Colibakterier er altid til stede i fordøjelseskanalen hos dyr og mennesker, såvel som i deres affaldsprodukter. De kan også findes på planter, jord og vand, hvor forurening er et alvorligt problem på grund af muligheden for sygdomsoverførsel forårsaget af forskellige patogener.
Skader på kroppen
Er colibakterier skadelige? De fleste forårsager ikke sygdom, men nogle sjældne stammer af E. coli kan forårsage alvorlig sygdom. Ud over mennesker kan får og kvæg blive smittet. Det er bekymrende, at forurenet vand i dets ydre egenskaber ikke adskiller sig fra almindeligt drikkevand i smag, lugt og udseende. Coliforme bakterier findes selv i miljøer, der anses for at være upåklagelige i enhver forstand. Test er den eneste pålidelige måde at finde ud af om tilstedeværelsen af patogene bakterier.
Hvad sker der, når det opdages?
Hvad skal man gøre, hvis der findes coliforme eller andre bakterier i drikkevand? I dette tilfælde vil reparationer eller ændringer af vandforsyningssystemet være nødvendige. Ved indtagelse kræver desinfektion obligatorisk kogning, samt gentagne tests, som kan bekræfte, at forureningen ikke er blevet elimineret, hvis det var termotolerante colibakterier.
Indikator organismer
Almindelige coliformer kaldes ofte indikatororganismer, fordi de indikerer den potentielle tilstedeværelse af sygdomsfremkaldende bakterier i vand, såsom E. coli. Selvom de fleste stammer er harmløse og lever i tarmene hos raske mennesker og dyr, kan nogle producere toksiner, forårsage alvorlig sygdom og endda være dødelig. Hvis sygdomsfremkaldende bakterier er til stede i kroppen, er de mest almindelige symptomer mave-tarmbesvær, feber, mavesmerter og diarré. Symptomer er mere udtalte hos børn eller ældre familiemedlemmer.
Sikkert vand
Hvis der ikke er almindelige colibakterier i vandet, så kan man med næsten fuldstændig sikkerhed antage, at det er mikrobiologisk sikkert at drikke.
Hvis de blev opdaget, ville yderligere test være berettiget.
Bakterier elsker varme og fugt
Temperatur og vejrforhold spiller også en vigtig rolle. For eksempel foretrækker E. coli at leve på jordens overflade og kan lide varme, så colibakterier i drikkevand opstår som følge af bevægelse i underjordiske vandløb under varme og fugtige vejrforhold, mens den mindste mængde bakterier vil blive fundet i vinterhalvåret.
Chokklorering
For effektivt at dræbe bakterier bruges klor, som oxiderer alle urenheder. Dens mængde vil blive påvirket af vandkarakteristika såsom pH-niveau og temperatur. I gennemsnit er vægten pr. liter cirka 0,3-0,5 milligram. Det tager cirka 30 minutter at dræbe almindelige colibakterier i drikkevand. Kontakttiden kan reduceres ved at øge klordosis, men dette kan kræve yderligere filtre for at fjerne specifik smag og lugt.
Skadeligt ultraviolet lys
Ultraviolette stråler betragtes som en populær desinfektionsmulighed. Denne metode involverer ikke brug af kemiske forbindelser. Dette middel bruges dog ikke, hvor det samlede antal coliforme bakterier overstiger tusinde kolonier pr. 100 ml vand. Selve enheden består af en UV-lampe omgivet af en hylster af kvartsglas, hvorigennem en væske strømmer, bestrålet med ultraviolet lys. Det ubehandlede vand inde i apparatet skal være fuldstændig rent og fri for enhver synlig forurening, blokeringer eller uklarhed for at tillade eksponering for alle skadelige organismer.
Andre rengøringsmuligheder
Der er mange andre behandlinger, der bruges til at desinficere vand. De anbefales dog ikke til langtidsbrug af forskellige årsager.
- Kogende. Ved 100 grader Celsius i et minut dræbes bakterier effektivt. Denne metode bruges ofte til at desinficere vand i nødstilfælde eller når det er nødvendigt. Dette er en tidskrævende og energikrævende proces og bruges typisk kun i små mængder vand. Dette er ikke en langsigtet eller permanent mulighed for vanddesinfektion.
- Ozonering. I de senere år er denne metode blevet brugt som en måde at forbedre vandkvaliteten og eliminere forskellige problemer, herunder bakteriel forurening. Ligesom klor er ozon et stærkt oxidationsmiddel, der dræber bakterier. Men samtidig er denne gas ustabil og kan kun fås ved hjælp af elektricitet. Ozoneringsenheder anbefales generelt ikke til desinfektion, fordi de er meget dyrere end klorering eller ultraviolette systemer.
- Iodisering. Den engang så populære desinfektionsmetode er for nylig kun blevet anbefalet til kortvarig eller nødvandsdesinfektion.
Termotolerante coliforme bakterier
Dette er en speciel gruppe af levende organismer, der er i stand til at fermentere laktose ved 44-45 grader Celsius. Disse omfatter slægten Escherichia og nogle arter af Klebsiella, Enterobacter og Citrobacter. Hvis der er fremmede organismer i vandet, tyder det på, at det ikke er renset tilstrækkeligt, er blevet genforurenet eller indeholder for mange næringsstoffer. Hvis de opdages, er det nødvendigt at kontrollere for tilstedeværelsen af coliforme bakterier, der er resistente over for forhøjede temperaturer.
Mikrobiologisk analyse
Hvis der blev påvist colibakterier, kan det tyde på, at de er kommet i vandet. Således begynder forskellige sygdomme at sprede sig. I forurenet drikkevand kan du finde stammer af salmonella, shigella, E. coli og mange andre patogener, der spænder fra milde fordøjelsessygdomme til alvorlige former for dysenteri, kolera, tyfus og mange andre.
Husstandens smittekilder
Kvaliteten af drikkevand overvåges og kontrolleres regelmæssigt af specialiserede sanitære tjenester. Hvad kan en almindelig person gøre for at beskytte sig selv og beskytte sig selv mod uønsket infektion? Hvad er kilderne til vandforurening under boligforhold?
- Vand fra køleren. Jo flere mennesker rører ved denne enhed, jo større er sandsynligheden for, at skadelige bakterier kommer ind. Undersøgelser viser, at vandet i hver tredje køler simpelthen vrimler med levende organismer.
- Regnvand. Overraskende nok er fugt opsamlet efter regn et gunstigt miljø for udviklingen af coliforme bakterier. Avancerede gartnere bruger ikke sådant vand selv til vanding af planter.
- Søer og reservoirer betragtes også som en risikogruppe, da alle levende organismer, ikke kun bakterier, formerer sig hurtigere i stillestående vand. En undtagelse er havene, hvor udviklingen og spredningen af skadelige former der er minimal.
- Rørlednings tilstand. Hvis afløbsrørene ikke er blevet skiftet eller renset i længere tid, kan det også give problemer.
Bakterier af Escherichia coli-gruppen (coliformer) er en gruppe bakterier fra familien Enterobacteriaceae, betinget kendetegnet ved morfologiske og kulturelle karakteristika, brugt af sanitær mikrobiologi som en markør for fækal forurening, de tilhører gruppen af såkaldte sanitære indikatormikroorganismer .
Bakterier fra E. coli-gruppen omfatter repræsentanter for slægterne Escherichia (herunder E. coli), Citrobacter (en typisk repræsentant for C. coli citrovorum), Enterobacter (en typisk repræsentant for E. aerogenes), som er kombineret i én familie Enterobacteriaceae på grund af de fælles morfologiske og kulturelle egenskaber . De er karakteriseret ved forskellige enzymatiske egenskaber og antigene struktur.
4. Tilstedeværelsen af hvilke bakterier indikerer frisk fækal forurening af vand?
Disse bakterier omfatter termotolerante colibakterier, fækale colibakterier, som fermenterer laktose til syre og gas ved en temperatur på 44°C i 24 timer og ikke vokser på et nitratmedium.
Påvisningen af enterococcus indikerer også frisk fækal forurening.
Der er en kendt metode til bestemmelse af frisk fækal forurening, som består i at isolere enterokokker fra testvandet, og når indekset for disse mikroorganismer er over 500, antages ankomsten af frisk fækal forurening.
5. Hvilke indikatorer bestemmes under sanitær-mikrobiologisk testning af vand?
1. Bestemmelse af antallet af saprofytiske mikroorganismer.
2 . Bestemmelse af antallet af laktosepositive Escherichia coli.
3 . Bestemmelse af antallet af Escherichia coli.
4. Bestemmelse af antallet af enterokokker.
5 . Bestemmelse af antallet af stafylokokker.
6 . Bestemmelse af antallet af PFU af E. coli-fager.
7 . Bestemmelse af bakterier af slægterne Salmonella og Shigella.
8 . Bestemmelse af tilstedeværelsen af tarmvirus.
9 . Definition af Vibrio cholerae.
6. Hvad er et "kimtal", og hvordan bestemmes det?
Mikrobielt antal er en kvantitativ indikator for bakteriel forurening af miljøet, en af laboratoriets sanitære og hygiejniske indikatorer, der angiver det "samlede antal mikrober" i 1 ml vand, 1 g fast produkt eller jord, 1 m 3 luft, dyrket ved MPA ved 37 ° C på 48 timer
For at bestemme det mikrobielle antal udføres podninger i overensstemmelse med reglerne for asepsis i petriskåle med MPA ved hjælp af hældemetoden, så der vokser fra 30 til 300 kolonier på skålene.
7. Hvilken metode bruges til at påvise colibakterier i vand?
Der er to metoder til at bestemme antallet af coliforme bakterier: fermentering og membranfiltre.
Essensen af membranfiltermetoden er at koncentrere bakterier fra en vis mængde testvand på et membranfilter og dyrke dem ved en temperatur på 37 ± 0,5 °C i Endo-medium. Denne temperatur skaber optimale betingelser for vækst af bakterier.
8. Til hvilke formål anvendes Koch- og Krotov-metoderne?
Koch- og Krotov-metoderne bruges til sanitær og mikrobiologisk undersøgelse af luft.
9. Nævn de sanitære indikatorer mikroorganismer, ved hvis tilstedeværelse i luften man kan vurdere dens renhed?
Sanitære indikatormikroorganismer for luft er Staphylococcus aureus og hæmolytiske streptokokker (Staphylococcus aureus, gruppe Streptococcus viridans og Streptococcus haemolyticus).
10. Hvad er aspirationsmetoden og til hvilket formål bruges den?
Aspirationsmetoden er baseret på tvungen bundfældning af mikroorganismer på overfladen af et tæt næringsmedium eller i en opfangende væske. Til dette formål anvendes Krotov-apparatet, Rechmensky-bakteriefælden, POV-1-anordningen osv.
For at bestemme det samlede antal bakterier udtages to prøver på hver 100 liter. Afgrøderne inkuberes i en termostat i 24 timer og efterlades derefter i 48 timer ved stuetemperatur. Antallet af kolonier på pladerne tælles, det aritmetiske gennemsnit beregnes og omregnes til antallet af mikroorganismer i 1 m 3 luft.
Lufttest omfatter bestemmelse af det samlede antal saprofytiske bakterier, stafylokokker, streptokokker, som er indikatorer for biologisk kontaminering af luften af mikrofloraen i den menneskelige nasopharynx.
11. På hvilke medier dyrkes coliforme?
På Endo medium, på simple næringsmedier: kød-pepton bouillon (MPB), kød-pepton agar (MPA).
12. Hvilke genstande og genstande er genstand for undersøgelse i apotekernes lokaler under sanitær og mikrobiologisk kontrol?
Objekter for bakteriologisk forskning i apoteker under sanitær og mikrobiologisk kontrol:
1 . Destilleret vand.
2 . Injektionsopløsninger før sterilisering.
3 . Injektionsopløsninger efter sterilisering.
4 . Øjendråber efter sterilisering.
5 . Øjendråber fremstillet under aseptiske forhold på sterile baser.
6 . Tørre medicinske stoffer, der anvendes til fremstilling af injektionsopløsninger.
7. Farmaceutiske glasvarer, propper, pakninger, andre hjælpematerialer.
8. Inventar, udstyr, hænder og hygiejnebeklædning til personale.
9 . Luftmiljø.
De vigtigste sanitære indikatormikroorganismer er bakterier fra coliforme gruppen (coliforme), som forener 3 slægter af mikroorganismer - Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, medlemmer af Enterobacteriaceae-familien. De deler mange fælles morfologiske, kulturelle og enzymatiske egenskaber.
I overensstemmelse med GOST 2874-82 og GOST 18963-73 inkluderer coliformer små, bevægelige, gram-negative, ikke-sporedannende stænger, der ikke har oxidaseaktivitet, laktose gæring og glucose med dannelse af syre og gas ved en temperatur på 37 ° C (inden for 5-24 timer) (Figur 45).
Escherichia coli (coliforme bakterier) er fakultative anaerobe, der vokser godt i universelle næringsmedier og er resistente over for mange anilinfarvestoffer. De er karakteriseret ved bred adaptiv variabilitet, som et resultat af hvilke forskellige varianter opstår, hvilket komplicerer deres klassificering.
Af alle bakterier i coli-gruppen har mikroorganismer af slægten Escherichia den største sanitære og vejledende betydning.
Baseret på deres evne til at nedbryde laktose ved en temperatur på 37°C opdeles colibakterier i laktose-negative og laktosepositive Escherichia coli (LKP), eller coliforme, som er standardiseret efter internationale standarder. Fra LCP-grupperne isoleres fækale colibakterier (FEC), som er i stand til at fermentere laktose ved en temperatur på 44,5 °C. Disse omfatter E. coli, som ikke vokser på citratmedium.
Til at differentiere coliforme bakterier anvendes Endo-medium, hvorpå E. coli producerer karakteristisk vækst i form af røde kolonier med metallisk skær.
Endo medium er et selektivt medium for enterobakterier og fås i tør form. Den indeholder MPA, lactose, basisk fuchsin, natriumsulfat og fosfat.
Fremstilling af mediet: opløs 5 g tørt medium i 100 cm 3 destilleret vand, kog under konstant omrøring
Ris. 45. Escherichia coli: -en- kolonier; b– celler
2-3 minutter og hæld i petriskåle. For at forhindre dannelse af store mængder kondensat afkøles mediet efter kogning til 50 °C. Det forberedte medium er lyserødt. Kolonier af laktosepositive stammer er røde (den resulterende mælkesyre reagerer med natriumsulfat, hvilket får fuchsin til at genoprette sin farve), mens laktose-negative er farveløse eller svagt lyserøde.
Når colibakterier vokser på flydende næringsmedier (LMM), observeres betydelig turbiditet af mediet og dannelsen af et gråligt, let knækket sediment. Der dannes normalt ikke en hinde på overfladen af bouillonen.
På MPA danner colibakterier mellemstore, runde, glatte, skinnende, gennemskinnelige kolonier.
E. coli gør ikke gelatine flydende og er i stand til at fermentere en række kulhydrater - laktose, glucose, maltose, saccharose med dannelse af syre og gas. Enzymatiske egenskaber (fermentering af kulhydrater) er variable, derfor tages de ikke uafhængigt i betragtning ved differentiering af coliformer, men i kombination med andre tests.
I mælk formerer colibakterier sig godt, bringer dens surhedsgrad til 60-80 °T og danner en ujævn svampet koagel i den. Ved tilstedeværelse af mælkesyrebakterier, under påvirkning af de antibiotiske stoffer og syre, de udskiller, hæmmes væksten af E. coli. Under pasteuriseringsregimer, der er vedtaget i mejeriindustrien, dræbes E. coli. Konventionelle desinfektionsmidler i almindeligt accepterede fortyndinger desinficerer udstyr fra disse bakterier.
Den sanitære vejledende betydning af individuelle slægter af bakterier fra gruppen af coliforme bakterier varierer. Påvisningen af bakterier af slægten Escherichia i fødevarer, vand, jord og udstyr indikerer frisk fækal forurening af disse genstande, hvilket er af stor sanitær og epidemiologisk betydning.
Det menes nogle gange, at bakterier af slægterne Citrobacter og Enterobacter modificeres Escherichia efter at have været i det ydre miljø. Som følge heraf er Citrobacter og Enterobacter indikatorer for ældre (adskillige uger) fækal forurening og har derfor mindre hygiejnisk værdi sammenlignet med bakterier af slægten Escherichia.
Differentiering af coliforme bakterier udføres under hensyntagen til forskelle i mikroorganismers fysiologiske egenskaber. På dette grundlag er der udviklet specielle tests, der bruges til at genkende fækal og ikke-fækal Escherichia coli, hvoraf den vigtigste er TIMATS (TLIMAC) sæt af tegn:
T - temperaturtest;
I - indoldannelsestest;
M - reaktion med methylenrød;
A - reaktion på acetylmethylcarbinol (Voges-Proskauer reaktion);
C - citrattest;
L - laktosefermentering.
Temperatur test(Eijkman-test) - evnen til at fermentere glucose og andre kulhydrater (lactose, mannitol) med dannelse af gas ved en temperatur på 44-46 ° C (normalt 44,5 ° C). For Escherichia er temperaturtesten positiv. Repræsentanter for slægterne Citrobacter og Enterobacter har ikke denne evne. Denne test er bestemt på specielle medier Eikman, Kessler, Boulizh.
Eijkmans medium (glucose-pepton-medium): pepton - 10 g; natriumchlorid - 5 g, glucose - 5 g; postevand 1.000 cm3. I et koncentreret medium øges sammensætningen af alle ingredienser undtagen vand 10 gange. Mediet hældes i reagensglas eller kolber med fermenteringsrør (gasrør), steriliseres med strømmende damp i 30 minutter i 3 dage (sterilisering i autoklave ved 112°C-15 minutter er tilladt).
Indoldannelsestest- evnen til at nedbryde aminosyren tryptofan, som er en del af mange proteiner, og frigive en række produkter, herunder indol, som gør det mellemrøde, når det interagerer med reagenser indeholdende paradimethylamidobenzaldehyd. Indol produceres af Escherichia, bakterier fra slægterne Citrobacter og Enterobacter producerer ikke indol. Tilstedeværelsen af indol bestemmes i gamle bouillonkulturer (fortrinsvis i Hottinger bouillon indeholdende 200-300 mg% tryptofan) ved anvendelse af Ehrlichs reagens.
Ehrlichs reagens: paradimethylamidobenzaldehyd - 4 g; 96° ethylalkohol - 380 cm3; koncentreret saltsyre (saltsyre) - 80 cm 3. Før tilsætning af (0,5-1 cm 3) Ehrlichs reagens til kulturen tilsættes 0,5-1 cm 3 saltsyreether (for at ekstrahere indol).
Undersøgelser af de biokemiske egenskaber af E. coli efter udvikling i mælk med starterkulturer har vist variabilitet i indolegenskaberne 36 % af E. coli-stammer kan miste evnen til at producere indol. Derfor kan brugen af denne egenskab ved overvågning af fermenterede mælkeprodukter føre til forkerte resultater.
Reaktion med methylrødt(Clark-reaktion) er at bestemme intensiteten af syredannelse under fermenteringen af glukose i et næringsmedium. Methylrødt bruges som en indikator, hvoraf nogle få dråber tilsættes til en 3-5-dages kultur dyrket på Clarks medium. Ved pH 5 og derunder skifter indikatoren fra lysegul til rød, hvilket indikerer intens syredannelse. Repræsentanter for slægterne Escherichia og Citrobacter giver en rød farve til mediet, og Enterobacter giver en gul farve.
Ved pH over 5 forbliver mediet lysegult.
Clarks medium: proteose (eller anden pepton) - 5 g; dextrose - 5 g; K2NPO4 - 5 g; destilleret vand op til 800 cm 3. Blandingen opvarmes i 20 minutter under lejlighedsvis omrøring, filtreres, afkøles, og volumenet justeres til 1.000 cm3 med destilleret vand. Hæld i 10 cm3 rør og steriliser ved 121 °C i 15 minutter.
Indikator: methylrød - 0,1 g; ethylalkohol 300 cm 3. Efter opløsning af indikatoren tilsættes 200 cm 3 destilleret vand.
Reaktion på acetylmethylcarbinol(Voges-Proskauer, 1898) afslører mikroorganismers evne til at danne det aromatiske stof acetylmethylcarbinol (acetoin) i et medium med glucose.
For at opsætte reaktionen tilsættes det samme volumen af 40% KOH-opløsning til 5 cm 3 af en 4-5-dages kultur dyrket på peptonmedium med glucose eller Clarks medium. For at fremskynde reaktionen tilsættes 0,3 g kreatin [CMeaga-reagens (Mira)] til 100 cm 3 alkali. I nærvær af acetylmethylcarbinol bliver mediet lyserødt.
Acetylmethylcarbinol (acetoin) produceres af bakterier af slægten Enterobacter. Escherichia og repræsentanter for slægten Citrobacter har ikke denne evne.
Citrat test- mikroorganismers evne til at assimilere. citronsyre eller dens salte som den eneste kulstofkilde. Kulturen under undersøgelse er sået på syntetisk citrat Coser medium eller fast Simmons medium.
Bakterier af slægterne Citrobacter og Enterobacter vokser på citratmedier (forårsager turbiditet og misfarvning i flydende medier og dannelse af specifikke kolonier på faste medier) og kaldes citrat positiv eller citrat-assimilerende bakterier , hvorimod Escherichia ikke vokser på disse medier og kaldes citrat negativ .
Cosers citrat syntetisk medium: MgS04 x 7H20 - 0,2 g; NH4H2PO4 - 1,5 g; K 2 NRO 4 - 1 g; natriumcitrat x 5 H20 - 2,53 g; destilleret vand - 1.000 cm 3 For at bestemme ændringer i mediets reaktion tilsættes 10 cm 3 af en 0,5 % alkoholopløsning af bromthymolblåt.
Simmons-medium: tilsæt 2% agar til Coser-medium, juster pH til 7,2-7,4, og steriliser i en autoklave ved 112 °C i 15 minutter. Indikatoren tilsættes efter sterilisering, før den hældes i sterile rør. Mediet er olivengrøn i farven.
Ved bestemmelse af indholdet af citrat-negativ Escherichia i fermenterede mælkeprodukter kan der opnås oppustede resultater på grund af yderligere hensyntagen til repræsentanter for slægten Enterobacter, der har mistet evnen til at udnytte citrater.
Citrattesten bør ledsages af mikroskopi af prøverne, da Enterococcus faecalis metaboliserer citrater og kan forveksles med citratpositiv Escherichia coli.
Laktosefermentering fælles for de fleste arter af Enterobacteriaceae-familien. Repræsentanter for slægten Escherichia (med undtagelse af lactose-negative varianter) fermenterer lactose og Enterobacter lactose inkonsekvent. Mikroorganismers evne til at fermentere laktose undersøges på specielle laktoseholdige medier med forskellige indikatorer (Endo-medium, Hiss-medium mv.
Ganske ofte kan E. coli have atypiske tegn på TIMAC (TLIMAC) komplekset, hvilket gør deres differentiering vanskelig. Dette forklares med, at E. coli i det ydre miljø udsættes for forskellige faktorer, hvilket resulterer i en ændring i en række af deres biologiske egenskaber. For eksempel, efter at have været i det ydre miljø, mister E. coli evnen til at fermentere laktose, fermentere kulhydrater ved 43 ° C og endda ved 37 ° C, men får evnen til at assimilere (fordøje) citrater.
Ved langvarig brug af antibiotika og andre medicinske lægemidler findes laktose-negative varianter af Escherichia også i den menneskelige tarm.
I komplekset af tegn på TIMAC er de vigtigste temperatur- og citrattest. De er de mest stabile, hvilket gør det muligt at differentiere colibakterier af fækal oprindelse fra colibakterier, der lever i det ydre miljø.
Den største sanitære og vejledende betydning er E. coli, der ikke vokser i Cosers medium med citrater (som den eneste kilde til kulstofnæring) og fermenterer kulhydrater ved 43-45 °C (E. coli). De er indikatorer for frisk fækal forurening.
I mejeriindustrien identificeres colibakterier som sanitære indikatormikroorganismer, podet på Kessler-medium og dyrket ved 37 °C i 24 timer.
Fremstilling af modificeret Kessler-medium: 16 g tørt Kessler-medium anbringes i en kolbe og fyldes op med drikkevand til 1.000 cm 3 . Blandingen koges under omrøring i 25 minutter. Volumenet bringes til 1.000 cm 3 med drikkevand og filtreres gennem vat. Hæld i reagensglas med 5 cm 3 svømmere eller kegler med 40-50 cm 3 svømmere og steriliser ved 12 °C i 10 minutter. Mediet er mørk lilla i farven.
Det er muligt at tilberede Kessler medium af individuelle ingredienser.
For at gøre dette tilsættes 10 g pepton og 50 cm 3 steril galde (kvæg eller anden husdyrgalde) til 1.000 cm 3 drikkevand, kog blandingen under omrøring i 25 minutter og filtrer den gennem vat. 2,5 g lactose opløses i det resulterende filtrat og volumenet justeres til 1.000 cm 3 med drikkevand, pH sættes til 7,4-7,6, hvorefter 2 cm 3 af en krystalviolet opløsning med en massekoncentration på 10 g/ dm 3 tilsættes, hældes i reagensglas med flydere eller kolber med flydere på 40-50 cm 3 og steriliseres ved 121 ° C i 10 minutter. Det forberedte medium skal være mørklilla i farven.
Kriterierne for den sanitære vurdering af fødevarer og andre miljøgenstande for tilstedeværelsen af hygiejniske indikative mikroorganismer er fastsat af GOST'er og sanitære regler og normer, som indikerer, at coliforme bakterier ikke bør påvises i visse mængder af produktet, dvs. antallet af sanitære vejledende mikroorganismer pr. produktenhed er standardiseret. Så for eksempel i pasteuriseret mælk bør E. coli ikke påvises i 1 cm3, i flydende kefirstarter er E. coli-bakterier ikke tilladt i 3 cm3, i creme fraiche og hytteost - i 0,001 cm3 (g), etc.
ENTEROCOCCI
Enterokokkers taksonomi og biologiske egenskaber er præsenteret i kapitel 10.
Enterokokker er sammen med coliforme bakterier permanente indbyggere i tarmene hos mennesker og varmblodede dyr, de frigives i det ydre miljø i store mængder, og deres påvisning i fødevarer, vand og jord indikerer fækal forurening af disse genstande.
Fordelene ved enterokokker som sanitære indikatormikrober ligger i deres større modstandsdygtighed over for fysiske og kemiske påvirkninger, tilstedeværelsen af selektive medier, der gør det muligt at påvise enterokokker i stærkt forurenede genstande, letheden ved at differentiere dem fra lignende arter og nogle forskelle mellem enterokokker af menneskelig og animalsk oprindelse, hvilket har en væsentlig betydning ud fra et epidemiologisk synspunkt.
Det er fastslået, at Ent. faecalis og dens varianter, Ent. faecium. Ent. dominerer i tarmindholdet hos kvæg, svin, får og heste. faecium. Detektion i det ydre miljø Ent. faecalis og dens varianter har en vis sanitær og epidemiologisk betydning som en indikator for kontaminering af en genstand med menneskelig afføring; detektion Ent. faecium er en indikator for forurening fra dyreafføring.
Andre fordele ved enterokokker som sanitære indikatormikroorganismer er, at de ikke formerer sig uden for tarmene hos mennesker og dyr (med undtagelse af fødevarer); i det ydre miljø ikke gennemgår så dybtgående ændringer som E. coli, og varer længere i det ydre miljø sammenlignet med dem.
Der findes selektive næringsmedier, der gør det muligt at isolere enterokokker i renkultur fra genstande, der er stærkt forurenet med fremmed mikroflora. Til bestemmelse af enterokokker anvendes ofte mælkemedium med polymyxin ifølge Kalina (se kapitel 10).
Enterokokker er ekstremt modstandsdygtige over for lave temperaturer, varme, klorering, høje koncentrationer af sukker og salt og høj surhedsgrad. De kan modstå opvarmningstemperaturer på 60-56 °C i 30 minutter (pasteuriseringstilstande skal neutralisere enterokokker), er i stand til at vokse i nærvær af 6,5% NaCl, 40% galde, i medier med en pH på 9,6-10.- I denne henseende til produkter, der ikke er genstand for opbevaring, er indikatoren for sanitær tilstand bakterier i coli-gruppen, og for produkter, der opbevares i lang tid ved lave temperaturer, er det bedre at identificere enterokokker som sanitære indikatormikroorganismer. Dette forklares ved, at E. coli dør hurtigere end enterokokker, og deres tilstedeværelse eller fravær afspejler ikke sådanne produkters sanitære tilstand.
Antallet af enterokokker i fødevarer varierer inden for ret betydelige grænser - fra 10 3 til 10 6 pr. 1 g eller 1 cm 3.
Tilstedeværelsen af et stort antal enterokokker i produkter, der har gennemgået varmebehandling, indikerer dårlig pasteuriseringseffektivitet (overtrædelse af regimer), kontaminering efter pasteurisering eller opbevaring under forhold, der er gunstige for udvikling af enterokokker.
I officielle dokumenter - den internationale standard for undersøgelse af drikkevand, standarden for undersøgelse af drikkevand og spildevand vedtaget i USA og den europæiske standard - accepteres enterokokker som en yderligere indikator for vandets sanitære og hygiejniske kvalitet, og den internationale standard understreger, at når det påvises i Ved testning af vand for atypisk E. coli, er tilstedeværelsen eller fraværet af enterokokker afgørende for bedømmelsen af fækal forurening.
I vores land bruges enterokokker sammen med coliforme bakterier som sanitære indikatormikroorganismer i den sanitære vurdering af vand fra åbne reservoirer, især brønde, hvis vand bruges i den teknologiske proces.
Enterokokker anbefales også til brug som sanitære indikatormikroorganismer ved vurdering af kvaliteten af klorering af drikkevand, ved undersøgelse af vand fra mineralske kilder samt fødevarer med høj koncentration af salt (kødprodukter).
Før sterilisering. Luften vurderes ved, at indholdet af Staphylococcus aureus kommer ind i den fra de øvre luftveje og mundhulen. Det betragtes som en indikator for dråbeluftforurening. Andre mikrober, der afspejler de sanitære problemer ved en bestemt genstand, er gær- og skimmelsvampe, Pseudomonas aeruginosa og salmonella.
Generelle og termotolerante coliforme bakterier (i 3 prøver af 100 ml vand)
Ved bestemmelse af vandkvaliteten er det nødvendigt at beregne mængden af tilstedeværende colibakterier for at afgøre, om vandet opfylder etablerede standarder. For at tælle positive coliforme tests (formodende, bekræftende og fækale) anvendes a (Flere fermenteringsrør) Ved optælling anvendes en metode til statistisk behandling af testresultater udført med seriefortynding af prøven form for det mest sandsynlige antal colibakterier (MPN) For eksempel betyder NP 10, at der er 10 colibakterier pr. 100 ml vand.
I de fleste tilfælde blev undersøgelsen af genoprettelse af antallet af bakterier udført på de samlede og fækale coliforme grupper af bakterier. Samtidig er spørgsmålet om, hvor farlig genoprettelse af antallet af coliforme bakterier er for helbredet, åbent, da forskellige typer bakterier har forskellige patogene egenskaber, desuden er hverken generelle eller fækale coliforme bakterier de eneste patogene mikrobiologiske faktorer, der virker i vandmiljøet.
Formålet med dette arbejde var at undersøge fænomenet med tilsyneladende genvinding af disse tre store undergrupper af coliforme bakterier i kloreret spildevand. Genvinding af bakterier i klorholdige vande og deres overlevelse i ikke-klorerede vand er blevet udført. I de tilfælde, hvor ødelæggelsen af bakterier over længere tid efter klorering ikke adskiller sig væsentligt fra naturlig, er muligheden for klorering tvivlsom, især hvis spildevandet ikke umiddelbart bruges af mennesker, efter at det er udledt.
De fremlagte data viser, hvor statistisk signifikant stigningen i indholdet af coliforme bakterier er. Det blev fundet, at indholdet af alle undergrupper af bakterier stiger det maksimale indhold observeres på den fjerde eller femte dag (tabel 13.5).
| Ris. 12.3. Diagram over en typisk installation til biologisk spildevandsrensning og test, der skal udføres for at bestemme effektivitetsgraden af dens drift / - bestemmelse af flowparametre g - grove urenheder 3 - sandfang 4 - primær bundfældningstank 5 - sediment fra primær bundfældning tanke 5 - komprimator 7 - slamvand 8 komprimeret sediment 9 - vakuumfilter / O-filtrat - konditioneringskemikalier t - kage 13 - biologisk behandling og sedimentering 14 - overskydende aktiveret slam 5 - chlorering C - flowhastighed 55 - indhold af suspenderede stoffer U55 - antændelsestab af suspenderede faste stoffer - tørre restkoloriter - indhold af fækale coliforme bakterier |
Effektiviteten af desinfektionsprocessen bestemmes ved analyse af en gruppe coliforme bakterier, som er indikatorer for vandkvalitet. Bakteriers følsomhed over for klorering er velkendt, mens virkningen af klorering på protozoer og vira ikke er helt klar. Protozoalarver og tarmvirus er mere modstandsdygtige over for klor end colibakterier og andre tarmbakterier. Der er dog meget lidt, der tyder på, at den nuværende vandbehandlingspraksis er mangelfuld. Der har ikke været dokumenteret udbrud af sygdomme forbundet med forbrug af vand indeholdende virus- eller protozoinfektioner.
Næsten alle stater kræver nu coliform testning af behandlet vand, med antallet af tests, der kræves afhængigt af befolkningen, der serveres. Optælling af fækal coliforme, selvom det normalt er unødvendigt ud fra et regulatorisk perspektiv, er ligetil og kan give yderligere indsigt i situationen. Nogle gange, i forhold til en specifik installation, er der specifikt fastsat grænseværdier for visse indikatorer, såsom koncentrationen af restklor, turbiditet, indhold af opløste faste stoffer, nitrater og farve. Koncentrationen af restklor i distributionssystemet måles for at afgøre, om klorering er tilstrækkelig. Andre laboratorietests er relateret til overvågning af kemiske behandlinger, identificering og korrigering af visse problemer, der opstår i distributionssystemfaciliteter, og forbrugerklager over vandkvalitet. Kemiske reagenser skal opfylde kravene i de relevante specifikationer og bør underkastes traditionel analyse, med en bøde til leverandøren, hvis de afviger fra specifikationerne. For eksempel købes kalk typisk til 88-90 % CaO, alun med 17 % AI2O3 og aktivt kul efter specifikationer for phenolindhold. Hvis kemikalieforsyningskontrakten angiver bøder for leverandøren baseret på laboratorietestresultater, kan dette forhindre, at vandbehandlingsanlægget modtager substandard materialer.
Genoprettelse af indholdet af colibakterier i klorerede vand
Initial