిక పరికరాలు మిశ్రమం యొక్క అన్ని భాగాల యొక్క కంటెంట్‌ను వేరు చేయడాన్ని సూచించే కంప్యూటర్ ప్రింటౌట్‌ను వెంటనే స్వీకరించడానికి మిమ్మల్ని అనుమతిస్తుంది.
క్రోమాటోగ్రాఫ్ యొక్క పని. సరళమైన గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రాఫ్ కోసం ఇన్‌స్టాలేషన్ రేఖాచిత్రం అంజీర్లో చూపబడింది. 12. ఇది మొబైల్ జడ దశ (క్యారియర్ గ్యాస్) కలిగిన గ్యాస్ సిలిండర్‌ను కలిగి ఉంటుంది, చాలా తరచుగా హీలియం, నైట్రోజన్, ఆర్గాన్ మొదలైనవి. గ్యాస్ పీడనాన్ని అవసరమైన స్థాయికి తగ్గించే రీడ్యూసర్‌ని ఉపయోగించి, క్యారియర్ గ్యాస్ కాలమ్లోకి ప్రవేశిస్తుంది, ఇది సోర్బెంట్ లేదా ఇతర క్రోమాటోగ్రాఫిక్ మెటీరియల్‌తో నిండిన గొట్టం స్థిరమైన దశగా పనిచేస్తుంది.
అన్నం. 12. గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రాఫ్ యొక్క ఆపరేషన్ పథకం:
1 - క్యారియర్ వాయువుతో అధిక పీడన సిలిండర్; 2 - ఫ్లో స్టెబిలైజర్; 3 మరియు 3 "– ప్రెజర్ గేజ్‌లు; 4 – క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్; 5 – నమూనా ఇంజెక్షన్ పరికరం; 6 – థర్మోస్టాట్; 7 – డిటెక్టర్; 8 – రికార్డర్; 9 – ఫ్లో మీటర్
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ అనేది క్రోమాటోగ్రాఫ్ యొక్క “గుండె”, ఎందుకంటే అందులోనే మిశ్రమాల విభజన జరుగుతుంది. స్పీకర్లు చాలా తరచుగా గాజుతో తయారు చేయబడతాయి; ఉక్కు, టెఫ్లాన్ మరియు కేశనాళిక నిలువు వరుసలు ఉన్నాయి. ఒక నమూనాను పరిచయం చేయడానికి ఒక పరికరం కాలమ్లోకి గ్యాస్ ఇన్లెట్ దగ్గర ఇన్స్టాల్ చేయబడింది. చాలా తరచుగా, నమూనా ఒక సిరంజిని ఉపయోగించి నిర్వహించబడుతుంది, రబ్బరు పొరను కుట్టడం. విశ్లేషించబడిన మిశ్రమం నిలువు వరుసలో వేరు చేయబడుతుంది మరియు డిటెక్టర్‌లోకి ప్రవేశిస్తుంది - విభజన ఫలితాలను రికార్డింగ్ కోసం అనుకూలమైన రూపంలోకి మార్చే పరికరం.
ఎక్కువగా ఉపయోగించే డిటెక్టర్లలో ఒకటి కాథరోమీటర్, దీని యొక్క ఆపరేటింగ్ సూత్రం వివిధ శరీరాల ఉష్ణ సామర్థ్యాన్ని కొలవడంపై ఆధారపడి ఉంటుంది.
అంజీర్లో. మూర్తి 13 క్యాథరోమీటర్ యొక్క రేఖాచిత్రాన్ని చూపుతుంది. ఒక మెటల్ స్పైరల్ (రెసిస్టెన్స్ థ్రెడ్) ఒక స్థూపాకార కుహరంలో ఉంచబడుతుంది, దాని ద్వారా ప్రత్యక్ష విద్యుత్ ప్రవాహం ఫలితంగా వేడెక్కుతుంది. క్యారియర్ వాయువు దాని గుండా స్థిరమైన వేగంతో ప్రవహించినప్పుడు, మురి యొక్క ఉష్ణోగ్రత స్థిరంగా ఉంటుంది. అయినప్పటికీ, ఎలుటింగ్ పదార్ధం కనిపించినప్పుడు వాయువు యొక్క కూర్పు మారినట్లయితే, అప్పుడు పరికరం ద్వారా నమోదు చేయబడిన మురి మార్పుల ఉష్ణోగ్రత.
మరొక సాధారణ డిటెక్టర్ జ్వాల అయనీకరణ డిటెక్టర్, దీని రేఖాచిత్రం అంజీర్లో చూపబడింది. 14. ఇది క్యాథరోమీటర్ కంటే చాలా సున్నితంగా ఉంటుంది, అయితే క్యారియర్ గ్యాస్ మాత్రమే కాకుండా హైడ్రోజన్ కూడా సరఫరా చేయాల్సి ఉంటుంది. ఎలుయెంట్ ఉన్న కాలమ్ నుండి నిష్క్రమించే క్యారియర్ గ్యాస్ హైడ్రోజన్‌తో మిళితం చేయబడుతుంది మరియు డిటెక్టర్ యొక్క బర్నర్ నాజిల్‌లోకి వెళుతుంది. జ్వాల ఎలెంట్ అణువులను అయనీకరణం చేస్తుంది, దీని ఫలితంగా ఎలక్ట్రోడ్ల మధ్య విద్యుత్ నిరోధకత తగ్గుతుంది మరియు కరెంట్ పెరుగుతుంది.
లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్ డిటెక్టర్‌లను (కనిపించే, UV మరియు IR ప్రాంతాలలో), అలాగే ద్రావణాల వక్రీభవన సూచికలను కొలవడం ఆధారంగా వక్రీభవన డిటెక్టర్‌లను ఉపయోగిస్తుంది.
ఇవి సాధారణ పరంగా, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ యొక్క ప్రాథమిక అంశాలు. వాస్తవానికి, వ్యాసం క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క సాధారణ సూత్రాలను మాత్రమే అందిస్తుంది మరియు తరచుగా అవి సూచించబడతాయి. నిజానికి, ఈ పద్ధతి యొక్క "వంటగది" చాలా పెద్దది మరియు సంక్లిష్టమైనది. ఈ వ్యాసం యొక్క ప్రధాన లక్ష్యం, రచయిత ప్రకారం, ఈ శక్తివంతమైన పద్ధతికి యువ పాఠకుల దృష్టిని ఆకర్షించడం.
ఈ ప్రాంతం గురించి మరింత సుపరిచితం కావాలనుకునే వారు దిగువ సాహిత్యాన్ని చూడవచ్చు.
సాహిత్యం
జుఖోవిట్స్కీ A.A., టర్కెల్టాబ్ N.M. గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ. M.: Gostoptekhizdat, 1962, 240 pp.;
సకోడిన్స్కీ K.I., కిసెలెవ్ A.V., ఐగాన్సెన్ A.V.మరియు ఇతరులు గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క భౌతిక-రసాయన అప్లికేషన్. M.: కెమిస్ట్రీ, 1973,
254 pp.;
లిక్విడ్ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ. 3 సంపుటాలలో. Z. డీలా, K. మసీకా, J. జనక. M.: మీర్, 1972;
బెరెజ్కిన్ V.G., అలిషోవ్ V.R., నెమిరోవ్స్కాయా I.B..
పాలిమర్ కెమిస్ట్రీలో గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ. M.: నౌకా, 1972, 287 pp.;మొరోజోవ్ A.A.
అకర్బన విశ్లేషణలో క్రోమాటోగ్రఫీ. M.: ఎక్కువ. పాఠశాల, 1972, 233 పేజీలు;బెరెజ్కిన్ V.G., బోచ్కోవ్ A.S.
. పరిమాణాత్మక సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ. M.: నౌకా, 1980, 183 pp.;
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ మరియు సంబంధిత టెక్నిక్స్ యొక్క ప్రయోగశాల మాన్యువల్. 2 సంపుటాలలో. O. మికేష్ M.: మీర్, 1982, vol. 1–2, 783 pp.;
పర్యావరణ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ. Ed. R. గ్రోబా M.: మీర్, 1979, 606 pp.;కిర్చ్నర్ యు
. సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ. 2 సంపుటాలలో M.: మీర్, 1981, వాల్యూం 2, 523 pp.;
సంగ్రహణ క్రోమాటోగ్రఫీ. Ed. T. బ్రౌన్, G. Guersini. M.: మీర్, 1978, 627 p.
వి.వి.సఫోనోవ్,
మాస్కో ప్రొఫెసర్
రాష్ట్ర వస్త్ర
అకాడమీ పేరు పెట్టారు A.N కోసిగినా
-> సైట్‌కు పదార్థాలను జోడించండి -> విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రం -> Zolotov Yu.A. -> "ఫండమెంటల్స్ ఆఫ్ ఎనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ వాల్యూమ్ 2" ->
ఫండమెంటల్స్ ఆఫ్ ఎనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ వాల్యూమ్ 2 - జోలోటోవ్ యు.ఎ.Zolotov Yu.A., డోరోఖోవా B.N., ఫదీవా V.I. ఫండమెంటల్స్ ఆఫ్ ఎనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ వాల్యూమ్ 2 - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1996. - 461 p.
ISBN 5-06-002716-3డౌన్‌లోడ్ చేయండి : (డైరెక్ట్ లింక్)
osnovianalhimt21996.djvu మునుపటి 1 .. 164 > .. >> తదుపరి
స్టెపనోవ్ A.B., కోర్చెమ్నాయ E.K. అకర్బన విశ్లేషణలో ఎలక్ట్రోమిగ్రేషన్ పద్ధతి. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1979.
హ్వాంగ్ S, Kammermeier K. మెంబ్రేన్ వేరు ప్రక్రియలు. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1981.
అధ్యాయం 8
447
Aivaeov B.V. గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రాథమిక అంశాలు. - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1977. Belyavskaya T.A., బోల్షోవా T.A., బ్రైకినా G.D. అకర్బన పదార్థాల క్రోమాటోగ్రఫీ. - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1986.
బెరెజ్కిన్ V.G., బోచ్కోవ్ A.S. పరిమాణాత్మక సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ.
- M.: సైన్స్, 1980.
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పద్ధతుల ద్వారా పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ / ఎడ్. E. కాట్జ్.
- M.: మీర్, 1990.
పెర్రీ S, అమోస్ R, బ్రూవర్ P. ఎ ప్రాక్టికల్ గైడ్ టు లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ. - M.: మీర్, 1974.
స్టైస్కిన్ E.L., ఇట్సిక్సన్ L.B., బ్రాడ్ E.V. ప్రాక్టికల్ హై పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1986.
షాట్జ్ V.D., సఖర్తోవా O.V. అధిక పనితీరు లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ. - రిగా: జినాట్నే, 1988.
Shpigun O.A., Zolotov Yu.A. అయాన్ క్రోమాటోగ్రఫీ మరియు నీటి విశ్లేషణలో దాని అప్లికేషన్. - M.: మాస్కో స్టేట్ యూనివర్శిటీ పబ్లిషింగ్ హౌస్, 1990.
ఎంగెల్‌హార్డ్ T.H. అధిక పీడనం వద్ద ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ. - M.: మీర్, 1980.
అధ్యాయం 9
Dyatlova N.M., Temkina V.Ya., Popov K.I. కాంప్లెక్సోన్లు మరియు మెటల్ కాంప్లెక్సోనేట్లు. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1988.
సూచికలు/Ed. పి. బిషప్. T. i మరియు 2., - M.: మీర్, 1976.
నాన్-సజల పరిష్కారాల విశ్లేషణ కోసం టైట్రిమెట్రిక్ పద్ధతులు/Ed. వి.డి. బెజుగ్లీ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1986.
అష్వర్త్ M.R.F. సేంద్రీయ సమ్మేళనాల విశ్లేషణ కోసం టైట్రిమెట్రిక్ పద్ధతులు. డైరెక్ట్ టైట్రేషన్ పద్ధతులు. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1968.
అధ్యాయం 10
బాండ్ A.M. విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రంలో పోలరోగ్రాఫిక్ పద్ధతులు. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1983.
కొరిటా I. అయాన్లు, ఎలక్ట్రోడ్లు, పొరలు. - ఎం.: మీర్, 1983.
మేరనోవ్స్కీ S.G., స్ట్రాడిన్ Ya.P., బెజుగ్లీ V.P. ఆర్గానిక్ కెమిస్ట్రీలో పోలరోగ్రఫీ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1975.
నికోల్స్కీ B.P., మాటెరోవా E.A. అయాన్ ఎంపిక ఎలక్ట్రోడ్లు. - ఎల్.: కెమిస్ట్రీ, 1980.
ప్లాంబెక్ J. విశ్లేషణ యొక్క ఎలెక్ట్రోకెమికల్ పద్ధతులు. ప్రాథమిక సిద్ధాంతం మరియు అప్లికేషన్. - M.: మీర్, 1985.
అయాన్ సెలెక్టివ్ ఎలక్ట్రోడ్ల అనువర్తనానికి సూచన గైడ్. - M.: మీర్, 1986. 448
అధ్యాయం 11
బెన్వెల్ K. మాలిక్యులర్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ యొక్క ఫండమెంటల్స్. - M.: మీర్, 1985. బ్రిట్స్కే M.E. అటామిక్ శోషణ స్పెక్ట్రోకెమికల్ విశ్లేషణ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1982.
విల్కోవ్ L.V., పెంటిన్ యు.ఎ. రసాయన శాస్త్రంలో భౌతిక పరిశోధన పద్ధతులు. ప్రతిధ్వని మరియు ఎలక్ట్రో-ఆప్టికల్ పద్ధతులు. - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1989.
విల్కోవ్ L.V., పెంటిన్ యు.ఎ. రసాయన శాస్త్రంలో భౌతిక పరిశోధన పద్ధతులు. నిర్మాణ పద్ధతులు మరియు ఆప్టికల్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ. - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1987.
Demtroeder V. లేజర్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ. - M.: సైన్స్, 1985.
జైడెల్ A.N. అటామిక్ ఫ్లోరోసెన్స్ విశ్లేషణ. పద్ధతి యొక్క భౌతిక ఆధారం.
బెరెజ్కిన్ V.G., బోచ్కోవ్ A.S. పరిమాణాత్మక సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ.
అయోనిన్ B.I., ఎర్షోవ్ B.A., కోల్ట్సోవ్ A.I. ఆర్గానిక్ కెమిస్ట్రీలో NMR స్పెక్ట్రోస్కోపీ. - ఎల్.: కెమిస్ట్రీ, 1983.
కుజ్నెత్సోవా L.A., కుజ్మెంకో N.E., కుజ్యాకోవ్ యు.యా., ప్లాస్టినిన్ యు.ఎ. డయాటోమిక్ అణువుల యొక్క ఆప్టికల్ పరివర్తనాల సంభావ్యత. - M.: సైన్స్, 1980.
కుజ్యాకోవ్ యు.యా., సెమెనెంకో K.A., జోరోవ్ N.B. స్పెక్ట్రల్ విశ్లేషణ యొక్క పద్ధతులు.
- M.: మాస్కో స్టేట్ యూనివర్శిటీ పబ్లిషింగ్ హౌస్, 1990.
పెష్కోవా V.M., గ్రోమోవా M.I. విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రంలో శోషణ స్పెక్ట్రోస్కోపీ పద్ధతులు. - M.: హయ్యర్ స్కూల్, 1976.
ధర V. విశ్లేషణాత్మక పరమాణు శోషణ స్పెక్ట్రోస్కోపీ. - ఎం.: మీర్, 1976.
అల్ట్రాసెన్సిటివ్ లేజర్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ/Ed. D. క్లిగర్.
- M.: మీర్, 1986.
టెరెక్ టి., మికా జె., గెగుష్ ఇ. ఎమిషన్ స్పెక్ట్రల్ అనాలిసిస్. T. 1 మరియు 2.
- M.: మీర్, 1982.
థాంప్సన్ M., వాల్ష్ D.N. ఎ గైడ్ టు ఇండక్టివ్లీ కపుల్డ్ ప్లాస్మా స్పెక్ట్రోమెట్రీ అనాలిసిస్. - ఎం.: నేద్రా, 1988.
చుడినోవ్ E.G. ఇండక్షన్ ప్లాస్మాతో అటామిక్ ఎమిషన్ అనాలిసిస్ - ఎం.: వినితి. 1990.
అధ్యాయం 12
పోల్యకోవా A.A. కర్బన సమ్మేళనాల మాలిక్యులర్ మాస్ స్పెక్ట్రల్ విశ్లేషణ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1983.
ట్రేస్ ఎలిమెంట్లను నిర్ణయించడానికి స్పెక్ట్రోస్కోపిక్ పద్ధతులు / ఎడ్. J. వైన్‌ఫోర్డ్నర్. - M.: మీర్, 1979.
సిసోవ్ A.A., చుపాఖిన్ M.S. మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీకి పరిచయం. - M.: Atom-izdat, 1977.
449
అధ్యాయం 13
కుజ్నెత్సోవ్ R.A. యాక్టివేషన్ విశ్లేషణ. - M.: Atomizdat, 1974. రేడియో ఎనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ యొక్క కొత్త పద్ధతులు / Ed. జి.ఎన్. బిలిమోవిచ్ మరియు M. కిర్షా. - ఎం.: ఎనర్జీ, 1982.
అధ్యాయం 14
పావ్లోవా S.A., జురావ్లెవా I.V., టోల్చిన్స్కీ యు.ఐ. సేంద్రీయ మరియు స్థూల కణ సమ్మేళనాల ఉష్ణ విశ్లేషణ. - M.: కెమిస్ట్రీ, 1983.
టోపోర్ N.D., ఒగోరోడోవా L.P., మెల్చకోవా L.V. ఖనిజాలు మరియు అకర్బన సమ్మేళనాల ఉష్ణ విశ్లేషణ. - M.: మాస్కో స్టేట్ యూనివర్శిటీ పబ్లిషింగ్ హౌస్, 1987.
Wendlandt U. విశ్లేషణ యొక్క ఉష్ణ పద్ధతులు. - M.: మీర్, 1978.
షెస్టాక్ యా థర్మల్ విశ్లేషణ సిద్ధాంతం. ఘన అకర్బన పదార్థాల భౌతిక రసాయన లక్షణాలు. - M.: మీర్, 1987.
అధ్యాయం 15
బార్కర్ ఎఫ్. కంప్యూటర్స్ ఇన్ ఎనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ. - M.: మీర్, 1987.
రసాయన శాస్త్రంలో జాన్సన్ K.D. - M.: మీర్, 1983.
జ్యూర్ P., ఐనౌర్ T. రసాయన శాస్త్రంలో నమూనా గుర్తింపు: - M.: మీర్, 1977.
విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రంలో గణిత పద్ధతులు మరియు కంప్యూటర్లు/Ed. L.A గ్రిబోవా. - M.: సైన్స్, 1989.
శాస్త్రవేత్తల కోసం G. పర్సనల్ కంప్యూటర్‌లను నేర్పండి. - M.: మీర్, 1990.
ఫోర్సిత్ D., మాల్కం M., మౌలర్ K. గణిత గణనల యంత్ర పద్ధతులు. - M.: మీర్, 1980.